凝集反應試驗

1、關于凝集反應試驗現在學習的是第一頁，共30頁凝集反應（agglutination）是指是指顆粒性抗原顆粒性抗原，例如細菌、紅細胞、螺旋，例如細菌、紅細胞、螺旋體、細胞性抗原，或可溶性抗原（或抗體）體、細胞性抗原，或可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒結合成與載體顆粒結合成致敏顆粒致敏顆粒后，與相應的抗后，與相應的抗體（或抗原）在適量的電解質存在的條件體（或抗原）在適量的電解質存在的條件下，經一定時間后凝聚成肉眼可見的凝集下，經一定時間后凝聚成肉眼可見的凝集現象?，F象?，F在學習的是第二頁，共30頁凝集反應的特點凝集反應的特點顆粒性抗原顆粒性抗原致敏顆粒致敏顆粒（可溶性抗原或抗體與載體顆粒結合）（可溶性

2、抗原或抗體與載體顆粒結合）電解質的存在電解質的存在肉眼可見的凝集現象肉眼可見的凝集現象現在學習的是第三頁，共30頁凝集反應的發(fā)生分兩階段：抗原抗體的特異結合抗原抗體的特異結合出現可見的顆粒凝集出現可見的顆粒凝集現在學習的是第四頁，共30頁凝集反應的類型直接凝集試驗直接凝集試驗玻片凝集試驗：玻片凝集試驗：ABO血型血型試管凝集試驗：外斐試驗，肥達試驗試管凝集試驗：外斐試驗，肥達試驗間接凝集試驗間接凝集試驗正向間接凝集試驗正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗間接凝集抑制試驗協(xié)同凝集試驗協(xié)同凝集試驗間接血凝試驗間接血凝試驗膠乳凝集試驗膠乳凝集試驗明膠凝集試驗明膠凝集試驗現

3、在學習的是第五頁，共30頁根據凝集反應中抗原的性質，反應的方根據凝集反應中抗原的性質，反應的方式分為：式分為：直接凝集反應直接凝集反應間接凝集反應間接凝集反應現在學習的是第六頁，共30頁現在學習的是第七頁，共30頁直接凝集反應（direct agglutination） 細菌、螺旋體和紅細胞等顆?？乖?，細菌、螺旋體和紅細胞等顆?？乖?，在適當電解質參與下可直接與相應抗體在適當電解質參與下可直接與相應抗體結合出現凝集，稱為直接凝集反應。參結合出現凝集，稱為直接凝集反應。參加反應的顆粒性抗原稱為凝集原加反應的顆粒性抗原稱為凝集原（agglutinogen），抗體稱為凝集素），抗體稱為凝集素（aggl

4、utinin） ?，F在學習的是第八頁，共30頁玻片法：（定性）玻片法：（定性） 細菌鑒定細菌鑒定 ABO血型的鑒定血型的鑒定試管法：試管法： （半定量）（半定量） 肥達試驗（肥達試驗（Widal test）-傷寒傷寒 外斐試驗（外斐試驗（Weil-Felix test）-立克次體立克次體 交叉配血試驗交叉配血試驗現在學習的是第九頁，共30頁間接凝集反應（indirect agglutination）將可溶性抗原（或抗體）先吸附或偶聯將可溶性抗原（或抗體）先吸附或偶聯與免疫無關大小適當的顆粒性載體的表與免疫無關大小適當的顆粒性載體的表面，使之成為致敏載體顆粒，然后與相面，使之成為致敏載體顆粒，然

5、后與相應抗體（或抗原）作用，在適宜的電解應抗體（或抗原）作用，在適宜的電解質存在的條件下，出現特異性凝集現象，質存在的條件下，出現特異性凝集現象，稱間接凝集反應（稱間接凝集反應（indirect agglutination）或被動凝集反應（或被動凝集反應（passive agglutination）。）。其敏感度高于直接凝集反應和沉淀反應。其敏感度高于直接凝集反應和沉淀反應?，F在學習的是第十頁，共30頁常用載體：RBC聚苯乙烯膠乳（聚苯乙烯膠乳（polystyrene latex）明膠顆粒明膠顆粒活性炭活性炭皂土（皂土（bentonite） 火棉膠火棉膠 現在學習的是第十一頁，共30頁間接凝集

6、反應分類依據根據致敏載體用的是抗原（正向）或抗根據致敏載體用的是抗原（正向）或抗體（反向）體（反向）根據載體（根據載體（RBC，膠乳，明膠），膠乳，明膠）根據凝集反應的方式（間接凝集試驗，根據凝集反應的方式（間接凝集試驗，間接凝集抑制試驗，協(xié)同凝集試驗）間接凝集抑制試驗，協(xié)同凝集試驗）現在學習的是第十二頁，共30頁間接反應的常見類型 間接凝集試驗間接凝集試驗 間接血凝試驗間接血凝試驗 膠乳凝集試驗膠乳凝集試驗 明膠凝集試驗明膠凝集試驗 間接凝集反應的應用間接凝集反應的應用現在學習的是第十三頁，共30頁1、（正向）間接凝集試驗現在學習的是第十四頁，共30頁2 反向間接凝集試驗現在學習的是第十五頁

7、，共30頁3、間接凝集抑制試驗現在學習的是第十六頁，共30頁本次實驗內容一、第一次加強免疫一、第一次加強免疫二、二、ABO血型鑒定血型鑒定現在學習的是第十七頁，共30頁目的與要求掌握凝集反應的原理與類型掌握玻片凝集法操作與結果判斷熟悉ABO血型鑒定的原理與操作現在學習的是第十八頁，共30頁玻片凝集法-ABO血型鑒定試驗目的 通過標準血清抗體鑒定紅細胞上ABO血型系統(tǒng)抗原，掌握鹽水介質法進行ABO血型系統(tǒng)正定型的基本操作方法和結果判斷。 現在學習的是第十九頁，共30頁實驗原理根據IgM類特異性血型抗體與紅細胞上特異性抗原結合能夠出現凝集反應的原理，用已知IgM類特異性標準抗血清與被檢紅細胞在鹽水

8、介質中反應（室溫），若出現凝集想象，表明被檢紅細胞膜上有與血型抗體相對應的抗原，從而判斷和鑒定被檢者的血型?，F在學習的是第二十頁，共30頁實驗材料與方法試劑：抗試劑：抗A血清，抗血清，抗B血清血清材料：玻片，采血針，消毒干棉球，酒材料：玻片，采血針，消毒干棉球，酒精棉球等精棉球等現在學習的是第二十一頁，共30頁實驗方法與步驟1、標記玻片：取玻片一張，一分為二，分別標記為抗、標記玻片：取玻片一張，一分為二，分別標記為抗A，抗抗B。2、采血：用酒精棉球消毒被檢者左手無名指或中指內側，、采血：用酒精棉球消毒被檢者左手無名指或中指內側，用采血針刺破皮膚，用干棉球擦去第一滴血，稍加擠壓，用采血針刺破皮膚

9、，用干棉球擦去第一滴血，稍加擠壓，使其流出第二滴血，裝入鹽水試管，搖勻，即成血細胞懸使其流出第二滴血，裝入鹽水試管，搖勻，即成血細胞懸液。液。3、加抗血清：滴加抗、加抗血清：滴加抗A，抗，抗B血清于玻片標記處、血清于玻片標記處、4、加、加RBC：在抗：在抗A，抗，抗B血清中滴加血清中滴加RBC各一滴。各一滴。5、混勻：前后左右搖動，觀察有無血細胞凝集出現。、混勻：前后左右搖動，觀察有無血細胞凝集出現。6、結果：記錄受檢者紅細胞凝集情況及血型鑒定結果。、結果：記錄受檢者紅細胞凝集情況及血型鑒定結果?，F在學習的是第二十二頁，共30頁現在學習的是第二十三頁，共30頁ABO血型結果判斷抗抗B抗抗A血型

10、血型-+-+-現在學習的是第二十四頁，共30頁間接乳凝試驗檢測類風濕因子間接乳凝試驗檢測類風濕因子間接凝集反應也稱為被動凝集反應，是間接凝集反應也稱為被動凝集反應，是將可溶性抗原或抗體吸附于載體顆粒表將可溶性抗原或抗體吸附于載體顆粒表面、再與相應的抗體或抗原結合，出現面、再與相應的抗體或抗原結合，出現凝集現象。間接乳凝試驗檢測類風濕因凝集現象。間接乳凝試驗檢測類風濕因子。子。常用類風濕因子檢測。常用類風濕因子檢測?，F在學習的是第二十五頁，共30頁【操作方法】1、輕輕混勻膠乳試劑、輕輕混勻膠乳試劑2、核對陰、陽性對照、核對陰、陽性對照3、在反應板孔中加、在反應板孔中加1滴未稀釋血清滴未稀釋血清2

11、0ul4、然后加、然后加1滴膠乳試劑在血清中（陰陽性對照滴膠乳試劑在血清中（陰陽性對照同此法）同此法）5、輕輕搖動其充分混勻、輕輕搖動其充分混勻2分鐘內觀察結果。分鐘內觀察結果?，F在學習的是第二十六頁，共30頁實驗結果實驗結果二、二、ABO血型鑒定結果：血型鑒定結果：1、A型血抗型血抗A試劑凝集為。試劑凝集為。2、B型血抗型血抗B試劑凝集為。試劑凝集為。3、O型血抗型血抗A、B試劑不凝集為。試劑不凝集為。4、AB型血抗型血抗A、B試劑都凝集為。試劑都凝集為?，F在學習的是第二十七頁，共30頁三、三、RF測定結果測定結果 1、有凝集出現、有凝集出現RF為陽性。為陽性。2、無凝集出現、無凝集出現RF為陰性。為陰性?，F在學習的是第二十八頁，共30頁注意事項注意事項 1、加強無菌操作、安全防范意識。、加強無菌操作、安全防范意識。2、如一次采血要求采集幾個標本時，應按一下順、如一次采血要求采集幾個標本時，應按一下順序采血：血培養(yǎng)管、無抗凝劑及添加劑管，凝血現序采血：血培養(yǎng)管、無抗凝劑及添加劑管，凝血現象，有抗凝劑（添加劑）管。象，有抗凝劑（添加劑）管。3、在做配型試驗時，如發(fā)現有不配合現象，則取受檢、在做配型試驗時，如發(fā)現有不配合現象，則取受檢者血清，用已知者血清，用已