產(chǎn)前篩查與產(chǎn)前診斷知識

1、產(chǎn)前篩查與產(chǎn)前診斷 相關(guān)知識,主要內(nèi)容,一產(chǎn)前診斷的目的,二產(chǎn)前診斷的概念簡介,三產(chǎn)前診斷的適用情況,四產(chǎn)前診斷技術(shù)與方法,五無創(chuàng)產(chǎn)前DNA檢測,六產(chǎn)前診斷倫理學(xué)問題,產(chǎn)前診斷的目的,出生缺陷 臨床上尚缺乏針對這些出生缺陷的有效治療措施 至少20%的缺陷兒自然流產(chǎn) 20%出生后很快死亡 存活下來的人群中2%左右會發(fā)生重要缺陷 給家庭和社會帶來巨大的精神和經(jīng)濟壓力,影響了全民素 質(zhì)的提高。 遺傳因素 發(fā)生原因 環(huán)境因素 兩者共同作用 遺傳咨詢 目前可以通過 產(chǎn)前診斷 選擇性終止妊娠 等方法減少缺陷兒出生率,出生缺陷 影響人的一生 影響一個家庭 影響一個社會,唐氏綜合征患兒,三體型21-三體(FI

2、SH,der(21;21,唐氏綜合征核型圖譜,無腦兒,脊柱裂,腦積水,開放性神經(jīng)管缺陷(NTD,產(chǎn)前診斷,產(chǎn)前診斷又稱宮內(nèi)診斷或 出生前診斷, 是指在胎兒出 生前用各種方法診斷胎兒是 否患有某種遺傳病或先天性 疾病的一種手段, 是人類細(xì) 胞遺傳學(xué)、分子遺傳學(xué)、生 物化學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)實踐緊密 結(jié)合的一門學(xué)科,篩查與診斷,胎兒健康狀況的檢查分為 篩查 兩類。 診斷 篩查：是針對胎兒是否有發(fā)生某種遺傳病 高風(fēng)險進(jìn)行的；篩查的方法簡單, 結(jié)果快速, 成本低廉, 可分析大批量標(biāo)本, 但其敏感性和特異性均較差。不能作為對所疑問的疾病作最后診斷的依據(jù)。篩查的結(jié)果分為陽性和陰性, 陽性只能說明病人有可能患病,

3、而陰性結(jié)果也不能徹底排除患病的可能性,篩查與診斷,診斷：診斷性檢測必須建立在先癥者確診基礎(chǔ)上, 是有目的性的。敏感性和特異性較高, 結(jié)果準(zhǔn)確可靠, 但成本高, 時間長。對篩查結(jié)果陽性者應(yīng)提供診斷性的檢查,以達(dá)到對所疑問的疾病進(jìn)行最終診斷的目的。產(chǎn)前診斷中應(yīng)遵從：篩查在先, 診斷在后的原則,產(chǎn)前篩查,對表型正常的人群進(jìn)行產(chǎn)前篩查,產(chǎn)前篩查,篩查出較高可能孕育異常胎兒的高風(fēng)險人群,產(chǎn)前診斷,高風(fēng)險人群最后通過診斷性措施，如絨毛、羊水或臍帶血穿刺等方法確診異常胎兒,產(chǎn)前診斷適應(yīng)征,唐氏篩查高風(fēng)險孕婦 高齡孕婦（分娩年齡35歲） 曾生育過染色體異?；純赫?夫婦之一為某種單基因病患者或攜帶者（耳聾等）

4、孕婦有環(huán)境致畸因素接觸史，尤其是孕婦活動性TORCH感染史的孕婦,妊娠期產(chǎn)前診斷,一. 產(chǎn)前診斷的技術(shù)手段目前主要有： 影像學(xué) 生化遺傳檢測 染色體核型分析 基因檢測 等方法,妊娠期產(chǎn)前診斷,二. 產(chǎn)前診斷取材途徑： 產(chǎn)前診斷取材方法包括兩大類 侵入性（創(chuàng)傷性） 非侵入性（非創(chuàng)傷性） 創(chuàng)傷性取材方法包括： 羊膜腔穿刺、 絨毛活檢、 臍靜脈穿刺、 胎兒鏡和胚胎活組織檢查等 。 其中羊膜腔穿刺和絨毛取樣目前最常用,妊娠期產(chǎn)前診斷,二. 產(chǎn)前診斷取材途徑： 非創(chuàng)傷性取材方法包括 植入前診斷、 孕婦外周血分離胎兒細(xì)胞、 宮頸黏液沖洗、 孕婦血清篩查、 超聲診斷等。 母體,常見產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù),血清標(biāo)

5、志物產(chǎn)前篩查主要手段,母血清標(biāo)志物的檢測來發(fā)現(xiàn)懷有先天缺陷胎兒的高危孕婦 產(chǎn)前篩查中最常用的血清標(biāo)志物是AFP、游離-HCG、游離雌三醇（uE3）和妊娠相關(guān)血漿蛋白（PAPP-A）等,AFP是NTD及先天愚型的標(biāo)記物,母體血清中升高的AFP全部來自胎兒 唐氏綜合征胎兒 母體血清AFP水平比正常妊娠低 NTD胎兒 孕婦血清及羊水中的AFP水平比正常妊娠高,早孕期唐氏篩查（在11-13+6周采血） PAPP-A+-HCG 結(jié)合檢出率更高 中孕期唐氏篩查（在14-20+6周采血） AFP+游離-HCG+uE3 21-三體、18-三體、神經(jīng)管缺陷 早、中孕期聯(lián)合篩查,唐氏綜合征產(chǎn)前篩查,早孕期超聲篩查

6、,NT是獨立的早孕期篩查指標(biāo)（3.0mm,羊膜腔穿刺,最常用的有創(chuàng)性產(chǎn)前診斷技術(shù) 方法：孕1830周抽取20ml羊水，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)或其他檢測。 用途：胎兒染色體病和單基因遺傳病的產(chǎn)前診斷 安全：與之相關(guān)的流產(chǎn)率0.1-0.2,絨毛活檢（CVS,方法：孕10周-14周抽取胎盤位置的絨毛組織20-40ml，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)或生化檢查。 用途：胎兒染色體病和單基因遺傳病的產(chǎn)前診斷 安全：與之相關(guān)的流產(chǎn)率0.2-0.5,臍靜脈穿刺,方法：孕18-32周方法與羊水穿刺相似，取樣部位不同。 （進(jìn)入胎兒循環(huán)） 用途：羊水或絨毛檢查失敗補救 快速胎兒核型分析 胎兒宮內(nèi)感染的診斷 胎兒血液系統(tǒng)疾病產(chǎn)前診斷 安全：流

7、產(chǎn)率1,孕婦外周血分離胎兒細(xì)胞,屬非侵入性（非創(chuàng)傷性）產(chǎn)前診斷技術(shù)。孕婦外周血中存在胎兒細(xì)胞(滋養(yǎng)細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、顆粒細(xì)胞及有核紅細(xì)胞)，通過分離、富集這些細(xì)胞可用于產(chǎn)前診斷，時間一般為孕7-25周，以15周為最佳，有核紅細(xì)胞是用于產(chǎn)前診斷的最理想的細(xì)胞，但孕婦外周血中胎兒細(xì)胞的數(shù)目極少，技術(shù)要求很高，需要孕婦血量較多，故現(xiàn)已較少用,定義：抽取孕婦外周血采用高通量測序技術(shù)進(jìn)行 胎兒21-三體、18-三體、13-三體綜合征檢測 不具有非羊膜腔或絨毛膜穿刺損傷性 準(zhǔn)確性： 99.2% （21-三體和18-三體） 高風(fēng)險孕婦：需要產(chǎn)前診斷驗證,無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測-高級篩查,28,理論基礎(chǔ),含量,動態(tài)

8、,長度,代謝,孕婦血液中，胎兒游離DNA是細(xì)胞DNA的970倍，占母子全部游離DNA含量的3-6,妊娠第5周開始可檢出胎兒游離DNA，隨孕周增加而增加，但存在個體差異,妊娠后血漿母親游離DNA長度明顯增加，胎兒游離DNA分子片斷化，平均長162bp,分娩后2h就無法檢出， 平均半衰期為16.3min（4-30min,胎兒自身DNA可進(jìn)入母體的外周血 （1997年香港人 Luo Dennis 在牛津大學(xué)發(fā)現(xiàn),29,異常：母體+胎兒共115條,檢測原理,總體數(shù)量 差異,正常：母體+胎兒共110條,胎兒染色體非整倍體導(dǎo)致母血漿中游離DNA劑量變化,無創(chuàng)性胎兒非整倍體(NTPT)檢測,大量臨床測試表明

9、，NIPT技術(shù)對于21和18三體檢測的靈敏度和特異性均接近100%，13三體的檢測準(zhǔn)確度也在提高，性染色體的準(zhǔn)確性需要提高 假陽性和假陰性不能避免,NIPT假陽性,假陽性：誤診，實際無病，但根據(jù)篩檢 被判為有病 假陽性原因： 1.局限性胎盤嵌合型 21三體假陽性 2.單親二體 21三體假陽性 3.母親為非整倍體 X三體假陽性 4.母親為實質(zhì)性腫瘤 13三體假陽性,NIPT假陰性,假陰性：漏診，實際有病，但根據(jù)篩檢 被判為無病 假陰性原因： 1.孕周過早 2.多胎 3.雙胎消失 3.胎盤嵌合 5.標(biāo)本處理不當(dāng),33,99%的準(zhǔn)確率 假陽性率極低 只需5-10ml孕婦靜脈血 無需空腹采血 無宮內(nèi)感染和流產(chǎn)風(fēng)險 孕12周即可檢測 10工作日內(nèi)出報告,60-80%的準(zhǔn)確性 假陽性率為5% 需空腹采血 結(jié)合B超 只能檢測21和18-三體，不能檢測13-三體,侵入性取樣方式，孕婦心理壓力大 有宮內(nèi)感染和流產(chǎn)風(fēng)險 存在標(biāo)本被污染或細(xì)胞培養(yǎng)失敗的風(fēng)險 不適宜病毒攜帶者、胎位特殊者、Rh陰性血者等特殊情況,普通唐篩,產(chǎn)前診斷,無創(chuàng)產(chǎn)前DNA檢測,與現(xiàn)有產(chǎn)檢技術(shù)的比較,產(chǎn)前診斷的倫理問題,1）不得進(jìn)行非醫(yī)學(xué)目的的性別鑒定； （2）不建議對非致死性, 以及不嚴(yán)重影響 生活質(zhì)量和生存能力的畸形終止妊娠； （3）