實(shí)驗(yàn)七微生物大小和數(shù)量的測定課件

1、實(shí)驗(yàn)七 微生物大小和數(shù)量的測定編輯ppt實(shí)驗(yàn)七 微生物大小和數(shù)量的測定編輯ppt目的要求1、掌握用顯微鏡測微尺測量微生物大小的基本原理及方法。2、利用血球計(jì)數(shù)器，進(jìn)行微生物數(shù)量的直接測定，并掌握其原理和傳統(tǒng)方法。 編輯ppt目的要求1、掌握用顯微鏡測微尺測量微生物大小的基本原理及方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一利用顯微鏡測微尺測量微生物大小編輯ppt實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一利用顯微鏡測微尺測量微生物大小編輯ppt顯微鏡成像原理經(jīng)過顯微鏡物鏡和目鏡的二級(jí)放大，形成肉眼可見的放大的物像（虛像）。編輯ppt顯微鏡成像原理經(jīng)過顯微鏡物鏡和目鏡的二級(jí)放大，形成肉眼可見的構(gòu)造及原理目鏡測微尺安裝于顯微鏡的目鏡部位；鏡臺(tái)測微尺校正時(shí)放置于

2、顯微鏡的載物臺(tái)上（樣品處），測量時(shí)不需要；利用鏡臺(tái)測微尺（已知刻度長度）校正目鏡測微尺在不同物鏡下代表的實(shí)際長度（m）。編輯ppt構(gòu)造及原理目鏡測微尺安裝于顯微鏡的目鏡部位；編輯ppt利用鏡臺(tái)測微尺校正目鏡測微尺顯微鏡測微尺的組成 目鏡測微尺肉眼可見物像為一級(jí)放大（7種，根據(jù)測定的材料不同進(jìn)行選擇）。 鏡臺(tái)測微尺肉眼可見物像為二級(jí)放大，和觀察樣品處于同一焦面。不可能利用真正的尺子來進(jìn)行測量（微?。?； 不可能制成（或制作成本過高） 不可能和所觀察樣品同時(shí)使用只能用虛擬的尺子進(jìn)行測量（物像）。標(biāo)定。編輯ppt利用鏡臺(tái)測微尺校正目鏡測微尺顯微鏡測微尺的組成編輯ppt鏡臺(tái)測微尺在4物鏡下的情況編輯pp

3、t鏡臺(tái)測微尺在4物鏡下的情況編輯ppt鏡臺(tái)測微尺在10物鏡下的情況編輯ppt鏡臺(tái)測微尺在10物鏡下的情況編輯ppt鏡臺(tái)測微尺在40物鏡下的情況編輯ppt鏡臺(tái)測微尺在40物鏡下的情況編輯ppt目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺4物鏡下校正示意圖編輯ppt目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺4物鏡下校正示意圖編輯ppt目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺10物鏡下校正示意圖編輯ppt目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺10物鏡下校正示意圖編輯ppt目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺40物鏡下校正示意圖編輯ppt目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺40物鏡下校正示意圖編輯ppt目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺100物鏡下校正示意圖編輯ppt目鏡測微尺鏡臺(tái)測微尺100物鏡下校正示意圖編輯ppt編輯ppt

4、編輯ppt說明：鏡臺(tái)測微尺刻度距離的物像隨物鏡的變化而變化（由小變大）；目鏡測微尺刻度距離的物像在目鏡不變換的情況下，是不隨物鏡的變化而變化。目鏡測微尺校正（代表）尺寸隨物鏡放大倍數(shù)增大成反比例減小。編輯ppt說明：鏡臺(tái)測微尺刻度距離的物像隨物鏡的變化而變化（由小變大）注意：刻度的刻線會(huì)隨物鏡的放大倍數(shù)而變粗（物像）；校正的目鏡測微尺在不同物鏡下代表的長度是和物鏡的放大倍數(shù)成反比的；實(shí)際校正過程中，會(huì)因加工精度和刻度的放大出現(xiàn)微小誤差。編輯ppt注意：刻度的刻線會(huì)隨物鏡的放大倍數(shù)而變粗（物像）；編輯ppt實(shí)驗(yàn)步驟菌種： 釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）1、放置目鏡

5、測微尺（已放好，或直接使用測微目鏡）2、放置鏡臺(tái)測微尺（1毫米被100等分，放于載物臺(tái)上）3、校正目鏡測微尺（不同物鏡倍數(shù)）4、用校好的目鏡微尺測定酵母菌大?。?0個(gè)細(xì)胞，同時(shí)觀察酵母菌形態(tài)），計(jì)算平均值5、微生物的大小表述：寬長（m）說明： 微生物（其它生物也有類似的情況）的大小是有一定范圍的，實(shí)際表述為0.51.04.0 7.0m（舉例） 編輯ppt實(shí)驗(yàn)步驟菌種：編輯ppt目鏡測微尺校正結(jié)果接物鏡接物鏡倍數(shù)目鏡測微尺格數(shù)鏡臺(tái)測微尺格數(shù)目鏡測微尺每格代表的長度（m）搜索物鏡低倍鏡高倍鏡油鏡接目鏡放大倍數(shù)： 編輯ppt目鏡測微尺校正結(jié)果接物鏡接物鏡倍數(shù)目鏡測微尺格數(shù)鏡臺(tái)測微尺格微生物大小測定結(jié)

6、果微生物細(xì)胞編號(hào)目鏡測微尺每格代表的長度（m）寬長目鏡測微尺格數(shù)計(jì)算實(shí)際寬度（m）目鏡測微尺格數(shù)計(jì)算實(shí)際寬度（m）12345678910平均寬、長（m）菌體大小范圍（m）實(shí)驗(yàn)用微生物名稱：編輯ppt微生物大小測定結(jié)果微生物細(xì)胞編號(hào)目鏡測微尺每格代表的長度（實(shí)驗(yàn)內(nèi)容二利用血球計(jì)數(shù)板測定酵母細(xì)胞數(shù)編輯ppt實(shí)驗(yàn)內(nèi)容二利用血球計(jì)數(shù)板測定酵母細(xì)胞數(shù)編輯ppt顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將待測樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上（又稱計(jì)數(shù)器），于顯微鏡下直接計(jì)數(shù)的一種簡便、快速、直觀的方法。國內(nèi)常用的計(jì)數(shù)器有血球（血細(xì)胞）計(jì)數(shù)板、 Petroff-Hausser計(jì)菌器及Hawksley計(jì)菌器。血

7、球（血細(xì)胞）計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片，由四條槽構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)；中間較寬的平臺(tái)又被一短槽隔成兩半，每一邊的平臺(tái)各刻有一個(gè)方格網(wǎng)，每個(gè)方格網(wǎng)共分為九個(gè)大方格，中間的大方格即為計(jì)數(shù)室。編輯ppt顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將待測樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面血球計(jì)數(shù)板俯視圖血球計(jì)數(shù)板剖面圖編輯ppt血球計(jì)數(shù)板俯視圖血球計(jì)數(shù)板剖面圖編輯ppt不同規(guī)格血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室（a）麥?zhǔn)涎蛴?jì)數(shù)板；（b）希里格氏血球計(jì)數(shù)板編輯ppt不同規(guī)格血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室（a）麥?zhǔn)涎蛴?jì)數(shù)板；（b）希里格血球計(jì)數(shù)板的大方格顯微照片編輯ppt血球計(jì)數(shù)板的大方格顯微照片編輯ppt血球計(jì)數(shù)板的中方格及小方格顯微照片編輯ppt血球計(jì)數(shù)板的

8、中方格及小方格顯微照片編輯ppt實(shí)驗(yàn)步驟菌種： 釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）稀釋鏡檢計(jì)數(shù)室（熟悉計(jì)數(shù)室結(jié)構(gòu)） 蓋上蓋玻片加樣品（不能有氣泡）靜止5分鐘左右顯微鏡計(jì)數(shù)（5個(gè)中方格）清洗血球計(jì)數(shù)板利用吸水紙擦拭干凈。注意觀察出芽情況，計(jì)算總菌數(shù)、出芽率。計(jì)算公式：（B=100）編輯ppt實(shí)驗(yàn)步驟菌種：編輯ppt將結(jié)果記錄于下表中A表示五個(gè)中方格中的總菌數(shù)；B表示菌液稀釋倍數(shù)。計(jì)數(shù)室各中方格中菌數(shù)AB二室平均值菌數(shù)/ml12345第一室第二室編輯ppt將結(jié)果記錄于下表中A表示五個(gè)中方格中的總菌數(shù)；B表示菌液注意：位于格線上的菌體一般只計(jì)入上方和右邊線上的細(xì)胞；對(duì)于酵

9、母菌來說，出芽生殖的芽體大小達(dá)到母細(xì)胞的一半時(shí)，即作為兩個(gè)菌體（細(xì)胞）計(jì)數(shù)，反之，計(jì)為一個(gè)；血球計(jì)數(shù)板只適用于計(jì)數(shù)單細(xì)胞生物；細(xì)菌等原核生物因需要在油鏡下觀察，一般血球計(jì)數(shù)板不能使用，而采用Petroff-Hausser計(jì)數(shù)板（進(jìn)口購買，其計(jì)數(shù)室有效空間高度為0.02mm）。編輯ppt注意：位于格線上的菌體一般只計(jì)入上方和右邊線上的細(xì)胞；編輯p附：活菌染色美蘭法在顯微鏡下區(qū)分死活菌觀察活菌的方法？注意死活菌的區(qū)分，分別計(jì)數(shù)，計(jì)算成活率。原理：活菌細(xì)胞新陳代謝中有大量脫氫作用，具有較強(qiáng)的還原性，可以使美蘭褪色變成無色，活細(xì)胞不能染上顏色，死細(xì)胞被染上藍(lán)色。編輯ppt附：活菌染色美蘭法在顯微鏡下區(qū)

10、分死活菌觀察活菌的方法？注實(shí)驗(yàn)步驟菌種： 釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）操作步驟：取1mL細(xì)胞懸液放入一支小試管中，加入1mL 0.5%美蘭溶液，混勻后立即制片觀察（水封片），或利用血球計(jì)數(shù)板制片計(jì)數(shù)（可以區(qū)分死活細(xì)胞，計(jì)算出細(xì)胞的成活率）。操作要求：動(dòng)作要快，否則活細(xì)胞接觸美蘭染料過長也會(huì)死，一般要求在510分鐘內(nèi)完成計(jì)數(shù)。編輯ppt實(shí)驗(yàn)步驟菌種：編輯ppt思考題1、記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ，計(jì)算出菌懸液中酵母菌的大小、數(shù)量、出芽率和存活率。2、試比較平板菌落計(jì)數(shù)法和顯微鏡下直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)缺點(diǎn)及應(yīng)用？3、在不改變目鏡和目鏡測微尺，而改用不同放大倍數(shù)的物鏡來測定同一菌體的大小時(shí)，其測定結(jié)果