標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 19495.4-2004 是一項(xiàng)中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，全稱為《轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè) 第4部分：核酸定性PCR檢測(cè)方法》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中特定核酸序列進(jìn)行定性檢測(cè)的方法和要求，旨在確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，適用于轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分的定性檢測(cè)。

標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容概覽：

  1. 范圍：明確了該標(biāo)準(zhǔn)適用于哪些類型的樣本，即轉(zhuǎn)基因植物及其制品中轉(zhuǎn)基因DNA的定性檢測(cè)。

  2. 規(guī)范性引用文件：列出了實(shí)施該標(biāo)準(zhǔn)時(shí)需要參考的其他相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)，這些文件對(duì)于理解和執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)至關(guān)重要。

  3. 術(shù)語(yǔ)和定義：解釋了在標(biāo)準(zhǔn)中使用的一些關(guān)鍵術(shù)語(yǔ)，如PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）、引物、模板DNA等，幫助讀者理解基本概念。

  4. 試劑和材料：詳細(xì)描述了進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)所需的各種試劑、耗材的質(zhì)量要求及來(lái)源，包括DNA提取試劑、PCR緩沖液、引物、DNA聚合酶等。

  5. 儀器設(shè)備：列舉了執(zhí)行PCR檢測(cè)所必需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，如PCR擴(kuò)增儀、離心機(jī)、電泳設(shè)備等，并對(duì)其性能要求進(jìn)行了說(shuō)明。

  6. 樣品制備：提供了從樣品采集到DNA提取的具體操作步驟，確保從復(fù)雜樣本中有效提取出目標(biāo)DNA，為后續(xù)PCR檢測(cè)做準(zhǔn)備。

  7. PCR反應(yīng)體系與條件：詳細(xì)規(guī)定了PCR反應(yīng)的組成成分比例、反應(yīng)體積、循環(huán)參數(shù)（如退火溫度、延伸時(shí)間等），以確保PCR反應(yīng)的高效與特異性。

  8. 結(jié)果判定：說(shuō)明了如何通過(guò)凝膠電泳等方法觀察并判定PCR產(chǎn)物，從而判斷樣品中是否存在目標(biāo)轉(zhuǎn)基因序列。

  9. 精密度和準(zhǔn)確度：通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)闡述了該檢測(cè)方法的重復(fù)性、再現(xiàn)性以及與其他驗(yàn)證方法的一致性，確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

  10. 試驗(yàn)報(bào)告：規(guī)定了檢測(cè)報(bào)告應(yīng)包含的信息，如樣品信息、檢測(cè)方法、實(shí)驗(yàn)條件、結(jié)果分析及結(jié)論等，以便于結(jié)果的記錄和交流。

實(shí)施意義：

該標(biāo)準(zhǔn)為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的質(zhì)量控制、市場(chǎng)監(jiān)管及消費(fèi)者信息透明化提供了科學(xué)依據(jù)和技術(shù)手段，有助于保障食品安全、促進(jìn)生物技術(shù)健康發(fā)展，并滿足國(guó)際貿(mào)易中對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化需求。通過(guò)統(tǒng)一的檢測(cè)流程和評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，可以有效提升檢測(cè)效率和結(jié)果的可比性。


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  • 2004-04-13 頒布
  • 2004-04-13 實(shí)施
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GB/T 19495.4-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定性PCR檢測(cè)方法_第1頁(yè)
GB/T 19495.4-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定性PCR檢測(cè)方法_第2頁(yè)
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ICS67.050B04中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T：19495.4-一2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定性PCR檢測(cè)方法Detectionofgeneticallymodifiedorganismsandderivedproducts-QualitativePCRmethodsbasedonnucleicacid2004-04-13發(fā)布2004-04-13實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T19495.4-2004三次前言范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語(yǔ)和定義4防污染措施5抽樣和制樣6原理試劑8儀器設(shè)備檢測(cè)步驃10結(jié)果判定·結(jié)果表述·12測(cè)試報(bào)告·附錄A（規(guī)范性附錄)物種特異性檢測(cè)方法附錄B（規(guī)范性附錄)篩選檢測(cè)方法·22附錄C（規(guī)范性附錄)結(jié)構(gòu)基因特異性檢測(cè)方法32附錄D（規(guī)范性附錄）品系特異性檢測(cè)方法45參考文獻(xiàn)52

GB/T19495.4—2004GB/T19495《轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)》為系列標(biāo)準(zhǔn)：GB/T19495.1—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)通用要求和定義：GB/T19495.2—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求：GB/T19495.3—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸提取純化方法；-GB/T19495.4—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定性PCR檢測(cè)方法；GB/T19495.5—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定量PCR檢測(cè)方法；-GB/T19495.6—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)基因芯片檢測(cè)方法;GB/T19495.7—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)抽樣和制樣方法；-GB/T19495.8—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)蛋白質(zhì)檢測(cè)方法本部分附錄A、附錄B、附錄C、附錄D為規(guī)范性附錄，本部分由國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)提出并歸口。中華人民共和國(guó)上海出入境檢驗(yàn)檢疫局和中華人民共和國(guó)天津出入境檢驗(yàn)檢疫局負(fù)責(zé)起草，國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局動(dòng)植物檢疫實(shí)驗(yàn)所、中華人民共和國(guó)廣州出人境檢驗(yàn)檢疫局、中華人民共和國(guó)遼寧出人境檢驗(yàn)檢疫局、中華人民共和國(guó)江蘇出人境檢驗(yàn)檢疫局、上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院參加起草。本部分起草人：潘良文、鄭文杰、沈禹飛、劉炬、張舒亞、朱水芳、草文、曹際娟、張大兵、祝長(zhǎng)青、蔣原、潘愛(ài)虎、張明。本部分系首次發(fā)布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T19495.4—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定性PCR檢測(cè)方法1范圍GB/T19495的本部分規(guī)定了轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)的核酸定性PCR方法。本部分適用于種子、飼料、食品和環(huán)境樣品中轉(zhuǎn)基因成分的定性PCR檢測(cè)2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)GB/T19495的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件.其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本部分達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本部介。GB/T19495.1—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)通用要求和定義GB/T19495.2—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求GB/T19495.3-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸提取純化方法GB/T19495.5—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定量PCR檢測(cè)方法GB/T19495.7—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)油樣和制樣方法語(yǔ)和定義見(jiàn)GB/T19495.1確立的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本部分防污染措施按照GB/T19495.2-2004的規(guī)定執(zhí)行5抽樣和制樣按照GB/T19495.7-2004規(guī)定的方法執(zhí)行。原理6.1一般原理定性分析包括對(duì)測(cè)試樣品目標(biāo)核酸序列的篩選檢測(cè)和(或）特異性檢測(cè)在設(shè)置合適的對(duì)照和在檢測(cè)下限的情況下，定性檢測(cè)結(jié)果要清楚判斷樣品是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品，本檢測(cè)方法包括：目標(biāo)序列的擴(kuò)增和檢測(cè);擴(kuò)增片段特異性的確證。6.2PCR擴(kuò)增目標(biāo)序列的擴(kuò)增是在反應(yīng)緩沖液中,脫氧核糖核酸三磷酸、寡核苷酸引物在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行的催化反應(yīng)。在反應(yīng)混合體系中不應(yīng)存在DNA聚合酶的抑制劑。DNA擴(kuò)增是一個(gè)循環(huán)的過(guò)程通過(guò)加熱使雙螺旋DNA變性成為單鏈核酸；在合適的溫度下引物和目標(biāo)序列發(fā)生退火反應(yīng)；在合適的溫

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