細胞膜的滲透性課件

實驗三、細胞膜的滲透性一、實驗目的了解細胞膜的滲透性及各種物質進入細胞的速度。二、實驗原理與人工脂雙層膜不同的是，生物膜不但允許水和非極性分子借簡單的物理擴散作用透過，還允許各種極性分子，如離子、糖、氨基酸、核苷酸及很多細胞代謝產(chǎn)物通過特有的機制通過。血紅蛋白從紅細胞中逸出的現(xiàn)象稱為溶血現(xiàn)象。

將紅細胞放置在各種溶液中，滲入紅細胞的溶質能提高紅細胞滲透壓，使水進入紅細胞，引起溶血及細胞膜破裂。由于溶質透入速度不同，溶血時間也不同。因此，可通過溶血現(xiàn)象來測量各種物質通透性的差別。三、材料、試劑和儀器

1．材料一齡雞，將雞血溶于含有抗凝劑的等滲液中（肝素鈉0.2mg/mL,一般范圍在0.01-0.2mg/mL；等滲液為0.15mol/LNaCl）

2.試劑0.17mol／L氯化鈉，0.17mol／L氯化銨，0.17mol／L硝酸鈉，0.32mol／L葡萄糖，0.32mol／L甘油，0.32mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇；0.12mol／L硫酸鈉，0.10mol／L草酸鈉，0.10mol／L醋酸鈉，

3.器材試管，1mL移液槍，載玻片，蓋玻片，光學顯微鏡等。（二）血細胞血細胞分為三類：紅細胞、白細胞、血小板。

1、紅細胞呈雙面凹陷的圓盤狀，直徑約為7.5微米，沒有細胞核，細胞質內沒有細胞器而有大量血紅蛋白。血液的顏色就是由血紅蛋白決定的。血紅蛋白具有與氧和二氧化碳結合的能力。2、白細胞在血液中呈球形，能以變形運動穿過毛細血管壁進入周圍組織中。根據(jù)細胞質中是否含有特殊顆粒，可把白細胞分為粒細胞和無粒細胞。無粒細胞分為兩種，淋巴細胞和單核細胞。粒細胞分為中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞。3、血小板也稱血栓細胞，在流動的血液中呈雙面凸的圓盤狀，側面看呈梭形，直徑2-4微米。血小板的功能是參與止血與凝血。紅細胞壓積：又稱血細胞比容，指的是血細胞在血液中所占的容積百分比。正常成年男性為40%～50%，女性37%～48%，它反映了血液中紅細胞和血漿的相對數(shù)量變化。血清：血液經(jīng)自然凝固1～2小時，血凝塊回縮，析出淡黃色透明液體即血清。兩個概念肝素的作用機理肝素在體內、體外均有強大抗凝作用。與其帶大量負電荷有關，可使多種凝血因子滅活。這一作用依賴于抗凝血酶III（antithrombin

III，AT

III）。At

III是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含絲氨酸的蛋白酶的抑制劑。肝素與At

Ⅲ所含的賴氨酸結合后引起AT

Ⅲ構象改變，使At

Ⅲ所含的精氨酸殘基更易與凝血酶的絲氨酸殘基結合，形成At

III凝血酶復合物而使酶滅活，肝素可加速這一反應達千倍以上。2．溶血現(xiàn)象觀察：取試管一支加入3mL蒸餾水，加入1滴或2滴稀釋的雞血，輕混一下，然后靜止注意觀察溶液的顏色變化。由于紅細胞發(fā)生破裂，溶液顏色由渾濁的紅色逐漸清亮。此即為溶血現(xiàn)象。3、溶血前后的鏡檢觀察在溶血前、后分別取一滴血細胞，滴于載玻片上，并蓋上蓋玻片，光鏡下觀察血細胞的形態(tài)差異。4．雞紅細胞的滲透性記時比較（1）分別取3只試管，各加入3ml的0.17mol／L氯化鈉，0.17mol／L氯化銨，0.17mol／L硝酸鈉，加入2-3滴血紅細胞懸液，觀察反應現(xiàn)象。（2）分別取4只試管，各加入3ml的0.32mol／L葡萄糖，0.32mol／L甘油，0.32mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇；加入2-3滴血紅細胞懸液，觀察反應現(xiàn)象。4．雞紅細胞的滲透性記時比較（3）分別取3只試管，各加入3ml的0.12mol／L硫酸鈉，0.10mol／L草酸鈉，0.10mol／L醋酸鈉，加入2-3滴血紅細胞懸液，觀察反應現(xiàn)象。（4）在反應前、后分別取1-2滴血細胞，滴于載玻片上，并蓋上蓋玻片，光鏡下觀察血細胞的形態(tài)差異。五、結果與分析將觀察到的現(xiàn)象記錄，并進行分析

試管編號溶液種類是否溶血溶血所需時間結果分析1234……10滲透壓（osmoticpressure）用符號π表示，單位：atmπ的大小可用滲透計測定，或用滲透平衡時高出水面的溶液對下部產(chǎn)生的靜水壓力表示（h×s×比重=體積×比重）。也可用VantHoff提出的公式計算：

π=icRT或π=n/VRT

c=溶液的摩爾濃度；i=等滲系數(shù)

π是溶液的滲透壓（kPa），V是溶液的體積（