片溶出試驗方法學驗證

1、×××片溶出度試驗方法學驗證1、 溶出度 依據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準新藥轉(zhuǎn)正標準第二十八冊×××片溶出度試驗方法、中國藥典2010年版二部溶出度測定法（附錄 C）的有關要求，并參照文獻進行本品的溶出度研究。（1）溶出介質(zhì)及介質(zhì)體積的選擇溶出介質(zhì)應根據(jù)制劑的特性選用水、0.010.1mol/L鹽酸溶液或適宜的緩沖液（pH值一般不超過7.6），應臨用新制并經(jīng)脫氣處理。對于極難溶出的品種，可加適量表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉（0.5以下），如確需使用有機溶劑，可加適量，如異丙醇、乙醇等（通常濃度在5以下），但應有依據(jù)，并盡量選用

2、低濃度。溶出介質(zhì)的體積一般應符合漏槽條件。×××在水中微溶，且本品為小規(guī)格品種（規(guī)格為2.5mg），根據(jù)以上溶出介質(zhì)選擇的原則及已有國家標準的方法，選擇已有國家標準中采用的溶出介質(zhì)及體積：0.1mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液（91000）200ml。 （2）溶出方法及其轉(zhuǎn)速的選擇方法的選擇一般可參照下列原則：對于非崩解型藥物，宜采用轉(zhuǎn)籃法。對于崩解型藥物，在進行轉(zhuǎn)籃法的整個試驗過程中，確保轉(zhuǎn)籃網(wǎng)孔的通透性尤為重要，對于處方中主藥或輔料（如膠性物質(zhì)）影響轉(zhuǎn)籃通透性的固體制劑，一般應采用槳法。制劑中含有難以溶解、擴散的成分，一般應采用槳法。對飄浮于液面的制劑，一般應選用轉(zhuǎn)

3、籃法。如輔料堵塞網(wǎng)孔則選用槳法，將供試品放入沉降籃中，并在正文中加以規(guī)定。采用小杯法時不能使用沉降籃。小杯法主要用于在轉(zhuǎn)籃法和槳法條件下，溶出液的濃度過稀，即使采用較靈敏的方法仍難以進行定量測定的品種。轉(zhuǎn)速選擇的原則：在質(zhì)量研究的基礎上，盡量選擇低轉(zhuǎn)速，轉(zhuǎn)籃法推薦100轉(zhuǎn)/分，最低不得低于50轉(zhuǎn)/分；槳法推薦50轉(zhuǎn)/分，最高不超過75轉(zhuǎn)/分；小杯法推薦35轉(zhuǎn)/分，最高不超過50轉(zhuǎn)/分。×××在水中微溶，且本品為小規(guī)格品種（規(guī)格為2.5mg），根據(jù)以上溶出方法選擇的原則、轉(zhuǎn)速選擇的原則及已有國家標準的方法，選擇已有國家標準中采用的溶出方法及轉(zhuǎn)速：小杯法，50轉(zhuǎn)每分鐘

4、。 （3）溶出量測定方法的驗證 線性關系考察與標準曲線的制備精密稱取×××對照品14.6mg，置50ml量瓶中，加甲醇2ml溶解后，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。分別量取該對照品貯備液1、2、4、6、8、10、12ml，置100ml量瓶，分別加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻。取上述各溶液，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄 A），在238nm波長處分別測定吸收光度。以×××對照品濃度（µg/ml）為橫坐標、吸光度（A）為縱坐標，繪制標準曲線，并對測得的數(shù)據(jù)進行回歸分析，

5、回歸方程為y=0.039x+0.0018，相關系數(shù)R2=0.9991，R=0.99955，結果表明，×××濃度在1.96230123.547612µg/ml范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關系，結果見表9。表9 ×××線性關系考察試驗數(shù)據(jù)濃度（µg/ml）X1.9623 3.9246 7.8492 11.7738 15.6984 19.6230 23.5476吸光度（Y） 0.078 0.157 0.309 0.471 0.595 0.768 0.929線性回歸方程y=0.039x+0.0018相關系數(shù)R=0.99955

6、精密度試驗避光操作。取本品（批號為20100904），照溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄 C第三法），以鹽酸溶液（91000）200ml為溶劑，轉(zhuǎn)數(shù)為每分鐘50轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時，取溶液適量，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。在同一溶出杯中，連續(xù)取樣6份，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄 A），在238nm波長處分別測定吸光度。6份樣品吸光度測定值的平均值為0.481，RSD為 0.95%。試驗數(shù)據(jù)見表10。表10 精密度試驗數(shù)據(jù)試驗號1 2 3 4 5 6吸光度（A） 0.479 0.485 0.476 0.478 0.488 0.480 平均值0.481R

7、SD（%）0.95干擾性試驗按本品處方1000片處方為：×××（以×××計）2.5g、預膠化淀粉g、微晶纖維素g、羧甲淀粉鈉g、硬脂酸鎂g、乙醇ml比例稱取除×××外的其余各輔料，照制備工藝項下的方法制備空白片。取空白片、樣品，照溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄 C第三法），以鹽酸溶液（91000）200ml為溶劑，轉(zhuǎn)數(shù)為每分鐘50轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時，取溶液適量，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取×××對照品17mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇2m

8、l溶解后，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取上述三種溶液，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄 A），在238nm波長處分別測定吸光度，計算溶出量。結果見表11。表11 專屬性試驗結果類別123456平均吸光度平均溶出量（%）相對于標示量的百分率（%）干擾樣品0.4860.4710.4820.4890.4690.4850.48095.5995.59空白片0.0070.0050.0070.0090.0080.0060.0071.391.39無干擾對照品0.4730.473由以上試

9、驗結果可知，本品輔料對溶出度測定的干擾小于2%，根據(jù)中國藥典2010年版的有關規(guī)定，可忽略不計，即本品輔料對溶出度的測定無干擾。穩(wěn)定性試驗取精密度試驗的溶出液適量，以30分鐘溶出液的吸光度為起點（0時），照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄 A），在238nm波長處于0、1、2、4、8、12小時分別測定吸光度。吸光度測定值的平均值為0.477，RSD為1.78%。試驗數(shù)據(jù)見表12。表12 穩(wěn)定性試驗數(shù)據(jù)時間（h）吸光度（A）吸光度平均值RSD（%）00.4860.4771.7810.48220.47940.48080.473120.462重復性試驗避光操作。取本品（批號為201

10、00904），每次6片，共測定6次，照溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄 C第三法），以鹽酸溶液（91000）200ml為溶劑，轉(zhuǎn)數(shù)為每分鐘50轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時，取溶液適量，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取×××對照品17mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇2ml溶解后，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取上述兩種溶液，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄 A），在238nm波長處分別測定吸光度，計算出每片的溶出量。6次測定

11、溶出量的平均值為95.56，RSD為0.73%。試驗數(shù)據(jù)見表13。表13 重復性試驗數(shù)據(jù)試驗號123456溶出量平均值溶出量平均值RSD195.3993.2092.6097.7894.7995.7994.9295.560.73296.7994.7997.9896.1995.3994.3995.92395.1996.3995.3993.7997.3896.5995.79495.7993.0091.2094.3996.9896.3994.62596.5995.3992.8096.7994.5997.3895.59695.5998.1897.7896.1995.1996.3996.55注：表中“列”

12、為片號，“行”為測定次數(shù)；數(shù)據(jù)的單位為“%”?；厥章试囼灳芊Q取×××對照品24.1mg，置100ml量瓶中，按處方比例加入其它各輔料，先用2ml甲醇溶解，再加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，精密量取5m，置25ml量瓶中，用鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取該溶液5、8、10ml，各3份，分別置25ml量瓶中，用鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻（分別為溶出50%、80%、100%時的紫外測定濃度），照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄 A），在238nm波長處分別測定吸光度。另取“重復性試驗”項下×

13、15;×對照品溶液，同法測定。計算，平均回收率為98.57%，RSD為1.02%。試驗數(shù)據(jù)如表14。表14 回收率試驗數(shù)據(jù)試驗號樣品吸光度對照品吸光度測得量（mg）×××對照品加入量（mg）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）10.2560.47415.897416.195798.1698.571.0220.2620.47416.270016.1957100.4630.2600.47416.145816.195799.6940.4070.47415.796516.195797.5450.4130.47416.029316.195798.9760.41

14、00.47415.912916.195798.2570.5080.47415.773216.195797.3980.5150.47415.990516.195798.7390.5110.47415.866316.195797.97（4）溶出度均一性試驗（批內(nèi)）避光操作。取本品6片（批號為20100904），照溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄 C第三法），以鹽酸溶液（91000）200ml為溶劑，轉(zhuǎn)數(shù)為每分鐘50轉(zhuǎn)，依法操作，在2、5、10、15、30、45、60分鐘時，取5ml（同時補加同體積同溫度的介質(zhì)），用0.45µm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取×

15、;××對照品17mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇2ml溶解后，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取上述兩種溶液，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄 A），在238nm波長處分別測定吸光度，計算出每片在不同時間的溶出量。試驗數(shù)據(jù)見表15。表15 溶出度均一性試驗數(shù)據(jù)批號片號2（分鐘）5（分鐘）10（分鐘）15（分鐘）30（分鐘）45（分鐘）60（分鐘）20100904141.2573.5791.6297.9695.9897.7696.57239.66

16、71.9890.2396.5796.7795.1897.17342.4474.3694.7998.1696.1894.7995.38441.6472.3893.2096.3798.1696.3794.59540.2670.7989.4398.3698.5796.5796.18640.6573.1792.8097.9697.3696.9795.58平均40.9872.7192.0197.5697.1796.2795.91RSD2.441.742.160.881.081.160.96注：上表中數(shù)據(jù)的單位為“%”結果表明，自制品制劑中×××的溶出度均一性較好。（5）重現(xiàn)

17、性試驗（批間）取本品3個批號樣品（批號為20100904、20100905、20100906），按上述“溶出度均一性試驗（批內(nèi)）”的方法進行試驗，試驗結果見表16。表16 重現(xiàn)性試驗數(shù)據(jù)批號片號2（分鐘）5（分鐘）10（分鐘）15（分鐘）30（分鐘）45（分鐘）60（分鐘）20100904140.7475.1293.6097.1796.7896.3895.38243.1274.9290.8196.5896.5897.9796.58340.3476.3191.6196.5896.7895.9896.18442.5273.1394.9997.7796.3895.5895.78542.5273.72

18、93.2096.9897.1795.7896.38641.7374.1292.6096.1895.1896.7894.59平均41.8374.5592.8096.8896.4896.4195.8220100905139.5871.6391.6296.9696.3795.7895.18237.6073.8191.8297.5695.7895.1894.19339.9770.2590.4395.7895.1896.3793.80438.9869.2688.8595.7897.5695.1893.00538.3968.6693.6097.5696.3795.7895.78639.7870.2591.

19、2297.3695.7896.3794.39平均39.0570.6491.2696.8396.1795.7894.3920100906140.6273.4890.2194.7995.7894.9994.59241.2272.8888.6295.7894.7994.5994.19340.6273.6888.0296.3893.7995.3993.60441.0274.4891.0095.5895.1994.3993.40540.0371.2990.8194.3996.1893.7995.19638.0472.4988.8294.9995.7894.7992.80平均40.2673.0589.58

20、95.3295.2594.6693.963批樣品平均40.3872.7591.2196.3495.9795.6294.72RSD3.452.711.770.920.670.931.03注：上表中數(shù)據(jù)的單位為“%”結果表明，自制品制劑中×××的溶出度重現(xiàn)性較好。（6）濾膜吸附的驗證按上述“重復性試驗”的方法進行試驗，取樣后一份不過濾，直接采用高速離心，取上清液測定；另一份采用過濾法，取所得的續(xù)濾液測定，考察兩者間測定數(shù)據(jù)的差異。試驗結果見表17。表17 濾膜吸附驗證試驗數(shù)據(jù)方法吸光度相對平均偏差（%）離心法0.4530.55過濾法0.448由試驗結果可知，溶出液采用離心法與過濾法無顯著差異，故用0.45µm微孔濾膜過濾對測定結果無影響。（7）溶出度測定取自制3批樣品（批號為20100904、20100905、20100906）及1批參比制劑（批號為100107）進行溶出度測定。按中國藥典2010