專題11.1DNA重組技術(shù)的基本工具

1、創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)一、基因工程的概念一、基因工程的概念創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)限制酶限制酶 原核生物原核生物 特定核苷酸序列特定核苷酸序列 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵 平末端平末端 黏性末端黏性末端 創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)限制酶限制酶 磷酸二磷酯鍵磷酸二磷酯鍵 種種類類比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目Ecoli DNA連接酶連接酶T4DNA連接酶連接酶來(lái)源來(lái)源特點(diǎn)特點(diǎn)只能只能“縫合縫合”具有具有 的雙鏈的雙鏈DNA片段片段既可以既可以“縫合縫合”雙鏈雙鏈DNA片段互補(bǔ)片段互補(bǔ)的的 ，又可以，又可以“縫合縫合”雙鏈雙鏈DNA片段片段的的 .大腸桿菌大腸桿菌T T

2、4 4噬菌體噬菌體黏性末端黏性末端 平末端平末端 互補(bǔ)的黏性末端互補(bǔ)的黏性末端 創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)一、限制性核酸內(nèi)切酶一、限制性核酸內(nèi)切酶( (限制酶限制酶) )閱讀教材閱讀教材P4P45 5，分析圖，分析圖1 12 2、1 13 3，探究下列問(wèn)題：，探究下列問(wèn)題：1 1限制酶切割限制酶切割DNADNA分子時(shí)，其切割部位在哪里？具有分子時(shí)，其切割部位在哪里？具有怎樣的作用特點(diǎn)？怎樣的作用特點(diǎn)？提示：提示：(1)(1)切割部位是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。切割部位是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(2)(2)作用特點(diǎn)：具有專一性

3、。具體表現(xiàn)在兩個(gè)方面：識(shí)別雙作用特點(diǎn)：具有專一性。具體表現(xiàn)在兩個(gè)方面：識(shí)別雙鏈鏈DNADNA分子中特定的核苷酸序列；切割特定序列中的特定位分子中特定的核苷酸序列；切割特定序列中的特定位點(diǎn)。可用于點(diǎn)。可用于DNADNA的切割，獲取目的基因和切割載體。的切割，獲取目的基因和切割載體。2 2利用限制酶切割得到的是黏性末端或平末端，二者有什利用限制酶切割得到的是黏性末端或平末端，二者有什么區(qū)別？么區(qū)別？提示：提示：(1)(1)黏性末端：是限制酶在識(shí)別序列的中心黏性末端：是限制酶在識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將軸線兩側(cè)將DNADNA的兩條鏈分別切開(kāi)形成的，如圖所示。的兩條鏈分別切開(kāi)形成的，如圖所示。創(chuàng) 新 方

4、 案 系 列 叢 書(shū)(2)(2)平末端：是限制酶在識(shí)別序列的中心軸線處切開(kāi)形成的，平末端：是限制酶在識(shí)別序列的中心軸線處切開(kāi)形成的，如圖所示。如圖所示。具有黏性末端的具有黏性末端的DNADNA片段能夠通過(guò)互補(bǔ)堿基間的配對(duì)重新結(jié)片段能夠通過(guò)互補(bǔ)堿基間的配對(duì)重新結(jié)合，而具有平末端的合，而具有平末端的DNADNA片段不容易結(jié)合。片段不容易結(jié)合。創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)二、二、DNADNA連接酶連接酶閱讀教材閱讀教材P5P5并觀察分析圖并觀察分析圖1 14 4，討論下列問(wèn)題：，討論下列問(wèn)題：1 1DNADNA連接酶的作用目的是什么？作用于哪種化學(xué)鍵？連接酶的作用目的是什么？作用于哪種化學(xué)鍵？提示

5、：提示：(1)(1)作用目的：將切下的黏性末端或平末端重新拼接、作用目的：將切下的黏性末端或平末端重新拼接、縫合，形成新的縫合，形成新的DNADNA分子。分子。(2)(2)作用的化學(xué)鍵：磷酸二酯鍵。作用的化學(xué)鍵：磷酸二酯鍵。2 2根據(jù)圖示分析：根據(jù)圖示分析：(1)(1)圖中圖中a a酶、酶、b b酶分別是哪種酶？酶分別是哪種酶？提示：提示：a a是限制酶是限制酶( (或限制性核酸內(nèi)切酶或限制性核酸內(nèi)切酶) )；b b是是DNADNA連接酶。連接酶。創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)(2)(2)兩種酶在基因工程中有什么作用及應(yīng)用。兩種酶在基因工程中有什么作用及應(yīng)用。 提示：提示：作用作用應(yīng)用應(yīng)用限制

6、性限制性核核酸內(nèi)切酸內(nèi)切酶酶使特定部位的磷酸使特定部位的磷酸二酯鍵斷裂二酯鍵斷裂用于提取目的基因用于提取目的基因和切割載體和切割載體DNADNA連接連接酶酶在在DNA片段之間重片段之間重新形成磷酸二酯鍵新形成磷酸二酯鍵用于目的基因和載用于目的基因和載體的連接體的連接創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)三、載體三、載體閱讀教材閱讀教材P6P6，觀察分析圖，觀察分析圖1 15 5，探討下列問(wèn)題：，探討下列問(wèn)題：1 1具備什么條件的物質(zhì)才能充當(dāng)基因工程的載體？具備什么條件的物質(zhì)才能充當(dāng)基因工程的載體？提示：載體必須具備的條件：提示：載體必須具備的條件：(1)(1)能在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存并大量復(fù)制。能在受體

7、細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存并大量復(fù)制。(2)(2)有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，以便與外源基因連接。有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，以便與外源基因連接。(3)(3)具有某些特殊標(biāo)記基因，以便進(jìn)行篩選。當(dāng)然，載體應(yīng)對(duì)具有某些特殊標(biāo)記基因，以便進(jìn)行篩選。當(dāng)然，載體應(yīng)對(duì)受體細(xì)胞無(wú)毒害作用，否則受體細(xì)胞將受到損傷甚至死亡。受體細(xì)胞無(wú)毒害作用，否則受體細(xì)胞將受到損傷甚至死亡。2 2聯(lián)系主動(dòng)運(yùn)輸中的載體，試從它們的化學(xué)本質(zhì)和作用方面聯(lián)系主動(dòng)運(yùn)輸中的載體，試從它們的化學(xué)本質(zhì)和作用方面分析二者的不同。分析二者的不同。提示：提示：(1)(1)主動(dòng)運(yùn)輸中的載體是位于細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，其作主動(dòng)運(yùn)輸中的載體是位于細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，其作用是運(yùn)輸離子

8、、氨基酸、核苷酸等物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。用是運(yùn)輸離子、氨基酸、核苷酸等物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。(2)(2)基因工程中的載體的化學(xué)本質(zhì)是基因工程中的載體的化學(xué)本質(zhì)是DNADNA，其作用是：，其作用是：攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞；利用載體在宿主細(xì)胞中的攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞；利用載體在宿主細(xì)胞中的復(fù)制對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。復(fù)制對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū) 如圖為如圖為DNADNA分子結(jié)構(gòu)示意圖，下列對(duì)該圖的描述正確的分子結(jié)構(gòu)示意圖，下列對(duì)該圖的描述正確的 是是( () )創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)A A的名稱是胞嘧啶脫氧核苷酸的名稱是胞嘧啶脫氧核苷酸B B解旋酶作用的部位是解旋酶作用

9、的部位是C C某限制性核酸內(nèi)切酶可選擇處作為切點(diǎn)某限制性核酸內(nèi)切酶可選擇處作為切點(diǎn)D DDNADNA連接酶可連接處斷裂的化學(xué)鍵連接酶可連接處斷裂的化學(xué)鍵 解析解析 圖中包含上一個(gè)脫氧核苷酸的磷酸和下一個(gè)脫氧圖中包含上一個(gè)脫氧核苷酸的磷酸和下一個(gè)脫氧核苷酸的五碳糖和堿基，不是一個(gè)脫氧核苷酸，核苷酸的五碳糖和堿基，不是一個(gè)脫氧核苷酸，A A錯(cuò)誤；限錯(cuò)誤；限制性核酸內(nèi)切酶的作用部位是磷酸二酯鍵，解旋酶的作用是制性核酸內(nèi)切酶的作用部位是磷酸二酯鍵，解旋酶的作用是解開(kāi)解開(kāi)DNADNA雙鏈，作用部位是氫鍵，雙鏈，作用部位是氫鍵，B B、C C錯(cuò)誤；錯(cuò)誤；DNADNA連接酶可連連接酶可連接處斷裂的磷酸二酯鍵

10、，接處斷裂的磷酸二酯鍵，D D正確。正確。答案：答案：D D 創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū) 如圖為大腸桿菌及質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)模式圖，據(jù)圖回答下如圖為大腸桿菌及質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)模式圖，據(jù)圖回答下 列問(wèn)題。列問(wèn)題。(1)a(1)a代表的物質(zhì)和質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)相同，都是代表的物質(zhì)和質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)相同，都是_，二者，二者還具有其他共同點(diǎn)，如還具有其他共同點(diǎn)，如_，_(_(寫(xiě)出兩寫(xiě)出兩條即可條即可) )。創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)(2)(2)若質(zhì)粒若質(zhì)粒DNADNA分子的切割末端為分子的切割末端為AA TGCGC TGCGC，則與之連接的，則與之連接的目的基因切割末端應(yīng)為目

11、的基因切割末端應(yīng)為_(kāi)；可使用；可使用_把質(zhì)粒和目的基因連接。把質(zhì)粒和目的基因連接。(3)(3)氨芐青霉素抗性基因在質(zhì)粒氨芐青霉素抗性基因在質(zhì)粒DNADNA上稱為上稱為_(kāi)，其作用，其作用是是_。(4)(4)下列常在基因工程中作為載體的是下列常在基因工程中作為載體的是( () )A A蘇云金芽孢桿菌抗蟲(chóng)基因蘇云金芽孢桿菌抗蟲(chóng)基因B B土壤農(nóng)桿菌環(huán)狀土壤農(nóng)桿菌環(huán)狀RNARNA分子分子C C大腸桿菌的質(zhì)粒大腸桿菌的質(zhì)粒D D動(dòng)物細(xì)胞的染色體動(dòng)物細(xì)胞的染色體創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū) 基因工程中的限制酶與載體基因工程中的限制酶與載體(1)(1)載體必須具備一個(gè)或多個(gè)限制

12、酶的切割位點(diǎn)，但每種酶載體必須具備一個(gè)或多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)，但每種酶的切點(diǎn)最好只有一個(gè)。若用于切割載體的限制酶有多個(gè)點(diǎn)，的切點(diǎn)最好只有一個(gè)。若用于切割載體的限制酶有多個(gè)點(diǎn)，則切割后質(zhì)?？赡軙?huì)丟失某些片段，若丟失的片段含有復(fù)制則切割后質(zhì)?？赡軙?huì)丟失某些片段，若丟失的片段含有復(fù)制起始點(diǎn)，則重組起始點(diǎn)，則重組DNADNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞后便不能進(jìn)行自主復(fù)制。分子進(jìn)入受體細(xì)胞后便不能進(jìn)行自主復(fù)制。(2)(2)限制酶切割位點(diǎn)所處的位置必須是在所需的標(biāo)記基因之外，限制酶切割位點(diǎn)所處的位置必須是在所需的標(biāo)記基因之外，這樣才能保證標(biāo)記基因的完整性，有利于對(duì)目的基因的檢測(cè)。這樣才能保證標(biāo)記基因的完整性，有利于

13、對(duì)目的基因的檢測(cè)。創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū) 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 填充：限制酶填充：限制酶DNADNA連接酶基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載連接酶基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體磷酸二酯鍵質(zhì)粒體磷酸二酯鍵質(zhì)粒課堂歸納課堂歸納創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū) 關(guān)鍵語(yǔ)句關(guān)鍵語(yǔ)句 1 1基因工程突破了生殖隔離，實(shí)現(xiàn)了不同種生物間的基因重組?；蚬こ掏黄屏松掣綦x，實(shí)現(xiàn)了不同種生物間的基因重組。2 2不同生物基因能拼接在一起的理論基礎(chǔ)是不同生物基因能拼接在一起的理論基礎(chǔ)是DNADNA分子都是由分子都是由4 4種種 脫氧核苷酸構(gòu)成的規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。脫氧核苷酸構(gòu)成的規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。3 3外源外源DNADNA導(dǎo)入受體細(xì)胞表達(dá)

14、的理論基礎(chǔ)是密碼子的通用性。導(dǎo)入受體細(xì)胞表達(dá)的理論基礎(chǔ)是密碼子的通用性。4 4限制酶的作用特點(diǎn)是識(shí)別雙鏈限制酶的作用特點(diǎn)是識(shí)別雙鏈DNADNA分子特定的核苷酸序列，并分子特定的核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)上切割。在特定位點(diǎn)上切割。5 5限制酶和限制酶和DNADNA連接酶的作用部位都是兩個(gè)核苷酸間的磷酸二連接酶的作用部位都是兩個(gè)核苷酸間的磷酸二 酯鍵。酯鍵。6 6在基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外，還有在基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外，還有噬菌體的衍生物、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。動(dòng)植物病毒等。創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)1 1科學(xué)家們經(jīng)過(guò)多年的努力，創(chuàng)立了一種新興生物技術(shù)科學(xué)家們經(jīng)過(guò)多年的努力，創(chuàng)

15、立了一種新興生物技術(shù)基因工程，實(shí)施該工程的最終目的是基因工程，實(shí)施該工程的最終目的是( () )A A定向提取生物體的定向提取生物體的DNADNA分子分子B B定向地對(duì)定向地對(duì)DNADNA分子進(jìn)行人工分子進(jìn)行人工“剪切剪切”C C在生物體外對(duì)在生物體外對(duì)DNADNA分子進(jìn)行改造分子進(jìn)行改造D D定向地改造生物的遺傳性狀定向地改造生物的遺傳性狀創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)解析：基因工程的定義就是在生物體外，通過(guò)對(duì)解析：基因工程的定義就是在生物體外，通過(guò)對(duì)DNADNA分分子進(jìn)行人工子進(jìn)行人工“剪切剪切”和和“拼接拼接”，對(duì)生物的基因進(jìn)行改，對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無(wú)

16、性繁殖，使造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無(wú)性繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生出人類所需的基因產(chǎn)重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生出人類所需的基因產(chǎn)物，也就是定向地改造了生物的遺傳性狀。物，也就是定向地改造了生物的遺傳性狀。答案：答案：D D 創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)2 2下列關(guān)于限制酶的說(shuō)法正確的是下列關(guān)于限制酶的說(shuō)法正確的是( () )A A限制酶廣泛存在于各種生物中，微生物中很少分布限制酶廣泛存在于各種生物中，微生物中很少分布B B一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列C C不同的限制酶切割不同的限制酶切割DNADNA后都會(huì)形成黏性末端后

17、都會(huì)形成黏性末端D D限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵解析：限制酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的，并不是廣解析：限制酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的，并不是廣泛存在于各種生物中；一種限制酶能識(shí)別雙鏈泛存在于各種生物中；一種限制酶能識(shí)別雙鏈DNADNA的某種特定核的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)；酸二酯鍵斷開(kāi)；DNADNA分子經(jīng)限制酶切割會(huì)形成黏性末端和平末端分子經(jīng)限制酶切割會(huì)形成黏性末端和平末端兩種。兩種。答案：答案：B B 創(chuàng) 新 方 案 系 列

18、 叢 書(shū)3 3下列有關(guān)下列有關(guān)DNADNA連接酶的敘述正確的是連接酶的敘述正確的是( () )催化具有相同的黏性末端的催化具有相同的黏性末端的DNADNA片段之間連接片段之間連接催化具有不同的黏性末端的催化具有不同的黏性末端的DNADNA片段之間連接片段之間連接催化兩個(gè)黏性末端互補(bǔ)堿基間氫鍵的形成催化兩個(gè)黏性末端互補(bǔ)堿基間氫鍵的形成催化脫氧核糖與磷酸之間的磷酸二酯鍵的形成催化脫氧核糖與磷酸之間的磷酸二酯鍵的形成A AB BC C D D解析：解析：DNADNA連接酶催化相同連接酶催化相同( (即互補(bǔ)即互補(bǔ)) )的黏性末端進(jìn)行連的黏性末端進(jìn)行連接，而不是不同的黏性末端的任意連接。接，而不是不同的

19、黏性末端的任意連接。DNADNA連接酶作用的部連接酶作用的部位是磷酸二酯鍵，不是氫鍵。位是磷酸二酯鍵，不是氫鍵。答案：答案：C C 創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)4 4質(zhì)粒是基因工程的常用載體，下列關(guān)于它的說(shuō)法正確的質(zhì)粒是基因工程的常用載體，下列關(guān)于它的說(shuō)法正確的是是( () )A A具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的染色體，能夠攜帶目的基因具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的染色體，能夠攜帶目的基因B B含蛋白質(zhì)，從而能完成生命活動(dòng)含蛋白質(zhì)，從而能完成生命活動(dòng)C C是是RNARNA，能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成，能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成D D能夠自我復(fù)制，從而保持連續(xù)性能夠自我復(fù)制，從而保持連續(xù)性解析：質(zhì)粒存在于細(xì)菌和酵母菌等生物中，是一種很小

20、的環(huán)狀解析：質(zhì)粒存在于細(xì)菌和酵母菌等生物中，是一種很小的環(huán)狀DNADNA分子，不是染色體；其上有標(biāo)記基因，便于目的基因在受體分子，不是染色體；其上有標(biāo)記基因，便于目的基因在受體細(xì)胞中檢測(cè)。質(zhì)粒在受體細(xì)胞中自主復(fù)制，或隨受體細(xì)胞細(xì)胞中檢測(cè)。質(zhì)粒在受體細(xì)胞中自主復(fù)制，或隨受體細(xì)胞DNADNA復(fù)復(fù)制而復(fù)制，進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增和表達(dá)。制而復(fù)制，進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增和表達(dá)。答案：答案：D D 創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)5 5下列哪項(xiàng)不是基因工程中經(jīng)常使用的載體下列哪項(xiàng)不是基因工程中經(jīng)常使用的載體( () )A A細(xì)菌質(zhì)粒細(xì)菌質(zhì)粒 B B噬菌體噬菌體C C動(dòng)植物病毒動(dòng)植物病毒 D D細(xì)菌擬核細(xì)菌擬核DN

21、ADNA解析：載體能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存，并且具有解析：載體能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存，并且具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)及某些標(biāo)記基因?；蚬こ讨谐Ｓ玫妮d體有多個(gè)限制酶切點(diǎn)及某些標(biāo)記基因?；蚬こ讨谐Ｓ玫妮d體有質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒等。質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒等。答案：答案：D D 創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)6 6如圖為某基因工程中利用的質(zhì)粒簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限如圖為某基因工程中利用的質(zhì)粒簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限制酶制酶EcoR EcoR 、BamH BamH 的酶切位點(diǎn)，的酶切位點(diǎn)，ampRampR為青霉素為青霉素( (抗生素抗生素) )抗抗性基因，性基因，tetRtetR為

22、四環(huán)素為四環(huán)素( (抗生素抗生素) )抗性基因，抗性基因，P P為啟動(dòng)子，為啟動(dòng)子，T T為終為終止子，止子，oriori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoR EcoR 、BamH BamH 在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)(1)在基因工程中常用的工具有三種：一是用于切割在基因工程中常用的工具有三種：一是用于切割DNADNA分子的分子的_；二是將目的基因與載體拼接的；二是將目的基因與載體拼接的_；三是作為載體的質(zhì)粒。三是作為載體的質(zhì)粒。創(chuàng) 新 方 案 系 列 叢 書(shū)(2)(2)將含有目

23、的基因的將含有目的基因的DNADNA與經(jīng)特定的酶切后的載體與經(jīng)特定的酶切后的載體( (質(zhì)粒質(zhì)粒) )進(jìn)行進(jìn)行拼接形成重組拼接形成重組DNADNA，理論上講，重組，理論上講，重組DNADNA可能可能有有“_”“_”、“_”“_”、“_”“_”三種，其三種，其中有效的中有效的( (所需要的所需要的) )重組重組DNADNA是是_。因此需要對(duì)這。因此需要對(duì)這些拼接產(chǎn)物進(jìn)行分離提純。些拼接產(chǎn)物進(jìn)行分離提純。(3)(3)利用圖示的質(zhì)粒拼接形成的三種拼接產(chǎn)物利用圖示的質(zhì)粒拼接形成的三種拼接產(chǎn)物( (重組重組DNA)DNA)與無(wú)任與無(wú)任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長(zhǎng)何抗藥性的原核宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的拼接產(chǎn)物的原核宿主細(xì)胞所含有的拼接產(chǎn)物