《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)檢驗(yàn)》課件

《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)檢驗(yàn)》本課件旨在介紹醫(yī)學(xué)微生物學(xué)檢驗(yàn)的基本知識(shí)和技術(shù)，幫助學(xué)習(xí)者掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)的基本技能，并了解其在臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值。課程目標(biāo)了解微生物學(xué)檢驗(yàn)的基本原理掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)的基本技術(shù)能夠獨(dú)立完成常見(jiàn)的微生物學(xué)檢驗(yàn)了解微生物學(xué)檢驗(yàn)在臨床診斷中的應(yīng)用微生物形態(tài)概述細(xì)菌單細(xì)胞原核生物，形態(tài)多樣，主要包括球菌、桿菌、螺旋菌。真菌真核生物，形態(tài)多樣，主要包括酵母菌、霉菌、蕈菌。病毒非細(xì)胞生物，由核酸和蛋白質(zhì)外殼組成，形態(tài)多樣。細(xì)菌形態(tài)結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁細(xì)菌細(xì)胞壁是細(xì)菌的重要結(jié)構(gòu)，主要由肽聚糖組成，決定細(xì)菌的形狀和抗原性。細(xì)胞膜細(xì)菌細(xì)胞膜是細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)的磷脂雙分子層，控制物質(zhì)進(jìn)出，參與能量代謝。核質(zhì)細(xì)菌核質(zhì)位于細(xì)胞中央，由一個(gè)環(huán)狀DNA分子組成，控制細(xì)菌的遺傳信息。核糖體細(xì)菌核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所，是細(xì)菌的重要細(xì)胞器。真菌形態(tài)結(jié)構(gòu)酵母菌單細(xì)胞真菌，呈卵圓形或圓形，以出芽方式繁殖。霉菌多細(xì)胞真菌，菌絲體由許多菌絲組成，以孢子方式繁殖。蕈菌大型真菌，有菌蓋、菌柄、菌褶等結(jié)構(gòu)，以孢子方式繁殖。病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)1核酸2衣殼3包膜(部分病毒)常見(jiàn)細(xì)菌屬特點(diǎn)葡萄球菌屬革蘭陽(yáng)性球菌，常呈葡萄狀排列，有凝固酶陽(yáng)性和陰性之分。鏈球菌屬革蘭陽(yáng)性球菌，常呈鏈狀排列，有溶血性鏈球菌和不溶血性鏈球菌。大腸桿菌屬革蘭陰性桿菌，屬于腸道菌群，可引起腹瀉、尿路感染等。肺炎鏈球菌屬革蘭陽(yáng)性球菌，常引起肺炎、腦膜炎等，對(duì)青霉素敏感。常見(jiàn)真菌屬特點(diǎn)念珠菌屬酵母菌，常引起鵝口瘡、陰道炎等，對(duì)氟康唑敏感。曲霉屬霉菌，常引起肺部感染、腦膜炎等，對(duì)伊曲康唑敏感。毛霉屬霉菌，常引起腦膜炎、肺部感染等，對(duì)兩性霉素B敏感。常見(jiàn)病毒科特點(diǎn)1皰疹病毒科DNA病毒，常引起帶狀皰疹、單純皰疹等。2肝炎病毒科RNA病毒，常引起肝炎，如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等。3流感病毒科RNA病毒，常引起流感，如甲型流感病毒、乙型流感病毒等。菌種鑒定原理1形態(tài)學(xué)觀察通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)菌、真菌的形態(tài)特征，初步判斷菌種。2生理生化試驗(yàn)通過(guò)觀察細(xì)菌、真菌對(duì)不同培養(yǎng)基、溫度、氧氣等條件的反應(yīng)，判斷菌種。3血清學(xué)反應(yīng)利用抗原抗體反應(yīng)，特異性識(shí)別細(xì)菌、真菌的抗原。培養(yǎng)基及培養(yǎng)技術(shù)1培養(yǎng)基的選擇根據(jù)不同菌種的營(yíng)養(yǎng)需求，選擇合適的培養(yǎng)基。2接種方法將菌種接種到培養(yǎng)基上，如劃線接種、穿刺接種等。3培養(yǎng)條件控制合適的溫度、濕度、氧氣等條件，使菌種生長(zhǎng)繁殖。革蘭染色法原理及應(yīng)用染色原理利用細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)差異，對(duì)細(xì)菌進(jìn)行染色。染色步驟涂片、固定、初染、媒染、脫色、復(fù)染。應(yīng)用用于細(xì)菌的分類(lèi)、鑒定和耐藥性檢測(cè)。快速檢測(cè)技術(shù)原理抗原檢測(cè)利用抗原抗體反應(yīng)，快速檢測(cè)臨床樣本中的細(xì)菌或病毒抗原?？贵w檢測(cè)利用抗原抗體反應(yīng)，快速檢測(cè)臨床樣本中的細(xì)菌或病毒抗體。核酸檢測(cè)利用分子生物學(xué)技術(shù)，檢測(cè)臨床樣本中的細(xì)菌或病毒核酸。免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)利用酶標(biāo)記的抗體或抗原，檢測(cè)樣本中的抗原或抗體。2免疫熒光技術(shù)利用熒光標(biāo)記的抗體或抗原，檢測(cè)樣本中的抗原或抗體。3免疫沉淀反應(yīng)利用抗原抗體反應(yīng)，形成沉淀物，檢測(cè)樣本中的抗原或抗體。核酸檢測(cè)技術(shù)細(xì)菌耐藥性檢測(cè)紙片擴(kuò)散法利用紙片上的抗生素，觀察其對(duì)細(xì)菌的抑菌圈大小，判斷細(xì)菌的敏感性。肉湯稀釋法將抗生素稀釋成不同濃度，觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，判斷細(xì)菌的敏感性。真菌耐藥性檢測(cè)藥敏試驗(yàn)利用藥物對(duì)真菌的抑菌效果，判斷真菌的敏感性。分子生物學(xué)檢測(cè)檢測(cè)真菌耐藥基因的突變情況，判斷真菌的耐藥性。臨床檢體采集與處理采集原則無(wú)菌操作，避免污染，準(zhǔn)確標(biāo)識(shí)，及時(shí)送檢。處理方法根據(jù)不同檢體類(lèi)型，進(jìn)行相應(yīng)的處理，如離心、過(guò)濾、培養(yǎng)等。細(xì)菌分離培養(yǎng)流程1檢體處理根據(jù)檢體類(lèi)型，進(jìn)行相應(yīng)的處理，如離心、過(guò)濾、培養(yǎng)等。2接種培養(yǎng)將處理后的檢體接種到合適的培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)。3菌落觀察觀察培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)，判斷菌種。4菌種鑒定通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化試驗(yàn)等方法，鑒定菌種。真菌分離培養(yǎng)流程檢體處理根據(jù)檢體類(lèi)型，進(jìn)行相應(yīng)的處理，如離心、過(guò)濾、培養(yǎng)等。接種培養(yǎng)將處理后的檢體接種到合適的培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)。菌落觀察觀察培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)，判斷菌種。菌種鑒定通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化試驗(yàn)等方法，鑒定菌種。病毒分離培養(yǎng)流程1檢體處理2細(xì)胞培養(yǎng)3病毒增殖4病毒鑒定細(xì)菌鑒定檢測(cè)形態(tài)學(xué)觀察通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)菌的形態(tài)特征，初步判斷菌種。生理生化試驗(yàn)通過(guò)觀察細(xì)菌對(duì)不同培養(yǎng)基、溫度、氧氣等條件的反應(yīng)，判斷菌種。血清學(xué)反應(yīng)利用抗原抗體反應(yīng)，特異性識(shí)別細(xì)菌的抗原。分子生物學(xué)檢測(cè)利用核酸檢測(cè)技術(shù)，鑒定細(xì)菌的基因型。真菌鑒定檢測(cè)1形態(tài)學(xué)觀察通過(guò)顯微鏡觀察真菌的形態(tài)特征，初步判斷菌種。2生理生化試驗(yàn)通過(guò)觀察真菌對(duì)不同培養(yǎng)基、溫度、氧氣等條件的反應(yīng)，判斷菌種。3血清學(xué)反應(yīng)利用抗原抗體反應(yīng)，特異性識(shí)別真菌的抗原。4分子生物學(xué)檢測(cè)利用核酸檢測(cè)技術(shù)，鑒定真菌的基因型。病毒鑒定檢測(cè)1血清學(xué)檢測(cè)利用抗原抗體反應(yīng)，檢測(cè)樣本中的病毒抗原或抗體。2分子生物學(xué)檢測(cè)利用核酸檢測(cè)技術(shù)，檢測(cè)樣本中的病毒核酸。3細(xì)胞培養(yǎng)利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，觀察病毒在細(xì)胞中的增殖情況，判斷病毒種類(lèi)。細(xì)菌耐藥性檢測(cè)紙片擴(kuò)散法利用紙片上的抗生素，觀察其對(duì)細(xì)菌的抑菌圈大小，判斷細(xì)菌的敏感性。肉湯稀釋法將抗生素稀釋成不同濃度，觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，判斷細(xì)菌的敏感性。真菌耐藥性檢測(cè)藥敏試驗(yàn)利用藥物對(duì)真菌的抑菌效果，判斷真菌的敏感性。分子生物學(xué)檢測(cè)檢測(cè)真菌耐藥基因的突變情況，判斷真菌的耐藥性。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理質(zhì)量控制定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑、方法進(jìn)行質(zhì)量控制，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。人員培訓(xùn)定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)，提高檢驗(yàn)人員的技術(shù)水平。文件管理建立完善的實(shí)驗(yàn)室管理制度，對(duì)檢驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行記錄和管理。常見(jiàn)報(bào)告解讀1細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果菌種、菌落形態(tài)、耐藥性等信息。2真菌培養(yǎng)結(jié)果菌種、菌落形態(tài)、耐藥性等信息。3病毒檢測(cè)結(jié)果病毒種類(lèi)、抗體水平、核酸檢測(cè)結(jié)果等信息。案例分析與討論案例一患者感染肺炎，細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為肺炎鏈球菌，耐藥性檢測(cè)結(jié)果顯示對(duì)青霉素敏感。案例二患者感染真菌性肺炎，真菌培養(yǎng)結(jié)果為曲霉菌，耐藥性檢測(cè)結(jié)果顯示