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1、學(xué)習(xí)必備歡迎下載考點(diǎn) 3 3物質(zhì)的提取、分離和鑒定生物組織中還原糖、脂肪及蛋白質(zhì)的鑒定葉綠體中色素的提取和分離DNA 的提取與鑒定物質(zhì)的鑒定與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的綜合經(jīng)典易錯(cuò)題會(huì)診命題角度一生物組織中還原糖、脂肪及蛋白質(zhì)的鑒定1 麥種子分別置于20和 30培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 天,依次取等量的萌發(fā)種子分別制成提取液 I 和提取液。取3 支試管甲、乙、丙,分別加入等量的淀粉液,然后按下圖加入等量的提取液和蒸餾水, 45水浴保溫5 分鐘,立即在3 支試管中加入等量斐林試劑并煮沸2分鐘,搖勻觀察試管中的顏色。結(jié)果是A 甲呈藍(lán)色,乙呈磚紅色,丙呈無色E 甲呈無色,乙呈磚紅色,丙呈藍(lán)色C 甲、乙皆呈藍(lán)色,丙呈磚紅色D
2、甲呈淺磚紅色,乙呈磚紅色,丙呈藍(lán)色考場(chǎng)錯(cuò)解 A或 B 專家把脈 對(duì)種子成分及代謝過程、斐林試劑鑒別葡萄糖的原理不熟悉。種子在20下只有少量葡萄糖生成,而在 30條件下生成葡萄糖較多。斐林試劑是CuS04 和 NaOH混合液,本身為藍(lán)色。對(duì)癥下藥 D2 組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機(jī)物的鑒定實(shí)驗(yàn)中,以下操作錯(cuò)誤的是A 可溶性還原糖的鑒定,可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀B 只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡C 用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)不需要加熱D 使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用考場(chǎng)錯(cuò)解 C或 D 專家把脈 認(rèn)為雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)需要加熱,或認(rèn)為雙縮脲試劑的使用也是現(xiàn)配現(xiàn)用。雙縮脲試劑與斐林
3、試劑成分相同,但濃度不同,使用方法也不同,可以配制保存,檢測(cè)時(shí)不需加熱。對(duì)癥下藥 A專家會(huì)診分析比較可溶性還原糖、 脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定原理、操作過程和注意問題。 斐林試劑由NaOH和 CuS0 混合配制而成,與可溶性還原糖在加熱條件下,生成磚紅色沉淀。雙縮脲試劑4與斐林試劑成分相同,但濃度和使用方法不同,在堿性環(huán)境下,雙縮脲能與2+Cu 作用,形成紫紅色或紫色絡(luò)合物??紙?chǎng)思維訓(xùn)練1 某些單子葉植物, 如菠菜、 鳶尾等的葉子內(nèi)含有大量的可溶性還原糖,但這些植物的葉子不宜做鑒定還原性糖的實(shí)驗(yàn)材料,原因是A 這些植物的葉片不宜磨碎B在研磨時(shí)糖類易被破壞C 葉片中的葉綠素顏色較深,掩蓋了發(fā)生的顏色反應(yīng)
4、D 葉片中光合作用的產(chǎn)物以淀粉的形式存在1 C 解析:鑒定可溶性還原糖時(shí),植物組織是常用的實(shí)驗(yàn)材料,但必需加以選擇,在學(xué)習(xí)必備歡迎下載雙子葉植物中, 光合作用的主要產(chǎn)物葡萄糖形成后合成淀粉,暫時(shí)儲(chǔ)存在葉子內(nèi)。有些單子葉植物,如韭菜、鳶尾,并不將光合作用的產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)榈矸?,因此葉子中有大量的可溶性還原糖, 但是,由于葉片中葉綠素的顏色較深,對(duì)于鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著掩蓋作用,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯。因此,也不宜用單子葉植物的葉子做實(shí)驗(yàn)材料。2 下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象中出現(xiàn)的顏色反應(yīng)敘述正確的是A 向盛有葡萄糖溶液的試管中加入雙縮脲試劑,產(chǎn)生磚紅色沉淀B紙層析法分離葉綠體中的色素,可以觀察到濾紙條上出現(xiàn)4 條色
5、素帶,其顏色從上到下依次是黃綠色、橙黃色、藍(lán)綠色和黃色C DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,D 脂肪可以被蘇丹溶液染成紫色DNA遇二苯胺( 沸水浴) 會(huì)染成藍(lán)色2 C 解析: A 中應(yīng)加斐林試劑,B 中從上到下依次為橙黃色、黃色、藍(lán)綠色、黃綠色,D 中就為橘黃色。命題角度二葉綠體中色素的提取和分離l 在 A、B、C 三個(gè)研缽中加 2 克剪碎的新鮮菠菜綠葉, 并按下表所示添加試劑, 經(jīng)研磨、過濾得到三種不同顏色的溶液,即深綠色、黃綠色( 或褐色 ) 、幾乎無色。注:“ +”表示加;“- ”表示不加。試回答:(1)A處理得到的溶液顏色是,原因是。(2)B處理得到的溶液顏色是,原因是。(3)C處理得到的溶
6、液顏色是,原因是。處理ABCSiO ( 少量 )+2CaCO3( 少量 )-+95乙醇 (10毫升 )+-+蒸餾水 (10毫升 )-+- 考場(chǎng)錯(cuò)解 (1) 幾乎無色沒有 CaC0,色素被破壞(2)黃綠色部分色素因缺少乙3醇不能提取 (3)深綠色能提取全部色素專家把脈 對(duì)葉綠素提取過程中各種物質(zhì)的作用理解不清楚。(1) 因?yàn)?A 中未加 CaCO3,使其中的部分葉綠素受到破壞,所以溶液顏色為黃綠色。(2)B中加入了 SiO2和 CaC0研3磨出的葉綠素等色素不能溶解于蒸餾水中,故溶液幾乎無色。(3)B 中加入了 SiO和 CaCO,23研磨出的葉綠素等色素能溶解于有機(jī)溶劑酒精中,故溶液為深綠色。
7、 對(duì)癥下藥 (1) 黃綠色部分葉綠素受到破壞(2) 幾乎無色葉綠素不溶于水(3) 深綠色大量葉綠素溶于乙醇中2 某同學(xué)在做提取葉綠體巾色素的實(shí)驗(yàn)時(shí),收集到的色素提取液為淡綠色。分析產(chǎn)生該結(jié)果的可能原因是:;學(xué)習(xí)必備歡迎下載;。 考場(chǎng)錯(cuò)解 對(duì)實(shí)驗(yàn)過程不熟悉因而得不出正確答案。 專家把脈 本題具有較大的開放性,要求學(xué)生不僅對(duì)葉綠體中色素的提取和分離過程熟悉,還要求掌握一些實(shí)驗(yàn)原理。如取材上應(yīng)選取葉綠素含量高的葉片;加入CaC03 的目的是防止葉綠體中的色素被破壞;而丙酮的量則不宜加得太多,否則會(huì)使得色素溶液過稀,從而使實(shí)驗(yàn)效果不理想。 對(duì)癥下藥 研磨不充分, 色素未能充分提取出來丙酮加入的量太多稀
8、釋了色素提取液未加CaCO3粉末,葉綠素分子被破壞選材不當(dāng),沒有利用鮮嫩綠葉專家會(huì)診葉綠體中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑中, 所以用丙酮提取葉綠體中的色素。 葉綠體中的四種色素在層析液中的溶解度不同, 層析液在濾紙上擴(kuò)散的速度也不同, 溶解度高的擴(kuò)散得快,溶解度低的擴(kuò)散得慢。 在實(shí)驗(yàn)操作中應(yīng)注意葉片的選擇、 濾液細(xì)線的畫法和色素的分離方法??紙?chǎng)思維訓(xùn)練1 下列哪組是影響葉綠體色素分離效果的關(guān)鍵步驟選植物綠葉研磨過濾畫濾液細(xì)線層析時(shí)不讓濾液細(xì)線觸及層析液觀察色素帶A BC D1 A 解析:本實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵是保證色素的量,選材時(shí)新鮮綠葉中色素含量高。由于色素存在于葉綠體中,所以要充分研磨,破壞葉綠體,使色素
9、大量被釋放。色素能溶于層析液,所以層析時(shí),一定注意不要讓濾液細(xì)線觸及層析液。2 某同學(xué)在做“葉綠體中色素的提取分離”實(shí)驗(yàn)時(shí),操作情況如下所述,結(jié)果實(shí)驗(yàn)失敗請(qǐng)指出其錯(cuò)誤所在: (1) 將 5 g 新鮮完整的菠菜葉,放入研缽中,加入丙酮、石英砂、CaCO3以后,迅速研磨。然后將研磨液倒入基部放有濾紙的小玻璃漏斗中過濾,將濾液收集到小試管中備用。 (2) 用毛細(xì)吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線處小心均勻地畫出一條濾液細(xì)線,并連續(xù)迅速地重復(fù)畫2 3 次。(3) 把畫好細(xì)線的濾紙條插入層析液中,并不斷搖晃, 以求加快色素在濾紙條上的擴(kuò)散。2(1) 未去除粗葉脈和將葉剪碎,降低了葉綠素提取率;倒人基部放有濾紙的
10、小玻璃漏斗中;未用棉塞塞緊試管口。(2) 上一次濾液細(xì)線未干燥,即開始下一次畫線,使濾液線較粗或線上色素量較低(3) 由于搖晃,層析液接觸濾液線,溶解了色素命題角度三DNA的提取與鑒定1 關(guān)于 DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)材料的選擇,也經(jīng)過了多次實(shí)驗(yàn)效果的比較,最終選取雞血做實(shí)驗(yàn)材料的原因是什么?請(qǐng)回答:(1)雞血細(xì)胞中紅細(xì)胞,家雞屬于鳥類,新陳代謝旺盛,含紅細(xì)胞較多,可以提供豐富的。(2) 生活在牧區(qū)的人們,采集牛馬血比較方便,若他們按實(shí)驗(yàn)要求完成實(shí)驗(yàn)步驟后,結(jié)學(xué)習(xí)必備歡迎下載果是,這是因?yàn)檫@些動(dòng)物和人類一樣實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行,這是因?yàn)椤?3)若選用動(dòng)物肝臟做實(shí)驗(yàn)材料,在提取之前, 最好增加,若改用動(dòng)物肝
11、臟做實(shí)驗(yàn)材料,使組織細(xì)胞更易分解。 考場(chǎng)錯(cuò)解DNA(3)鹽酸 (1)較多DNA(2) 無紅色細(xì)胞或很少不合DNA(細(xì)胞無細(xì)胞核)肝細(xì)胞含專家把脈 對(duì)哺乳動(dòng)物和鳥類紅細(xì)胞的區(qū)別不清楚。鳥類紅細(xì)胞含有細(xì)胞核,而哺乳類紅細(xì)胞 ( 成熟 ) 不舍細(xì)胞核,無DNA,肝臟細(xì)胞含細(xì)胞核,可作為提取DNA的材料,而使肝臟組織細(xì)胞分散開,應(yīng)使用胰蛋白酶處理。 對(duì)癥下藥 (1)含有細(xì)胞核DNA(2)DNA含量很少紅細(xì)胞無細(xì)胞核, 無 DNA肝臟細(xì)胞含有細(xì)胞核 (3) 胰蛋白酶2 DNA 不溶于下列何種溶液A NaCl 溶液B酒精溶液C KCl 溶液DMgCl2 溶液考場(chǎng)錯(cuò)解 A 專家把脈 對(duì) DNA的提取方法理解
12、不當(dāng)導(dǎo)致錯(cuò)選。DNA 在 0.14 mol/L的 NaCl 溶液中溶解度最低,而在2 mol/L的 NaCl 溶液中溶解度則較高。DNA不溶于 95的酒精溶液。 對(duì)癥下藥 B專家會(huì)診DNA 的粗提取與鑒定的原理是DNA 在氯化鈉溶液中的溶解度隨氯化鈉的濃度變化而改變。 DNA不溶于酒精溶液,細(xì)胞中某些物質(zhì)可以溶于酒精溶液而對(duì)DNA進(jìn)行提純。 DNA遇二苯胺會(huì)染成藍(lán)色可用來鑒定DNA。實(shí)驗(yàn)過程包括制備雞血細(xì)胞液、提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)、溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA、析出 DNA、析出的DNA再溶解、提取較純凈的DNA鑒定。考場(chǎng)思維訓(xùn)練1 在 DNA提取分離實(shí)驗(yàn)中,有五次用玻璃棒攪拌。第一次攪拌加蒸餾水
13、的雞血細(xì)胞液是為了,第二次攪拌加2 mol/L的 NaCl 溶液是為了使其,第三次攪拌加蒸餾水至0.14 mol/L的 NaCl 溶液是為了,第四次攪拌加2mol/L NaCl溶液中的紗布上黏稠物是為了,第五次攪拌體積分?jǐn)?shù)為95的酒精是為了。1使血細(xì)胞加速破裂混合均勻析出含DNA的黏稠物使DNA黏稠物盡可能多地溶于溶液中提取含雜質(zhì)較少的DNA解析:要求理解DNA 提取實(shí)驗(yàn)每一步驟的含義和作用。2 一位同學(xué)受老師委托去采集雞血,雞群中有雌雞也有雄雞,他想應(yīng)該取含紅細(xì)胞最多的個(gè)體的血,于是他選了下列哪種雞A 健壯的雄雞B健壯的雌雞C 小母雞D移植入睪丸的母雞2 A 解析:雄雞的單位體積血中紅細(xì)胞數(shù)
14、多于雌雞。探究開放題解答綜合問題物質(zhì)的鑒定與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的綜合1 是與高中生物實(shí)驗(yàn)有關(guān)的內(nèi)容。(1) 請(qǐng)將下列實(shí)驗(yàn)名稱與材料、試劑、用具的對(duì)應(yīng)關(guān)系用連線表示。每項(xiàng)只準(zhǔn)選擇一次。學(xué)習(xí)必備歡迎下載實(shí)驗(yàn)名稱材料、試劑、用具探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的觀察溫度對(duì)淀粉酶活性的影響葉綠體中色素的提取和分離觀察植物細(xì)胞的有絲分裂黑藻斐林試劑碘液載玻片乙醇(2)做“葉綠體中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)時(shí),畫濾液細(xì)線要注意的事項(xiàng)是;為了防止丙酮和苯危害我們身體健康,在研磨和層析分離時(shí)應(yīng)當(dāng)分別采取的操作措施是、。 解題思路 本題屬于送分題,牢記課本內(nèi)容即可。解答 (1) 探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用斐林試劑細(xì)胞
15、質(zhì)流動(dòng)的觀察黑藻溫度對(duì)淀粉酶活性的影響碘液葉綠體中色素的提取與分離乙醇觀察植物細(xì)胞的有絲分裂載玻片(2) 濾液細(xì)線均勻且直, 濾液干后重復(fù) 2 3 次研磨時(shí)研缽上加開洞的紙蓋層析裝置要加培養(yǎng)皿蓋2 貯藏根組織細(xì)胞中是否存在蛋白質(zhì)和DNA?某生物小組對(duì)此進(jìn)行研究,他們從網(wǎng)上查閱資料得知:蛋白質(zhì)在10 NaCl 溶液中可沉淀析出;在蛋白質(zhì)溶液中,加入雙縮脲試劑,溶液呈現(xiàn)特有的顏色; DNA 溶于 10 NaCl 溶液,但在 95酒精中呈白色絮狀沉淀析出。實(shí)驗(yàn)材料:白蘿卜。實(shí)驗(yàn)用具:粉碎機(jī)、燒杯、漏斗、試管、濾紙、玻棒、鑷子、載玻片、天平、紗布。藥品及試劑:蒸餾水、NaCl、 95酒精、甲基綠染液、
16、雙縮脲試劑、蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品。請(qǐng)你根據(jù)所提供的條件參與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并完成實(shí)驗(yàn)。一、材料處理:。二、提?。?。三、鑒定及結(jié)果:。四、討論:。1 蛋白質(zhì)在蘿卜貯藏根組織細(xì)胞中所起的作用是。2 DNA主要來自蘿卜貯藏根組織細(xì)胞的。 解題思路 本題把物質(zhì)鑒定與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)綜合起來考查,既考查了DNA和蛋白質(zhì)的鑒定結(jié)果,又考查了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中對(duì)照原則的應(yīng)用,如做有無蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中必須要設(shè)計(jì)一組空白的對(duì)照組,從而使實(shí)驗(yàn)更為嚴(yán)謹(jǐn)。解答 一、材料處理:向經(jīng)紗布過濾得到的濾液中加入10NaCl,直至沉淀析出。經(jīng)濾紙過濾,將濾紙上的沉淀物放入試管中,加入1 mL 蒸餾水振蕩,用于蛋白質(zhì)鑒定。二、提?。撼サ鞍踪|(zhì)的濾液中,加入
17、95酒精,用玻棒輕輕攪拌,見有白色絮狀沉淀產(chǎn)生,經(jīng)濾紙過濾,用鑷子將濾紙上的絮狀沉淀置于載玻片上,用于DNA鑒定。三、鑒定及結(jié)果:1在用于蛋白質(zhì)鑒定的試驗(yàn)試管中,加入雙縮脲試劑,產(chǎn)生呈色反應(yīng),同時(shí)將蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品和 l mL 蒸餾水放入另一支試管,加入雙縮脲試劑產(chǎn)生呈色反應(yīng)。觀察到兩支試管中顏色基本一致,說明試驗(yàn)試管中有蛋白質(zhì)存在。學(xué)習(xí)必備歡迎下載2在用于 DNA鑒定的栽玻片上,滴加甲基綠染液, DNA呈現(xiàn)藍(lán)綠色,說明該白色絮狀沉淀為 DNA。3通過對(duì)白蘿卜貯藏根勻漿濾液的檢測(cè),說明有蛋白質(zhì)和DNA的存在。四、討論:1是細(xì)胞膜等生物的結(jié)構(gòu)成分,酶等功能蛋白質(zhì)的組成成分,也是糊粉粒等貯存蛋白質(zhì)的
18、成分。2細(xì)胞核規(guī)律總結(jié)解答生化鑒定類實(shí)驗(yàn)題時(shí),首先要抓住基礎(chǔ),如三大有機(jī)物的鑒定試劑及顏色反應(yīng)等:然后就是要注意靈活運(yùn)用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的一些策略, 如對(duì)照原則及單一變量原則的運(yùn)用, 科學(xué)的安排實(shí)驗(yàn)順序,語言要規(guī)范準(zhǔn)確等。做到上述兩點(diǎn),此類題便不難作答??键c(diǎn)高分解題綜合訓(xùn)練1 四瓶失去標(biāo)簽的無色透明液體各裝有大腸桿菌超標(biāo)的自來水:丙球蛋白 ( 一種抗體 ) 溶液、溶解著DNA分子的 0.015 mol/LNaCl溶液、葡萄糖溶液。依次利用下列哪組物質(zhì)即可鑒別出來伊紅一美藍(lán)培養(yǎng)液雙縮脲試劑蘇丹二苯胺班氏試劑斐林試劑碘液ABCD1 D解析:大腸桿菌在伊紅一美藍(lán)培養(yǎng)基中形成深紫色菌落。蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑作用
19、產(chǎn)生紫色,二苯胺試劑可用于鑒定DNA,斐林試劑可用于鑒定還原糖。2 部分省市爆發(fā)了禽流感,市場(chǎng)上買不到活雞采雞血,使"DNA的粗提與鑒定”這一實(shí)驗(yàn)不能開展,有人提出用市場(chǎng)上容易買到的新鮮豬血或牛血代替,你認(rèn)為A可以,新鮮的豬血和牛血中有大量的紅細(xì)胞,可以提取B不可以,新鮮的豬血或牛血中無紅細(xì)胞,不能提取DNAC可以,新鮮的豬血或牛血中有的紅細(xì)胞中有細(xì)胞核,可以提取D不可以,新鮮的豬血或牛血中的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核,不能提取DNADNADNA2 D 解析:哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞中無細(xì)胞核。3某人做淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖水解作用的實(shí)驗(yàn)時(shí),在對(duì)照試管加入斐林試劑后,也出現(xiàn)了磚紅色沉淀,可能原因是A 試管中加入的是麥芽糖或葡萄糖B 蔗糖是還原性糖C 裴林試劑失效了D蔗糖放置久了,被微生物分解,也可能是試管不干凈3 D 解析:蔗糖被微生物分解可產(chǎn)生可溶性還原糖。4 下圖表示改進(jìn)裝置,下列與之有關(guān)的敘述中,不正確的是A 應(yīng)向培養(yǎng)皿中倒入
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