胰腺淀粉樣多肽抗體課件

導(dǎo)師：孫子林學(xué)生：李偉胰淀粉樣多肽可溶性低聚物誘導(dǎo)的凋亡可被糖尿病相關(guān)抗體中和Journal:SciRepImpactfator:2.927

背景一個(gè)世紀(jì)以前，人們以為淀粉樣沉積是AD、T2DM等疾病的主要致病因子，因其與組織退變?cè)诓±順?biāo)本中存在共定位，且淀粉樣蛋白的基因突變與一些家族聚集性疾病有關(guān)。1901年，兩個(gè)不同的研究人員描述了胰島的透明樣變性。1986年，學(xué)者對(duì)胰島中的透明樣物質(zhì)進(jìn)行提純分析，發(fā)現(xiàn)其主要是胰淀粉樣沉積。且其最小組成單位為胰淀粉樣多肽（37個(gè)氨基酸組成）。而且，在T2DM尸檢中發(fā)現(xiàn)90%的患者存在胰淀粉樣沉積，而且其沉積與B細(xì)胞團(tuán)塊量存在相關(guān)性。1994年，有研究者發(fā)現(xiàn)hIAPP可以導(dǎo)致B細(xì)胞凋亡，而且可以在細(xì)胞膜上可以看到hIAPP聚積。綜上，在當(dāng)時(shí)及其后一段時(shí)間，人們一直認(rèn)為主要是胰淀粉樣沉積直接導(dǎo)致了上述退行性疾病。2022/12/252

背景但是，隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)存在著一些與上述論斷不符合的事實(shí)與研究，主要表現(xiàn)在以下幾方面：1、并不是所有的T2DM患者病理切片中存在著淀粉樣沉積。2、淀粉樣沉積的嚴(yán)重度與T2DM的嚴(yán)重度并不存在明顯的相關(guān)性。3、純合子的hIAPP小鼠在5-10W時(shí)可以觀察到發(fā)生B細(xì)胞的大量凋亡，但是在細(xì)胞外卻觀察不到淀粉樣沉積。在20W時(shí)可以看到大量胰淀粉樣沉積，但是其并不與糖尿病嚴(yán)重程度呈現(xiàn)相關(guān)性。因此，作者欲探究確認(rèn)究竟是哪一種物質(zhì)導(dǎo)致胰島細(xì)胞的凋亡，并觀察T2DM患者體內(nèi)是否存在針對(duì)這一物質(zhì)的抗體。2022/12/253

結(jié)果：低聚物鑒定SDS排阻色譜分析I-monomer,II-dimer,III-trimer,IV-oligomer2022/12/255

結(jié)果：低聚物鑒定ThioflavinT(ThT)圓二色譜法Time:minutes2022/12/256結(jié)果：對(duì)B細(xì)胞的影響細(xì)胞活力rIAPPhIAPP2022/12/257結(jié)果：對(duì)B細(xì)胞的影響流式熒光活化細(xì)胞分選術(shù)I-necroticstate,II-lateapoptoticstateIII-earlyapoptoticstate,IV-viablecellsdarkgrey:viablecells,lightgrey:earlyandlateapoptoticcells,black:necroticcells.2022/12/258結(jié)果：對(duì)B細(xì)胞的影響2022/12/2510

結(jié)果：低聚物抗體Dot-blotELISPOT2022/12/2512結(jié)論確證了hIAPP單體可以形成低聚體，且低聚體在一定時(shí)間內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定。而且，其結(jié)構(gòu)主要為α螺旋。低聚體可以通過(guò)與細(xì)胞膜作用，增加膜的通透性，從而導(dǎo)致細(xì)胞活力下降乃至凋亡。T2DM患者血清中存在著抗該低聚物的抗體，且該抗體的存在能中和或者弱化低聚物的細(xì)胞毒性效應(yīng)。而正常人血清中該抗體含量低或者對(duì)低聚物的親和力低。2022/12/2514

意義為淀粉樣低聚物的存在及細(xì)胞毒性理論提供了證據(jù)，有利于進(jìn)一步探討淀粉樣沉積與糖尿病的關(guān)系?？沟途畚锟贵w的存在有兩點(diǎn)意義：一是通過(guò)抗低聚物抗體的檢測(cè)來(lái)對(duì)糖尿病或者相關(guān)代謝