臨床常用免疫學(xué)檢查(檢驗科)

臨床常用免疫學(xué)檢查醫(yī)院檢驗科1臨床免疫學(xué)免疫學(xué)的一個重要分支學(xué)科應(yīng)用免疫學(xué)的理論和技術(shù)，研究疾病的病因、發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸，并對疾病進行診斷和防治常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、免疫缺陷病、腫瘤等疾病的診斷和療效觀察2臨床免疫學(xué)3常用臨床免疫學(xué)檢查第一節(jié)

血清免疫球蛋白檢測第二節(jié)

血清補體檢測第三節(jié)

細(xì)胞免疫檢測第四節(jié)

腫瘤標(biāo)志物檢測第五節(jié)

自身免疫檢測第六節(jié)

感染免疫檢測第七節(jié)

其他免疫檢測4常用臨床免疫學(xué)檢查血清免疫球蛋白檢測5體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測1890年，研究白喉外毒素時發(fā)現(xiàn)，用脫毒的白喉桿菌外毒素免疫動物，能使動物血清中產(chǎn)生一種能中和毒素毒性作用的物質(zhì)，稱之為抗毒素

1937年，用電泳方法將血清蛋白分成4個組分1938年，證實抗體活性存在于血清中-球蛋白部分61964年WHO舉行專門會議，將具有抗體活性而且化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）免疫球蛋白是化學(xué)結(jié)構(gòu)概念抗體是生物學(xué)功能的概念抗體都是免疫球蛋白，免疫球蛋白并非都是抗體體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測7重鏈

可變區(qū)輕鏈絞鏈區(qū)恒定區(qū)（僅有一些抗體有此段）8免疫球蛋白效應(yīng)功能具有抗體功能，能結(jié)合抗原形成免疫復(fù)合物結(jié)合膜受體并具有生物活性與血漿蛋白質(zhì)（如補體）反應(yīng)，并激活這些蛋白質(zhì)以排斥抗原體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測9Ig由漿細(xì)胞合成和分泌，存在于機體的血液、體液、外分泌液以及部分細(xì)胞表面Ig類型區(qū)分主要取決于重鏈結(jié)構(gòu)的差異應(yīng)用免疫電泳和超速離心分析技術(shù)，可分為五類：IgG、IgM、IgA、IgE和IgD體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測10IgG結(jié)構(gòu)示意圖11免疫球蛋白G（IgG）檢測脾、淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞合成和分泌IgG總量的約一半在血槳，一半在體液中占血清中總Ig的～75%分解代謝與血漿濃度成一定比例T1/211d（合成速率高時）或70d（合成速率低時）體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測12免疫球蛋白G（IgG）檢測再次免疫應(yīng)答抗體大部分抗細(xì)菌、抗病毒、抗毒素的抗體為IgG類惟一能通過胎盤的抗體IgG可分為四種亞類：IgG1，IgG2，IgG3和IgG4，含量隨年齡變化體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測13IgG1IgG2IgG3IgG4占總IgG百分比751564血清半衰期(d)2221722通過胎盤++++++++++激活補體(經(jīng)典途徑)++++++－激活補體(替代途徑)－－－+結(jié)合Fc受體+++++++－人IgG亞類的一些生物學(xué)特性體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測14IgM結(jié)構(gòu)示意圖15免疫球蛋白M（IgM）檢測Ig中分子量最大，多為5個單體組成環(huán)狀占血清中總Ig的5～10%75%局限于血管內(nèi)個體發(fā)育中最早出現(xiàn)的Ig降解代謝與血中濃度無關(guān)體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測16免疫球蛋白M（IgM）檢測機體受抗原刺激后最早出現(xiàn)的Ig（初次免疫應(yīng)答抗體）補體活化經(jīng)典途徑的有效活化劑，殺菌、溶菌、溶血、促吞噬和凝集作用比IgG高500～1000倍體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測1718分泌成分J鏈高度糖基化的鉸鏈區(qū)IgA結(jié)構(gòu)示意圖19免疫球蛋白A（IgA）檢測腸系淋巴組織中漿細(xì)胞合成和分泌占血清中總Ig的～10%具有抗細(xì)菌、抗病毒、抗毒素作用血清型和分泌型（SIgA）兩種SIgA在呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴組織合成量多，在機體局部免疫中起重要作用體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測20IgE結(jié)構(gòu)示意圖21免疫球蛋白E（IgE）檢測主要由鼻咽部、扁桃體、支氣管、胃腸道等黏膜固有層的漿細(xì)胞合成和分泌僅占血清中總Ig的～0.002%個體發(fā)育中出現(xiàn)晚親細(xì)胞抗體，能與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞膜上的Fc受體結(jié)合，在過敏反應(yīng)或I型變態(tài)反應(yīng)性疾病中起重要作用體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測22血清學(xué)檢查

用各種特異性抗原（如細(xì)菌、病毒等）測定標(biāo)本中特異性Ig，常用于傳染性疾病的診斷免疫功能檢查

用人工制備的抗各種Ig的抗體（anti-IgAb）測定標(biāo)本中各種Ig含量，作為判斷機體體液免疫水平的重要指標(biāo)之一。主要用免疫比濁法和酶免疫法

體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測23臨床意義Ig含量增高(1)多克隆性增高

如慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾??；(2)單克隆性增高

主要見于漿細(xì)胞惡性變Ig含量減低(1)先天性低Ig血癥

見于體液免疫缺陷或聯(lián)合免疫缺陷?。?2)獲得性低Ig血癥

見于嚴(yán)重胃腸道疾患、腎病綜合癥以及一些惡性腫瘤體液免疫檢查---免疫球蛋白檢測24單克隆免疫球蛋白（monoclonalimmunoglobulins）單克隆B淋巴細(xì)胞異常增殖時產(chǎn)生，具有相同結(jié)構(gòu)和電泳遷移率的Ig分子或分子片段（如輕鏈、重鏈）一般不具有抗體活性多見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病等體液免疫檢查---血清M蛋白檢測25檢測方法血清蛋白電泳免疫球蛋白電泳免疫固定電泳免疫比濁法…體液免疫檢查---血清M蛋白檢測26體液免疫檢查---血清M蛋白檢測27體液免疫檢查---血清M蛋白檢測28常用臨床免疫學(xué)檢查血清補體檢測29

1889年，發(fā)現(xiàn)血清中存在一種參與抗體溶菌作用的對熱不穩(wěn)定的成分，稱之為防御素1895年，利用綿羊紅細(xì)胞和溶血素對補體進行了較為詳細(xì)的研究，并建立了監(jiān)測抗原、抗體的補體結(jié)合試驗1898年，這類物質(zhì)命名為補體（complement）血清補體檢測30血清中具有酶活性的不耐熱球蛋白，三類球蛋白分子組成九種補體成分（C1～C9）B因子、D因子、P因子、H因子等補體調(diào)節(jié)蛋白（C1抑制物、C4結(jié)合蛋白、促衰變因子等）血清補體檢測31經(jīng)典及MBL途徑的前端反應(yīng)成分C1、MASP、C4、C2、C3旁路途徑的前端反應(yīng)成分C3、B、D、P因子共同末端反應(yīng)成分C5、C6、C7、C8、C9調(diào)節(jié)成分：C1-INH、C4bp、CD55、CD46、H因子、I因子、C8bp、CD59補體受體：CR1、CR2、CR3、CR4補體固有成分血清補體檢測---補體系統(tǒng)的組成

32關(guān)鍵成分常以酶原形式存在，活化后形成級聯(lián)反應(yīng)（cascade）

非特異性——含量穩(wěn)定，屬天然免疫；C3最高不穩(wěn)定性——代謝率居血漿蛋白之首，許多成分對熱敏感（滅活）來源廣泛性——機體許多器官都參與合成補體成分，

以肝、脾的巨噬細(xì)胞合成為最，含量占血清球蛋白10%血清補體檢測33血清補體C3血清中含量最高的補體成分補體系統(tǒng)中最重要的成分之一主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成補體經(jīng)典激活途徑和旁路途徑中均發(fā)揮重要作用血清補體檢測34血清補體C4巨噬細(xì)胞和肝臟合成參與補體經(jīng)典激活途徑血清補體檢測35補體測定的臨床相關(guān)性檢測補體系統(tǒng)是否激活診斷補體系統(tǒng)的先天性缺陷評價補體系統(tǒng)的常規(guī)檢測項目CH50,C3,C4

等血清補體檢測36評價補體系統(tǒng)的常規(guī)檢測項目---CH50反映C3轉(zhuǎn)換酶和經(jīng)典激活途徑膜攻擊復(fù)合物的形成情況全面評估C1～C9補體活性低下的篩選實驗缺乏提示C1～C8濃度變化所必需的分析靈敏性血清補體檢測37評價補體系統(tǒng)的常規(guī)檢測項目---C3評估補體激活的指標(biāo)較總補體活性測定敏感只有在消耗超過合成時才出現(xiàn)減少仍不夠敏感血清補體檢測38評價補體系統(tǒng)的常規(guī)檢測項目---C4評估補體激活的指標(biāo)降低早，恢復(fù)遲只有在消耗超過合成時才出現(xiàn)減少自身免疫性溶血性貧血和遺傳性血管神經(jīng)性水腫時C4常下降（C3一般無異常）仍不夠敏感血清補體檢測39血液采集采用EDTA或枸櫞酸鈉抗凝血槳血槳應(yīng)在1h內(nèi)分離穩(wěn)定性CH50的血漿標(biāo)本4～8℃可穩(wěn)定數(shù)小時

血清補體檢測40補體水平增高

多見于感染性疾病的恢復(fù)期。某些腫瘤患者可表現(xiàn)為高補體血癥補體水平降低

①消耗增多，見于SLE、自身免疫性溶血性貧血、類風(fēng)關(guān)、鏈球菌感染后腎小球腎炎、同種異體移植排斥反應(yīng)等疾病。②大量喪失，如大面積燒傷、大出血、腎病綜合癥。③合成不足，多見于急慢性肝炎、肝硬化患者血清補體檢測41細(xì)胞免疫檢查常用臨床免疫學(xué)檢查42淋巴細(xì)胞是構(gòu)成機體免疫系統(tǒng)的主要細(xì)胞群體淋巴細(xì)胞分為許多表型和功能不同的群體和亞群，相互協(xié)作和制約對淋巴細(xì)胞數(shù)量、表面標(biāo)志和功能的檢測，了解細(xì)胞免疫狀況細(xì)胞免疫檢測43（一）T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定T細(xì)胞是一群功能不同的異質(zhì)性淋巴細(xì)胞發(fā)育和分化成熟依賴于胸腺功能完整形態(tài)學(xué)難以與其他免疫功能細(xì)胞區(qū)分借助T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志（Tlymphocytesurfacemarker）加以區(qū)別細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測44（一）T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定E玫瑰花形成試驗

操作簡單，曾廣泛應(yīng)用，現(xiàn)多被取代T細(xì)胞分化抗原（clusterofdifferentiation，CD）T細(xì)胞表面一些隨著T細(xì)胞分化過程而出現(xiàn)或者發(fā)生變化的特異性抗原，如CD2、CD3、CD4、CD8、CD28等細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測45免疫熒光法流式細(xì)胞術(shù)

綜合激光、計算機、流體力學(xué)、細(xì)胞單克隆、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等技術(shù)，對流動細(xì)胞群從大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、細(xì)胞抗體、蛋白質(zhì)、DNA、RNA進行檢測分析流式細(xì)胞儀（flowcytometry，F(xiàn)CM）細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測46（一）T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定T淋巴細(xì)胞總數(shù)CD3是總T淋巴細(xì)胞重要標(biāo)志

增高---甲亢，淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎，重癥肌無力，移植后免疫排斥等

降低---免疫缺陷病，惡性腫瘤，SLE，病毒感染，使用免疫抑制劑等

細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測47（一）T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定T淋巴細(xì)胞亞群CD4是輔助、誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞的標(biāo)志增高---類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等降低---免疫缺陷病，嚴(yán)重創(chuàng)傷，病毒感染，

使用免疫抑制劑等

細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測48（一）T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定T淋巴細(xì)胞亞群CD8是抑制、殺傷性T淋巴細(xì)胞的標(biāo)志

增高---傳染性單核細(xì)胞增多癥，巨細(xì)胞病毒感染，

慢性乙肝等

降低---類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，重癥肌無力等

細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測49（一）T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定T淋巴細(xì)胞亞群CD4/CD8細(xì)胞比值

增高---類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎活動期，自身免疫病，

移植后免疫排斥等

降低---免疫缺陷病，惡性腫瘤，部分感染性疾病等

細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測50（二）B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定表面受體

膜表面免疫球蛋白(surfacemembraneimmunoglobulin，SmIg)、Fc受體、補體受體、細(xì)胞因子受體和黏附分子受體等表面抗原

CD19、CD20、CD21、CD22、CD79等細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測51（二）B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定SmIg是B淋巴細(xì)胞特征性表面標(biāo)志，類別隨B淋巴細(xì)胞發(fā)育階段而變化分為SmIgG，SmIgM，SmIgA，SmIgE和SmIgD五種類型僅表達IgM為未成熟B淋巴細(xì)胞同時表達IgM和IgD為成熟B淋巴細(xì)胞細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測52（二）B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定SmIg細(xì)胞增高

B淋巴細(xì)胞惡性增殖SmIg細(xì)胞減低

體液免疫缺陷細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測53（二）B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定B淋巴細(xì)胞分化抗原

（CD19、CD20、CD21、CD22等）測定CD19全部B淋巴細(xì)胞共有，最重要

增高---B淋巴細(xì)胞系統(tǒng)惡性腫瘤

降低---體液免疫缺性病細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測54細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測（二）B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志測定B淋巴細(xì)胞分化抗原

（CD19、CD20、CD21、CD22等）測定CD20B淋巴細(xì)胞激活后逐漸丟失CD21C3d受體和EB病毒受體兩種功能CD22存在于成熟的B淋巴細(xì)胞55（一）淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗細(xì)胞表面有絲分裂原作用下，淋巴細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA和蛋白質(zhì)的合成增加，從G0期向S期轉(zhuǎn)化T淋巴細(xì)胞的有絲分裂原有：植物血凝素（PHA），刀豆蛋白A（ConA）等B淋巴細(xì)胞的有絲分裂原有：PWM，葡萄球菌A蛋白（SPA）等細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞功能檢測56特異性淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗

體外加入某種抗原→致敏淋巴細(xì)胞→混合培養(yǎng)判斷細(xì)胞免疫功能水平判斷療效和估計預(yù)后檢測方法形態(tài)學(xué)法

37℃孵育72h，觀察形態(tài)（體積、胞質(zhì)、胞核、染色質(zhì)，核仁）并計數(shù)原淋巴細(xì)胞細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞功能檢測57檢測方法3H-TdR滲入法

特異抗原刺激→T淋巴細(xì)胞有絲分裂→進入S期伴新的DNA合成，加入3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)→測定3H-TdR攝入量，判斷增值程度MTT法

淋巴細(xì)胞增殖時線粒體脫氫酶活性增高，將淡黃色的四甲基偶氮唑鹽(MTT)代謝呈藍紫色，比色判斷增值程度細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞功能檢測58（二）混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)無關(guān)個體淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)，不同個體MHC等位基因差異使雙方淋巴細(xì)胞以對方為抗原發(fā)生反應(yīng)，即為混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(mixedlymphocytereaction，MLR)反映機體整體細(xì)胞免疫功能水平預(yù)測細(xì)胞免疫介導(dǎo)的移植排異反應(yīng)檢測方法

形態(tài)學(xué)法；

3H-TdR滲入法

細(xì)胞免疫檢測---淋巴細(xì)胞功能檢測59（三）自然殺傷細(xì)胞（naturalkillercells，NK）一類具有自發(fā)細(xì)胞毒活性的淋巴細(xì)胞，屬先天性免疫，不具記憶功能在特異性免疫功能開始發(fā)生作用之前，已有一種天然存在的廣泛防御系統(tǒng)，通過NK細(xì)胞等天然存在的細(xì)胞免疫系統(tǒng)，可以立即與外來有害物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)并消滅之細(xì)胞免疫檢測---自然殺傷細(xì)胞

60（三）自然殺傷細(xì)胞（naturalkillercells，NK）表面無抗原識別受體直接殺傷效應(yīng)靶細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞、病毒感染細(xì)胞、胞內(nèi)寄生菌感染細(xì)胞等）具有抗腫瘤作用、抗感染作用及免疫調(diào)節(jié)作用還參與移植排斥反應(yīng)、自身免疫、超敏反應(yīng)細(xì)胞免疫檢測---自然殺傷細(xì)胞

61NK細(xì)胞檢測臨床意義腫瘤患者活性NK細(xì)胞降低或缺乏者常發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，可預(yù)測疾病的預(yù)后NK細(xì)胞活性又常與病情改善和惡化平行，對判斷病情有重要意義細(xì)胞免疫檢測---自然殺傷細(xì)胞

62（四）細(xì)胞因子（cytokines）一類由免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞等）和相關(guān)細(xì)胞（內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等）產(chǎn)生的調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的高活性多功能蛋白質(zhì)多態(tài)分子，不包括免疫球蛋白、補體和一般生理性細(xì)胞產(chǎn)物調(diào)節(jié)靶細(xì)胞功能（影響分裂過程）細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

63（四）細(xì)胞因子（cytokines）白細(xì)胞介素干擾素腫瘤壞死因子集落刺激因子趨化性細(xì)胞因子

生長因子細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

64（四）細(xì)胞因子（cytokines）1.白細(xì)胞介素（interleukin，IL）

起免疫調(diào)節(jié)功能的因子，29種IL-2促進T細(xì)胞生長，能促進B細(xì)胞增殖、分化

和合成相應(yīng)的抗體IL-1參與免疫調(diào)節(jié)、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)IL-4促B細(xì)胞增殖和表達，促T細(xì)胞增殖IL-6，IL-8，IL-10等

細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

65（四）細(xì)胞因子（cytokines）2.腫瘤壞死因子（tumornecrosisfactor，TNF）發(fā)現(xiàn)于1975年接種卡介苗的小鼠在注射細(xì)菌脂多糖后，其血清中存在一種在體外能殺傷腫瘤細(xì)胞、注射入腫瘤體后可使腫瘤出血壞死的因子，此種血清稱為腫瘤壞死血清，其中所含因子稱為TNF細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

66（四）細(xì)胞因子（cytokines）2.腫瘤壞死因子（tumornecrosisfactor，TNF）根據(jù)其細(xì)胞來源和分子結(jié)構(gòu)不同，TNF家族至少18種生物活性：抗腫瘤作用、對免疫反應(yīng)、機體代謝、炎癥反應(yīng)具有重要的調(diào)節(jié)和介導(dǎo)作用細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

67（四）細(xì)胞因子（cytokines）3.干擾素（interferon，IFN）發(fā)現(xiàn)于1957年病毒感染細(xì)胞分泌的可作用于其他細(xì)胞干擾病毒生長復(fù)制的可溶性蛋白分子分為I型（IFN-a、IFN-b）和II型（IFN-g）細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

68（四）細(xì)胞因子（cytokines）3.干擾素（interferon，IFN）生物活性：具有廣譜抗病毒作用、免疫調(diào)節(jié)作用和抗腫瘤作用用于腫瘤、病毒性感染（如肝炎）的治療細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

69（四）細(xì)胞因子（cytokines）主要檢測方法生物學(xué)測定

細(xì)胞株對特定細(xì)胞因子發(fā)生反應(yīng)免疫學(xué)測定分子生物學(xué)測定細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

70（四）細(xì)胞因子（cytokines）主要檢測方法建議采用血漿（肝素或EDTA）2h內(nèi)分離血漿細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

71（四）細(xì)胞因子（cytokines）細(xì)胞因子與疾病的關(guān)系

抗御和治療某些疾病

加劇感染癥狀臨床應(yīng)用

細(xì)胞因子補充或添加療法

細(xì)胞因子阻斷或拮抗療法細(xì)胞免疫檢測---細(xì)胞因子

72腫瘤標(biāo)志物檢測常用臨床免疫學(xué)檢查73在工業(yè)化國家中，癌癥是繼心血管疾病之后第二大常見死因西方工業(yè)化國家中1/3的人一生中會得癌癥，而1/4的人死于癌癥每年癌癥新發(fā)病的病例數(shù)約是癌癥死亡病例數(shù)的1.5倍在我國占人口死亡數(shù)的第二位

腫瘤標(biāo)志物檢測

74目前人們還沒有完全有效的方法來預(yù)防腫瘤的發(fā)病，因此早期發(fā)現(xiàn)尤為重要腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)有助于得到早期治療，從而有助于降低腫瘤的發(fā)病率和死亡率腫瘤標(biāo)志物在腫瘤的臨床診斷、治療中發(fā)揮重要作用

腫瘤標(biāo)志物檢測

75腫瘤標(biāo)志物主要是指腫瘤細(xì)胞分泌或脫落到體液或組織中的物質(zhì)，或機體對體內(nèi)新生物的反應(yīng)而產(chǎn)生并分泌入體液或組織中的物質(zhì)

這些物質(zhì)在正常成人組織中僅少量存在，或當(dāng)腫瘤增大時其含量大大超過正常情況時的量腫瘤標(biāo)志物檢測

76從生化學(xué)（如酶、同工酶、激素等）、免疫學(xué)（如腫瘤胚胎抗原、腫瘤相關(guān)抗原等）、分子生物學(xué)（腫瘤基因）等角度報告的腫瘤標(biāo)志物已達200余種臨床應(yīng)用較普遍的約有二、三十種

腫瘤標(biāo)志物檢測

77理想的腫瘤標(biāo)志物的特點靈敏度高

能早期測出腫瘤，即發(fā)現(xiàn)亞臨床前期患者，以便及早治療并改善預(yù)后特異性強

能區(qū)別腫瘤或非腫瘤；最好還具有器官特異性，能有助于定位診斷含量或濃度與腫瘤大小、臨床分期相關(guān)

可用以了解病情嚴(yán)重程度和判斷預(yù)后腫瘤標(biāo)志物檢測

78理想的腫瘤標(biāo)志物的特點腫瘤標(biāo)志物檢測

半衰期短

能反映腫瘤的生物變化，可用以監(jiān)測治療效果、復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移測定方法

精密、準(zhǔn)確，操作安全、簡便，試劑價格合理79腫瘤標(biāo)志物的器官特異性和腫瘤特異性較差，而且陽性預(yù)示值較低，因此一般不適宜用于對無癥狀個體的篩查腫瘤標(biāo)志物檢測

80影響腫瘤標(biāo)志物濃度的可變因素產(chǎn)生腫瘤標(biāo)志物的腫瘤細(xì)胞的總數(shù)量、腫瘤的質(zhì)量、腫瘤的擴散以及腫瘤的分級腫瘤標(biāo)志物的合成速度腫瘤標(biāo)志物從腫瘤細(xì)胞或細(xì)胞表面的釋放速度腫瘤標(biāo)志物的表達

如果個別腫瘤不攜帶或不表達腫瘤標(biāo)志物，則該腫瘤標(biāo)志物不會升高腫瘤標(biāo)志物檢測

81影響腫瘤標(biāo)志物濃度的可變因素腫瘤標(biāo)志物檢測

非分泌型腫瘤

腫瘤細(xì)胞能表達腫瘤標(biāo)志物，但并不釋放入體液中腫瘤的血供

如果腫瘤血供較差，使到達血循環(huán)的腫瘤標(biāo)志物減少腫瘤組織壞死的程度

大量腫瘤細(xì)胞溶解可引起腫瘤標(biāo)志物濃度的增加，使腫瘤標(biāo)志物的濃度與腫瘤的大小明顯不成比例。如細(xì)胞毒素治療和放射治療的病例82影響腫瘤標(biāo)志物濃度的可變因素腫瘤標(biāo)志物檢測

腫瘤標(biāo)志物的分解速度

如果機體出現(xiàn)排泄障礙，如腎功能衰竭、肝功能不全或膽汁淤積，腫瘤標(biāo)志物濃度將不成比例升高抗體的影響

抗體的存在可能生成免疫復(fù)合物，其清除速度取決于復(fù)合物大小

83腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用的參考范圍參考范圍參考范圍概念不同于一般生化、免疫檢測檢測值高于表面健康人群的參考范圍≠預(yù)示腫瘤的存在腫瘤標(biāo)志物檢測

84

“臨界值”

概念“Ideal”situation無理想的臨界值臨界值的選擇比較主觀，總是在靈敏度和特異性之間徘徊臨界值必須符合臨床的需要腫瘤標(biāo)志物檢測

85868788腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用的參考范圍個體水平和群體水平由于個體差異較大，因此應(yīng)特別重視個體的水平變化，每個腫瘤患者對于各種腫瘤標(biāo)志物都有各自的基礎(chǔ)水平觀察運用個體百分比變化常常是比采用人群參考范圍更為敏感的方法有些患者經(jīng)初次治療達到療效后的腫瘤標(biāo)志物水平可作為其特殊的參考水平參考水平可作為進一步治療監(jiān)測的基礎(chǔ)水平腫瘤標(biāo)志物檢測

89腫瘤標(biāo)志物的主要臨床用途高危人群中惡性腫瘤的早期檢測協(xié)助診斷判斷預(yù)后治療監(jiān)測腫瘤復(fù)發(fā)的早期檢測腫瘤標(biāo)志物檢測

90高危人群篩查時的應(yīng)用

對有腫瘤家族史和有癥狀的患者來說，腫瘤的發(fā)生率相對較高，建議作以下幾種篩查：肝硬化患者檢測AFP疑有胚胎細(xì)胞腫瘤檢測AFP、hCG男性大于50歲的前列腺腺瘤病人檢測PSA疑有甲狀腺髓質(zhì)癌或家族中出現(xiàn)過這類癌癥的病人檢測降鈣素腫瘤標(biāo)志物檢測

91高危人群篩查時的應(yīng)用腫瘤標(biāo)志物檢測選擇也不提倡對無癥狀人群進行普查（除甲胎蛋白和前列腺特異性抗原外）測定方法的靈敏度高、特異性和重復(fù)性良好

篩查費用經(jīng)濟、合理

篩查時腫瘤標(biāo)志物異常升高，但無癥狀和體征者，必須復(fù)查和隨訪

腫瘤標(biāo)志物檢測

92腫瘤輔助診斷中的應(yīng)用

惡性腫瘤的初步診斷大多由臨床檢查、影象檢查、內(nèi)鏡檢查以及手術(shù)探查作出的，而很少通過腫瘤標(biāo)志物檢測到

不能單憑腫瘤標(biāo)志物陽性進行診斷腫瘤標(biāo)志物檢測

93腫瘤輔助診斷中的應(yīng)用

在術(shù)前或首次療程開始前，必須確定各腫瘤標(biāo)志物與各腫瘤類型的關(guān)系，這是因為：1．初次診斷時表達的腫瘤標(biāo)志物同時極有可能作為治療監(jiān)測的相關(guān)標(biāo)志物。腫瘤標(biāo)志物檢測

94腫瘤輔助診斷中的應(yīng)用2．所檢測的腫瘤標(biāo)志物可用于評估某些腫瘤的預(yù)后，如：----對胚胎細(xì)胞腫瘤檢測AFP、hCG----對結(jié)腸直腸癌檢測CEA和CA19-9----對肺癌檢測CYFRA21-1----對卵巢癌檢測CA125腫瘤標(biāo)志物檢測

95腫瘤的預(yù)后應(yīng)用

通?；A(chǔ)水平越高，越可能處于癌癥晚期，

且預(yù)后較差

基礎(chǔ)水平正?；騼H輕微升高，預(yù)示著極有可能腫瘤不再復(fù)發(fā)時間的延長以及存活率延長腫瘤標(biāo)志物檢測

96腫瘤治療監(jiān)測中的應(yīng)用

腫瘤標(biāo)志物濃度術(shù)前升高而于術(shù)后下降是一個

重要的預(yù)示指標(biāo)。

如果治療完成后，盡管外科醫(yī)生和病理學(xué)家認(rèn)為治療是R0切除或是影象檢查也未發(fā)現(xiàn)殘余的腫瘤，只要腫瘤標(biāo)志物的濃度未下降到健康對照組的參考水平范圍內(nèi)，就預(yù)示治療無效。

腫瘤標(biāo)志物檢測

97腫瘤治療監(jiān)測中的應(yīng)用

治療監(jiān)測期間，對腫瘤標(biāo)志物的首次檢測與復(fù)查間隔時間的設(shè)置應(yīng)根據(jù)腫瘤標(biāo)志物的生物半衰期（指腫瘤標(biāo)志物經(jīng)膽汁或腎臟排泄而下降至其基礎(chǔ)濃度一半所需的時間

）腫瘤標(biāo)志物檢測

98腫瘤治療監(jiān)測中的應(yīng)用例：

CEA的T1/2是3d，

術(shù)前CEA100mg/L的病人若降至參考范圍＜3mg/L則約需20d；

而術(shù)前10mg/L的病人若降至參考范圍＜3mg/L則約需6d腫瘤標(biāo)志物檢測

99腫瘤標(biāo)志物

主要的相關(guān)腫瘤

分子量(kDa)生物半衰期參考范圍上限AFP肝癌；睪丸癌702～8d25mg/LCA125卵巢癌2005d35U/mlCA15-3乳腺癌3005～7d25U/mlCA19-9胰腺癌；膽道癌；胃癌364～8d37U/mlCA72-4胃癌；卵巢癌；結(jié)腸癌4003～7d4U/mlCEA腸道癌；乳腺癌1802～8d3mg/LCYFRA21-1非小細(xì)胞性肺癌301d2mg/LhCG滋養(yǎng)層細(xì)胞癌14/240.5～1.5d2IU/LNSE小細(xì)胞性肺癌871d10IU/LPSA前列腺癌332～3d4mg/LSCC鱗狀上皮癌421d1.5mg/L腫瘤標(biāo)志物檢測

100腫瘤復(fù)發(fā)的早期監(jiān)測腫瘤標(biāo)志物測定是外科手術(shù)后重要的非侵入性的監(jiān)測指標(biāo)如果能準(zhǔn)確測定腫瘤標(biāo)志物，則對近50%的病例來說，其水平將比其他檢查至少早10個月預(yù)示腫瘤的進展若治療后腫瘤標(biāo)志物正常，而腫瘤復(fù)發(fā)后有所增高，則增高的速度高度預(yù)示腫瘤的進展情況腫瘤標(biāo)志物檢測

101腫瘤復(fù)發(fā)的早期監(jiān)測

在腫瘤監(jiān)測期間，標(biāo)志物檢測的頻率取決于腫瘤的特性、所推薦的監(jiān)測計劃以及腫瘤標(biāo)志物的濃度或腫瘤活動的變化。

腫瘤標(biāo)志物檢測

102腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測

同一腫瘤或不同類型腫瘤可有一種或幾種腫瘤標(biāo)志物濃度異常，同一腫瘤標(biāo)志物可在不同腫瘤中出現(xiàn)為提高腫瘤標(biāo)志物的輔助診斷價值和確定何種標(biāo)志物作為治療后的隨訪監(jiān)測指標(biāo)，可進行腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測腫瘤標(biāo)志物檢測

103腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測聯(lián)合檢測的指標(biāo)須經(jīng)科學(xué)分析、嚴(yán)格篩選合理選擇幾項（3~5項）靈敏度高、特異性好的腫瘤標(biāo)志物進行聯(lián)合檢測

腫瘤標(biāo)志物檢測

104結(jié)腸癌胰腺癌胃癌食道癌肝癌膽道癌乳房癌卵巢癌子宮癌絨毛膜癌小細(xì)胞肺癌非小細(xì)胞肺癌生殖細(xì)胞癌前列腺癌膀胱癌甲狀腺癌淋巴瘤耳鼻喉癌腫瘤致貧血AFP●●CEA●○○●●●○○○f-PSA○TPSA●CA125●CA19-9○●●CA72-4●○CA15-3●CYFRA21-1○●●NSE●hCG●○b2MG●TG/Anti-TG●Ferritin●105檢測方法中存在的問題檢測結(jié)果判斷腫瘤標(biāo)志物的濃度取決于檢測的方法同一標(biāo)本使用不同生產(chǎn)廠商的檢測儀器試劑系統(tǒng)可得到不同的結(jié)果同一標(biāo)本的不同結(jié)果可影響臨床的病情評估和治療監(jiān)測同一患者在治療前后及隨訪中，應(yīng)采用同一種方法和試劑；在更換檢測方法和試劑時，應(yīng)作比對腫瘤標(biāo)志物檢測

106全國衛(wèi)生部臨床檢驗中心

CA125室間質(zhì)量評價統(tǒng)計結(jié)果（除外3s）標(biāo)本編號參加實驗室數(shù)平均數(shù)中位數(shù)變異系數(shù)％最大值最小值200411135109.4110.315157.153.920041213532.131.32253.58.720041313693.490.223157.137.9腫瘤標(biāo)志物檢測

107腫瘤標(biāo)志物檢測實驗室基本要求

實驗室必須使用國家有關(guān)機構(gòu)批準(zhǔn)的儀器和試劑，做好室內(nèi)質(zhì)控和參加室間質(zhì)評，以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性

腫瘤標(biāo)志物檢測

108自身免疫檢測常用臨床免疫學(xué)檢查109自身免疫性疾病（autoimmunedisease）某些原因造成免疫系統(tǒng)對自身成分的免

疫耐受性減低或破壞，使自身抗體或致敏淋巴細(xì)胞損傷含相應(yīng)自身抗原的器官組織，引起相應(yīng)組織器官的功能障礙自身免疫檢測

110自身免疫性疾?。╝utoimmunedisease）器官特異性----自身抗原為某一器官的特定成分，病變局限于該器官，預(yù)后一般較好非器官特異性----自身抗原為細(xì)胞核或細(xì)胞漿成分，病變可累及全身各組織器官，預(yù)后一般較差自身免疫檢測

111抗核抗體（anti-nuclearantibody，ANA）細(xì)胞的核成分為靶抗原的自身抗體總稱抗雙鏈DNA抗體（dsDNA）

陽性常見于SLE活動期抗Smith抗體

陽性常見于SLE自身免疫檢測

112抗胞漿抗體抗線粒體抗體（anti-mitochondrialantibody，AMA）

陽性見于原發(fā)性膽汁性肝硬化自身免疫檢測

113抗組織細(xì)胞抗體抗腎小球基底膜抗體抗甲狀腺抗體

抗甲狀腺球蛋白抗體

抗甲狀腺微粒體抗體抗胰島細(xì)胞抗體自身免疫檢測

114其他自身抗體類風(fēng)濕因子（rheumatoidfactor，RF）抗心磷脂抗體（anticardiolipinantibody，ACA）抗中性粒細(xì)胞抗體（anti-neutrophilcytoplasmicantibody，ANCA）自身免疫檢