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文檔簡介
1、第14章RNA的生物合成轉(zhuǎn)錄,14.1轉(zhuǎn)錄(transcription )的特點: 1、以DNA單鏈為鑄造模型,以NTP為原料,在依賴DNA的RNA多聚酶催化下合成RNA鏈的過程。 轉(zhuǎn)錄條件:鑄造模型原料酶催化劑產(chǎn)物情侶對戒方向引物、DNA (非對稱轉(zhuǎn)錄) NTP RNA多聚酶mRNA、tRNA、rRNA、小RNA、ta, 不需要gc5,轉(zhuǎn)錄方向5-3、數(shù)字大板塊鏈、圖13-1、數(shù)字大板塊鏈:反意義鏈(antisense strand,(-)鏈)以該鏈中的DNA鹽化學(xué)基的順序指導(dǎo)RNA的合成即轉(zhuǎn)錄的DNA鏈,編碼鏈:有意義的鏈(sense strand 查詢密碼鏈DNA3- 5型大板塊鏈5-g
2、g .轉(zhuǎn)錄方向均為53,3, RNA多聚酶是依存于DNA的RNA多聚酶(DNA-dependent RNA polymerase,DDRP ),以DNA為鑄造模型,催化游離的NTP個3, 5形成磷酸二酯類化合物鍵的14.2.1大腸菌群RNA多聚酶的組成(1)輔酶是由4種(5個)亞單位2構(gòu)成的(2)核心輔酶2,是參與轉(zhuǎn)錄全過程(3)的大腸菌群RNA多聚酶的結(jié)構(gòu)圖像、核酶(2)、起始因子, 與鑄造模型DNA的結(jié)合起始和催化多聚酶的組裝、結(jié)合的啟動子等,形成全酶催化劑(2)、全酶催化劑核酶催化劑、亞單位2、磷酸二酯類化合物結(jié)合(催化)結(jié)合鑄造模型(開環(huán)) (核酶參與轉(zhuǎn)錄全過程),起始啟動子(延長時脫
3、落)、功能、 14.2.2原核生物的啟動子(promoter)1、識別啟動子RNA多聚酶全酶催化劑的原核生物啟動子的特征:(1)DNA序列是轉(zhuǎn)錄起點的5端區(qū)域(上游區(qū)域) (2)-10bp處的tataat(pribnowbox)(3) 在35BP中-TTGACA-亞單位識別-35區(qū),RNA pol全部酶催化劑移動到-10區(qū),合成了第一個磷酸二酯類化合物鍵、5-pppGpN(A)-OH-、轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物、RNA pol() DNApppGpN-OH、16/50、結(jié)構(gòu)基因、終止點、1 TTGACA,TATAAT,轉(zhuǎn)錄起始,翻譯起始,Purine轉(zhuǎn)錄輔助因子識別部位:啟動子-35區(qū),-10區(qū),結(jié)合過
4、程:閉合的啟動子復(fù)合物RNA多聚酶(全部酶催化劑)中的因子在DNA二本鏈上迅速隨機(jī)滑動,找到了啟動子-35區(qū),找到了稀疏的復(fù)合物開放式啟動子復(fù)合物RNA多聚酶(全酶催化劑)與-10區(qū)轉(zhuǎn)錄起始、14.2.3.3延長-轉(zhuǎn)錄泡沫RNA多聚酶(核酶)和DNA鑄造模型緊密結(jié)合,向3 5個方向移動解旋作用: See Movie, 14.2.3.4轉(zhuǎn)錄終止:終止子和終止子在鑄造模型的某個位置形成轉(zhuǎn)錄磷酸二酯類化合物鍵RNADNA單孢雜交鏈解開DNA解鏈的部分再次形成雙線RNA多聚酶脫離DNA、終止子(terminator ) 提供轉(zhuǎn)錄終端的DNA序列終端因子(termination factor ),幫助R
5、NA Pol識別終端的輔助因子,第一類:依賴因子終端,1,轉(zhuǎn)錄終端兩種方式(原核), 終止信號已轉(zhuǎn)錄到DNA數(shù)字大板塊的RNA Pol,其結(jié)構(gòu)終止動作DNA和RNA(dA :rU )的穩(wěn)定性降低,富含GC/AT的回文結(jié)構(gòu)本身互補地在發(fā)卡結(jié)構(gòu)(hairpin) 3末端形成4個U DNA雙鏈,釋放轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。 (轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物3的末端),例如、自發(fā)地形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)、發(fā)卡結(jié)構(gòu)、環(huán)、莖、多個u、DNA數(shù)字大板塊3、5、起始、雙鏈DNA部分解開。 14.2.4轉(zhuǎn)錄后的加工、14.2.4.1原核生物mRNA多順反子轉(zhuǎn)錄和翻譯同步mRNA的加工壽命短,不需要14.2.4 .1tRNA的加工, 鹽化學(xué)基修飾3端5端切除
6、反密碼環(huán)的內(nèi)含子,稀有鹽化學(xué)基- T脫阿摩尼亞- AMP IMP還原- DHU甲基化- mA mG CCA-OH RNaseP切除多聚核苷酸RNaseP在前tRNA二級結(jié)構(gòu)上,14.2 14.3真核細(xì)胞下的轉(zhuǎn)錄1, 轉(zhuǎn)錄和翻譯在不同的地方,14.3.1真核細(xì)胞RNA多聚酶在DEAE-Sephadex柱中的溶出順序稱為酶催化劑、沒有與因子對應(yīng)的成分,轉(zhuǎn)錄因子需要參與的14.3.2啟動子(hh TATA信息幀(Hogness box ) 與RNA多聚酶定位相關(guān)的DNA雙鏈解的位點輔助因子,包括通用轉(zhuǎn)錄因子(GTF ),4,真核與原核生物mRNA的區(qū)別,原核生物mRNA的多順反子真核生物mRNA單順
7、反子轉(zhuǎn)錄后, 加工運輸?shù)郊?xì)胞球漿翻譯mRNA加工壽命長,真核生物的mRNA轉(zhuǎn)錄后加工,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物: hnRNA (核不均勻RNA )蛋白不均勻核酶(hnRNP ); 加帽加尾mRNA前驅(qū)物的切斷5端: m7GpppGpN作用:穩(wěn)定mRNA 5端和翻譯的開始關(guān)系3端: polyA尾作用:穩(wěn)定mRNA和翻譯數(shù)字鍵活性關(guān)系插入鏡頭加侖、連接外顯子、加工過程主要為,5 pppGp,(1)真核生物mRNA轉(zhuǎn)錄后加工的步驟2, (2)真核生物mRNA轉(zhuǎn)錄后加工-正polyA尾,外顯子,內(nèi)含子mrnadnahybridsforthechickenovalbumingene (therloopingtechnique ),14. 4核酶真核生物rRNA的自切斷, 四膜蟲26SrRNA前驅(qū)物6.4 kb 414bp內(nèi)含子5.986kb無酶催化,具有自切割催化功能的RNA切割專一性RNA序列具有特定二級結(jié)構(gòu)的槌頭結(jié)構(gòu)人工合成核酶的槌頭結(jié)構(gòu)破壞HIV細(xì)小病毒、基質(zhì)、催化部分, 圖
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