中藥制劑分析試題專家講座

一、取樣

1.取樣均勻、合理、代表性

2.按要求方法取樣

（中藥材、中藥制劑）中藥制劑分析試題專家講座第1頁二、判別（一）顯微判別在以下情況中應(yīng)用：藥材及炮制品外形判別特征不顯著或外形相同難于判別而組織結(jié)構(gòu)不一樣時；藥材破碎或呈粉末不易用肉眼識別或區(qū)分時；含原藥材粉末中藥制劑。

中藥制劑分析試題專家講座第2頁丸劑、片劑、膠囊劑、散劑

快速，簡便，覆蓋面大

選擇標(biāo)準(zhǔn)

1、應(yīng)選有專屬性特征進(jìn)行判別

2、多起源藥材應(yīng)選擇共有特征進(jìn)行判別

中藥制劑分析試題專家講座第3頁安宮牛黃丸1、水牛角濃縮粉2、麝香3、珍珠4、朱砂5、雄黃6、黃連7、梔子8、郁金9、黃芩中藥制劑分析試題專家講座第4頁顯微化學(xué)反應(yīng)判別法：普通可取藥材切片或粉末，中成藥取粉末，置載玻片上，滴加各種試劑，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察產(chǎn)生結(jié)晶、沉淀物，以及特殊顏色改變，作為判別特征。該法能夠確定基礎(chǔ)品種中特殊化學(xué)成份存在及在組織中分布。

中藥制劑分析試題專家講座第5頁(二）化學(xué)判別抗干擾能力差顯色、↓、↑、熒光例

二妙丸中蒼術(shù)判別蒼術(shù)酮蒼術(shù)炔中藥制劑分析試題專家講座第6頁（三）色譜判別TLC法——應(yīng)用最多（Rf、顏色、熒光）GC法——適合用于含揮發(fā)性成份藥品HPLC法——常與含量測定同時進(jìn)行中藥制劑分析試題專家講座第7頁判定有臨床療效已知成份黃連小檗堿（抗菌消炎）麻黃麻黃堿（支氣管哮喘）烏頭烏頭堿（毒性）洋地黃強(qiáng)心苷（強(qiáng)心）延胡索延胡索乙素（鎮(zhèn)痛）中藥制劑分析試題專家講座第8頁陰、陽對照法陽性對照將要判別藥材按制劑工藝處理，再按判別方法提取溶液陰性對照把制劑中要判別藥材除去，用剩下各味藥按制劑工藝處理，再按判別方法提取溶液中藥制劑分析試題專家講座第9頁

OO

O

O

O

OO

O

O

OO

×××

陰樣陽對品對例中藥制劑分析試題專家講座第10頁大補(bǔ)陰丸黃柏TLC法判別

樣品對照藥材小檗堿O

O

OO

O×××

例中藥制劑分析試題專家講座第11頁薄層板選擇

硅膠G板（可加0.3%～0.5%CMC-Na）——多用氧化鋁板——慣用于生物堿類藥品聚酰胺板——慣用于黃酮類及酚類藥品纖維素板——慣用于氨基酸類藥品

中藥制劑分析試題專家講座第12頁（四）中藥判別新技術(shù)－中藥指紋圖譜（色譜）1.定義：中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采取一定色譜分析伎倆，得到能夠標(biāo)定該中藥材或中藥制劑特征共有峰色譜圖中藥制劑分析試題專家講座第13頁2.色譜指紋圖譜基本屬性a.整體性將指紋圖譜作為一個整體來分析和比較它綜合特征以到達(dá)判別目標(biāo)。b.含糊性強(qiáng)調(diào)分析、比較指紋圖譜相同性，而不是完全相同。是一個綜合、量化色譜判別伎倆。中藥制劑分析試題專家講座第14頁色譜指紋圖譜在中藥質(zhì)量評價(jià)中能夠盡可能多地反應(yīng)中藥全貌。不需要清楚每一個組分化學(xué)結(jié)構(gòu)；不需要對每一個組分都進(jìn)行定量；只要求不一樣批號同一個藥品指紋圖譜保持一致。中藥制劑分析試題專家講座第15頁3.指紋圖譜應(yīng)用中藥制劑分析試題專家講座第16頁雅蓮云蓮味蓮雅蓮云蓮中藥制劑分析試題專家講座第17頁IIIIII訶子小訶子大訶子絨毛訶子中藥制劑分析試題專家講座第18頁人參須根人參主根中藥制劑分析試題專家講座第19頁不一樣產(chǎn)地高良姜?dú)庀嘀讣y圖譜中藥制劑分析試題專家講座第20頁指紋圖譜研究過程中注意事項(xiàng)：1、在藥效學(xué)指導(dǎo)下進(jìn)行研究，確保指紋圖譜反應(yīng)化學(xué)成份包含中藥材中有效部位所含絕大部分成份或有效成份全部。2、樣品預(yù)處理過程及測定方法應(yīng)簡便、經(jīng)濟(jì)、易行，且專屬性、準(zhǔn)確度與重現(xiàn)性好。中藥制劑分析試題專家講座第21頁三、雜質(zhì)檢驗(yàn)水分總灰分和酸不溶性灰分重金屬砷鹽殘留農(nóng)藥主要項(xiàng)目中藥制劑分析試題專家講座第22頁雜質(zhì)起源及檢驗(yàn)意義水分——結(jié)塊、霉變或有效成份水解灰分——控制藥品本身及泥土、沙石等無機(jī)雜質(zhì)重金屬——環(huán)境污染和使用農(nóng)藥引入砷鹽——劇毒，常由除草劑、殺蟲劑或化肥引入殘留農(nóng)藥——有毒中藥制劑分析試題專家講座第23頁（一）水分測定法烘干法（不含或少含揮發(fā)性成份）甲苯法（含揮發(fā)性成份）減壓干燥法（含揮發(fā)性成份珍貴藥）GC法中藥制劑分析試題專家講座第24頁酸不溶性灰分測定△△（二）總灰分和酸不溶性灰分測定總灰分測定中藥制劑分析試題專家講座第25頁WHO要求植物藥鉛≤10ppm鎘≤0.3ppm干法破壞濕法破壞硫代乙酰胺法（三）重金屬測定中藥制劑分析試題專家講座第26頁干法破壞（ChP）濕法破壞（USP）△△(調(diào)到中性)△中藥制劑分析試題專家講座第27頁堿融法破壞濕法破壞堿融法H+（四）砷鹽測定中藥制劑分析試題專家講座第28頁（五）殘留農(nóng)藥測定1、總氯量測定2、總磷量測定3、GC法中藥制劑分析試題專家講座第29頁

中國藥典中藥制劑含量測定所占百分比版本%19771.4819855.3119908.73199512.8162.09（HPLC36%TLCS24%GC3%)含量測定項(xiàng)目標(biāo)選定四、中藥制劑分析試題專家講座第30頁測定成份選定標(biāo)準(zhǔn)1.首選君藥及珍貴藥、劇毒藥建立含量、限量測定方法2.其次考慮臣藥及其它味藥3.有效成份明確，可選有效成份中藥制劑分析試題專家講座第31頁4.成份類別清楚，可測某一類總成份含量5.檢測成份應(yīng)歸屬某單一藥味6.檢測成份應(yīng)與中醫(yī)用藥功效主治相近7.確無法含量測定，可測定浸出物含量中藥制劑分析試題專家講座第32頁化學(xué)分析法色譜法慣用定量方法分光光度法中藥制劑分析試題專家講座第33頁（一）化學(xué)分析法重量分析法容量分析法特點(diǎn)A、準(zhǔn)確度、精密度高B、抗干擾能力差例中藥制劑分析試題專家講座第34頁（二）分光光度法UV法比色法特點(diǎn)A、靈敏度高B、簡便、快速C、精密度稍低D、干擾多中藥制劑分析試題專家講座第35頁蘆丁黃芩苷小檗堿丹皮酚中藥制劑分析試題專家講座第36頁

（三）TLCS法測定薄層板上斑點(diǎn)對單色光吸收或反射強(qiáng)度而進(jìn)行定量方法特點(diǎn)A、分離效果好B、適合用于無法用UV、HPLC法測定組分C、準(zhǔn)確度、精密度低于HPLC中藥制劑分析試題專家講座第37頁年版中國藥典（年版）

薄層掃描法品種

品種數(shù)量TLCS數(shù)量占總數(shù)%534（藥材）203.74458（成藥）326.99978（總數(shù)）5210.73中藥制劑分析試題專家講座第38頁

1.選擇測定條件（1）薄層色譜條件分離好不拖尾（2）檢測方法吸收測定法熒光測定法反射法透射法外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法（3）掃描方式單波長雙波長線性掃描法鋸齒掃描法中藥制劑分析試題專家講座第39頁（4）散射參數(shù)SX薄層板散射使Kubelka-Munk方程中藥制劑分析試題專家講座第40頁2.注意事項(xiàng)（1）薄層板均勻、平整（2）點(diǎn)樣量準(zhǔn)確（3）斑點(diǎn)應(yīng)完全分離，不拖尾（4）顯色劑均勻、適當(dāng)（5）保護(hù)斑點(diǎn)用相同大小潔凈玻璃蓋住薄層板，并用透明膠紙封住邊緣，以起固定和隔絕空氣作用中藥制劑分析試題專家講座第41頁

××××××××××××

樣樣對對樣樣對對樣樣對對

低高

低高

低高

外標(biāo)法（兩點(diǎn)校正法）中藥制劑分析試題專家講座第42頁中藥制劑分析試題專家講座第43頁（四）HPLC法外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法RP–HPLC色譜柱ODS流動相甲醇-水PIC反離子氫氧化四丁基銨RP-PIC反離子烷基磺酸鹽無機(jī)陰離子中藥制劑分析試題專家講座第44頁離子對色譜法（PIC）極性流動相中加入離子對試劑，與被分析離子生成中性離子對，從而增加在非極性固定相中溶解度，使分配系數(shù)增大中藥制劑分析試題專家講座第45頁年版中國藥典（年版）

HPLC法品種

品種數(shù)量HPLC數(shù)量占總數(shù)%534（藥材）5410.11458（成藥）4810.48978（總數(shù)）10220.59中藥制劑分析試題專家講座第46頁應(yīng)用實(shí)例-小青龍合劑[處方]麻黃125g桂枝125g白芍125g干姜125五味子125g細(xì)辛62g甘草(蜜炙)法半夏188g生物堿桂皮醛芍藥甙揮發(fā)油三萜皂甙中藥制劑分析試題專家講座第47頁應(yīng)用實(shí)例-小青龍合劑

[制法]以上八味，細(xì)辛、桂枝提取揮發(fā)油，蒸餾后水溶液另器搜集，藥渣與白芍、麻黃、五味子、甘草加水煎煮至味盡，合并煎液，濾過，濾液和蒸餾后水溶液合并，濃縮至約1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏劑項(xiàng)下滲漉法，用70%乙醇作溶劑，浸漬24小時后進(jìn)行滲漉，漉液濃縮，與上述藥液合并，靜置，濾過，濾液濃縮至1000ml，加入苯甲酸鈉3g與細(xì)辛、桂枝揮發(fā)油，攪勻，即得。中藥制劑分析試題專家講座第48頁[性狀]本品為棕黑色液體；氣微香，味甜、微辛。[功效與主治]解表化飲，止咳平喘。用于風(fēng)寒水飲，惡寒發(fā)燒，無汗，喘咳痰稀。[使用方法與用量]口服，一次10-20ml，一日3次，用時搖勻。中藥制劑分析試題專家講座第49頁方藥分析：君麻黃—發(fā)汗為君臣桂枝—解表為臣佐甘草—恐發(fā)汗太過,佐以甘草緩之使白芍、干姜、細(xì)辛、法半夏、五味子—幾藥協(xié)力共為使?？赏獍l(fā)汗，內(nèi)行水，散表里之邪。中藥制劑分析試題專家講座第50頁漢代張仲景《傷寒論》——小青龍湯近代由重慶桐君閣中藥廠該湯劑為合劑本方治療傷寒表不解，心下有水氣，干嘔，發(fā)燒而咳。近代也用于慢性支氣管炎，支氣管哮喘、肺氣腫，均見咳、喘、痰白清稀者。中藥制劑分析試題專家講座第51頁供試品溶液與陰性對照液制備：取合劑10ml，石油醚分3次萃取，合并石油醚萃取液[油層]，濃縮至1ml，為供試品溶液A；[水層]用Na2CO3調(diào)PH11-12，用氯仿萃取，合并氯仿萃取液，回收氯仿至干，殘?jiān)?ml甲醇溶解，為供試品溶液B；

陰性對照液如上法同時進(jìn)行。中藥制劑分析試題專家講座第52頁1.桂皮醛判別取供試品液A、陰性對照液、桂皮醛對照液（1ug/ml）15ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，環(huán)己烷-乙酸乙酯（17：3）展開，晾干，噴2，4—二硝基苯肼乙醇T.S，供試品A與對照品在對應(yīng)位置上顯相同橙色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。中藥制劑分析試題專家講座第53頁2.細(xì)辛揮發(fā)油判別取供試品液A、陰性對照液、細(xì)辛揮發(fā)油對照液（1：10乙醚液）5ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，環(huán)己烷展開，晾干，噴10%香草醛濃硫酸T.S，加熱至顯色，供試品A與對照品在對應(yīng)位置上顯相同粉紅色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。中藥制劑分析試題專家講座第54頁3.麻黃堿判別取供試品液B，陰性對照液，麻黃堿對照品液（1mg/ml）各5ul，點(diǎn)于同一硅膠G，氯仿-甲醇-濃氨水（20：5：0.5）展開，晾干，噴茚三酮T.S，加熱至斑點(diǎn)顯色，供試品B與對照品在對應(yīng)位置上顯相同藍(lán)紫色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。中藥制劑分析試題專家講座第55頁

取合劑5ml，上聚酰胺柱，DW洗脫，洗脫液水浴濃縮至干，用1ml甲醇溶解，為供試品溶液C；聚酰胺柱再用95%乙醇洗脫，棄取洗脫液，用3M氨乙醇液洗脫，搜集洗脫液水浴蒸干，1ml甲醇溶解，為供試品溶液D。中藥制劑分析試題專家講座第56頁4.芍藥甙判別取供試品液C、陰性對照液、芍藥甙對照液（1mg/ml）10ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸-甲酸（8：1：2：0.04）展開，晾干，噴10%硫酸乙醇液，加熱至顯色，供試品C與對照品在對應(yīng)位置上顯相同紫色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。中藥制劑分析試題專家講座第57頁5.甘草酸判別取供試品液D、陰性對照液、甘草酸銨對照液（2mg/ml）2ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-蒸餾水（30：2：2：4）展開，晾干，噴10%硫酸乙醇液，加熱至顯色，UV燈365nm觀察，供試品D與對照品在對應(yīng)位置上顯相同紫色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。中藥制劑分析試題專家講座第58頁含量測定HPLC法測定芍藥甙含量儀器與色譜條件BECKMAN332型高效液相色譜儀163型可變波長紫外檢測儀，220nm427型統(tǒng)計(jì)及數(shù)據(jù)處理儀色譜柱為YWGC18流動相乙腈-水（15：85）中藥制劑分析試題專家講座第59頁標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密稱取芍藥甙5.08mg，溶于水至50ml量瓶中，定容，分別吸收0.50、1.00、1.50、2.00ml于10ml量瓶中定容?；厥章蕼y定精密吸收除去白芍制成合劑（即陰性對照液）0.3ml與適量芍藥甙對照品液，經(jīng)過0.5g聚酰胺柱，用水洗脫至50ml量瓶中至刻度，依前述條件測定，平均回收率為99.42%，RSD為0.23%（n=3）。中藥制劑分析試題專家講座第60頁樣品測定取自制小青龍合劑搖勻，用濾紙過濾，精密吸收0.3ml濾液經(jīng)過聚酰胺柱，以不一樣回收率測定條件進(jìn)行測定。中藥制劑分析試題專家講座第61頁中藥制劑分析試題專家講座第62頁

分析實(shí)例—萬氏牛黃清心丸[處方]牛黃10g朱砂60g黃連200g黃芩120g梔子120g郁金80g中藥制劑分析試題專家講座第63頁分析實(shí)例—萬氏牛黃清心丸[制法]以上六味，除牛黃外，朱砂水飛或粉碎成極細(xì)粉；其余黃連等四味粉碎成細(xì)粉；將牛黃研細(xì)，與上述粉末配研，過篩，混勻。每100g粉末加煉蜜100-200g制成大蜜丸，即得。古方為糊丸，亦有水丸中藥制劑分析試題專家講座第64頁[性狀]本品為紅棕色至棕褐色大蜜丸；氣特異，味甜、微澀、苦。[功效主治]清熱解毒，鎮(zhèn)驚安神。用于熱邪內(nèi)閉，煩躁不安，神昏譫語，小兒高熱驚厥。中藥制劑分析試題專家講座第65頁[方藥分析]本方起源于明.?痘疹世醫(yī)》心法，本方為清心開竅劑，主治熱邪內(nèi)陷心包所致竅閉神昏癥。方中牛黃，清心解毒，豁痰開竅為君藥；黃連、黃芩、梔子清熱瀉火，為臣藥；朱砂清心，重鎮(zhèn)安神，郁金行氣開竅共為佐使藥，適用以奏透邪瀉熱，開竅安神之效。中藥制劑分析試題專家講座第66頁[方藥分析]牛黃—清熱解毒藥，主含膽酸類成份。黃連—清熱燥濕藥，主要為小檗堿。黃芩—清熱燥濕藥，主要為黃酮類。梔子—清熱瀉火藥，主含梔子甙。朱砂—安神藥，主含硫化汞（HgS）。郁金—活血去瘀藥，主含揮發(fā)油。

中藥制劑分析試題專家講座第67頁判別

顯微判別郁金—糊化淀粉團(tuán)塊幾乎無色。梔子—種皮石細(xì)胞。黃芩—纖維淡黃色，梭形，厚壁，孔溝細(xì)。黃連—纖維鮮黃色，壁稍厚，紋孔顯著。朱砂—不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色。中藥制劑分析試題專家講座第68頁郁金—糊化淀粉團(tuán)塊梔子—種皮石細(xì)胞黃芩—纖維黃連—纖維朱砂—不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色中藥制劑分析試題專家講座第69頁化學(xué)判別1.朱砂判別取本品3g，加水適量，研勻，重復(fù)洗去懸浮物，可得少許朱紅色沉淀，取出，加入鹽酸1ml及銅片少許，加熱煮沸，銅片由黃色變?yōu)殂y白色。HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2S

在酸性條件下，朱砂與銅片發(fā)生置換反應(yīng)析出金屬汞，在銅片表面形成銀白色汞齊。中藥制劑分析試題專家講座第70頁2.人工牛黃判別取本品，剪碎，加硅藻土0.6g，研勻，加氯仿10ml、冰醋酸0.5ml，加熱回流30min,放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。膽酸和豬去氧膽酸加乙醇制成1ml含1mg混合溶液，作為對照品溶液。中藥制劑分析試題專家講座第71頁TLC法CMC-Na，硅膠G展開劑醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇（32:6:1:1）顯色劑10%磷鉬酸乙醇液，1100C,10min中藥制劑分析試題專家講座第72頁人工牛黃供試品牛黃空白豬去氧膽酸膽酸中藥制劑分析試題專家講座第73頁3.黃芩判別供試品溶液制備：取本品3g，剪碎，加硅藻土0.5g，研勻，加甲醇20ml，加熱回流1hr,放冷，濾過，濾液作為供試品溶液。對照品溶液制備：黃芩甙對照品加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作為對照品溶液。中藥制劑分析試題專家講座第74頁TLC法CMC-Na，硅膠G（4%醋酸鈉）展開劑醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）顯色劑2%三氯化鐵乙醇液使斑點(diǎn)更為集中-OH與Fe+3絡(luò)合中藥制劑分析試題專家講座第75頁黃芩甙供試品黃芩空白中藥制劑分析試題專家講座第76頁4.梔子判別供試品溶液制備：取本品3g，加乙醚15ml，研磨，棄去乙醚。殘?jiān)鼡]干乙醚，加醋酸乙酯30ml，加熱回流1hr,放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。對照品溶液制備：梔子甙對照品加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作為對照品溶液。中藥制劑分析試題專家講座第77頁TLC法CMC-Na，硅膠G展開劑醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（10:7:2:0.5）顯色劑10%硫酸乙醇1050C,10min中藥制劑分析試題專家講座第78頁梔子甙供試品梔子空白中藥制劑分析試題專家講座第79頁5.黃連判別供試品溶液制備：取含量測定項(xiàng)下剩下鹽酸-甲醇提取液4ml，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，使?ml作為供試品溶液。中藥制劑分析試題專家講座第80頁

對照藥材溶液制備：黃連對照藥材50mg，加甲醇10ml，回流加熱15min,濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對照藥材溶液。對照品溶液制備：再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg溶液，作為對照品溶液。中藥制劑分析試題專家講座第81頁TLC法硅膠GCMC-Na展開劑苯-醋酸乙酯