專題五生化藥品概論

1、第九章 生化藥品(yopn)概述共三十頁概 述生化藥物：從生物體分離、純化所得的一類結(jié)構(gòu)上十分接近于人體內(nèi)的正常生理活性物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)人體生理功能(gngnng)，達(dá)到預(yù)防和治療疾病目的的物質(zhì)。特點(diǎn)(tdin)來源于生物體人體的基本生化成分共三十頁一、生化(shn hu)藥品的分類 藥物的化學(xué)本質(zhì) 和化學(xué)特性分類核酸及其降解物和衍生物類藥物酶類藥物多肽和蛋白質(zhì)類藥物氨基酸及其衍生物類藥物糖類藥物脂類藥物共三十頁二、生化藥物(yow)的特點(diǎn)11、原材料復(fù)雜(fz)同一種生化物質(zhì)的原料可來源于不同生物體同一種物質(zhì)也可由同種生物體不同部位產(chǎn)生同一種生物體或組織可產(chǎn)生結(jié)構(gòu)完全不同的物質(zhì)及結(jié)構(gòu)相似物質(zhì)2

2、3胰島素：豬、牛、人；菘藍(lán)：板藍(lán)根、大青葉；微生物：抗生素、蛋白質(zhì)、酶等；共三十頁2、種類(zhngli)多、含量低3、種屬特性(txng) 紅豆杉紫杉醇含量0.003%約從 38 000棵樹中方可分離提純得到 99純度的紫杉醇約 25kg豬胰島素牛胰島素活性低高抗原性低高與人胰島素結(jié)構(gòu)相似性大小共三十頁4、活性與空間(kngjin)構(gòu)象有關(guān)5、制備(zhbi)要求高高營養(yǎng)、低含量、特殊生物活性等決定共三十頁三、傳統(tǒng)生化(shn hu)制藥的一般工藝過程生物材料(cilio)的選取與預(yù)處理提取有活性部分有效成分的分離與純化制劑1、材料的選擇與保存原則：選擇富含所需目的物、易于獲得、提取的 無害

3、生物材料共三十頁1、材料(cilio)的選擇與保存一、材料(cilio)的選擇1、來源：來源豐富、盡量不與其他產(chǎn)品爭原料、 最好能一物多用，綜合利用。2、雜質(zhì)：難于分離的雜質(zhì)會(huì)增加工藝的復(fù)雜性 嚴(yán)重影響收率、質(zhì)量和經(jīng)濟(jì)效益 。SOD植物血液共三十頁一、材料(cilio)的選擇3、有效成分的含量(hnling)（1）合適的生物品種：催乳素，哺乳動(dòng)物 （2）合適的組織器官 ： （胃蛋白酶，胃）（3）生物的生長期：胸腺素，幼齡動(dòng)物（4）合適的種屬：人，豬（5）合適的生理狀態(tài)：胰島素，飯后共三十頁二、材料(cilio)的采集與保存 生理活性物質(zhì)易失活與降解，采集時(shí)必須(bx)保持材料的新鮮、防止腐敗、

4、變質(zhì)與微生物污染。采摘必須新鮮、快速、及時(shí)速凍、低溫保存速凍、凍干、有機(jī)溶劑脫水等1、天然生物材料的保存共三十頁2、動(dòng)物細(xì)胞的保存方法(fngf)及影響保存質(zhì)量的因素保存方法組織塊保存法細(xì)胞懸液保存法單層細(xì)胞保存法低溫冷凍保存影響保存質(zhì)量(zhling)的因素：a、凍存速度：緩慢降溫、加速融化b、保護(hù)劑：甘油/二甲亞砜c、凍結(jié)方法：收集細(xì)胞+保護(hù)劑+低溫d、細(xì)胞復(fù)蘇：融化+培養(yǎng)液共三十頁2、生物(shngw)材料的預(yù)處理一、組織與細(xì)胞(xbo)的破碎物理法化學(xué)法生物法磨切法壓力法震蕩法凍融法組織自溶法酶解法噬菌體法滲透壓法高壓法減壓法共三十頁二、細(xì)胞器的分離(fnl) 為獲得結(jié)合在細(xì)胞器上的一

5、些(yxi)生化成分或酶系，常常要先得到細(xì)胞器再進(jìn)一步分離有效成分。方法：勻漿破碎細(xì)胞，離心分離（差速/密度梯度）共三十頁3、生物(shngw)活性物質(zhì)的提取 提取是利用制備目的物的溶解特性，將目的物與細(xì)胞的固形物成分或其它結(jié)合成分分離，使其由固相轉(zhuǎn)入(zhun r)液相或從細(xì)胞生理狀態(tài)轉(zhuǎn)入特定溶液環(huán)境的過程。浸漬法：用冷溶劑溶出固體材料中的物質(zhì)浸煮法：用熱溶劑溶出目的物共三十頁一、提取方法(fngf)的選擇目的物與雜質(zhì)在溶解度與穩(wěn)定性方面(fngmin)的差異選擇合適的溶劑系統(tǒng)與提取條件除去與目的產(chǎn)物性質(zhì)差異較大的雜質(zhì)、濃縮目的物注意事項(xiàng)：酶類 輔酶丟失和其他失活因素 蛋白質(zhì)類 高級(jí)結(jié)構(gòu)的破

6、壞 多肽及核酸類 酶水解、抑制劑 脂類 氧化共三十頁二、生物(shngw)活性的保護(hù)措施采用緩沖系統(tǒng)：防止(fngzh)pH變化帶來失活、提取效率下降 磷酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液等添加保護(hù)劑：保護(hù)酶活性中心及某些活性基團(tuán) 還原劑、金屬螯合劑、適量底物等抑制水解酶的作用：ETDA、熱變性、pH值、抑制劑其他保護(hù)措施：根據(jù)目的物不同性質(zhì)具體對(duì)待 溫度、紫外線、強(qiáng)酸堿、氧化劑等共三十頁三、影響(yngxing)提取的因素1、溫度(wnd)提取溫度 溶解度 溫度 物料的粘度，有利于分子擴(kuò)散和機(jī)械攪拌 對(duì)不耐熱的生物活性物質(zhì)的提取，一般在010有機(jī)溶劑提取一般在較低溫度下進(jìn)行2、酸堿度：抑制有害酶類的

7、水解破壞作用，防止降 解，提高收率中性：避免過酸或過堿及等電點(diǎn)，pH49酸性：偏酸性介質(zhì)（胰島素等），破壞細(xì)胞堿性：堿性系統(tǒng)提?。ǘ嗵穷惖龋┕踩?、鹽濃度鹽溶作用：鹽離子作用于生物大分子表面，增加(zngji)了表面電荷，使之極性增加，水合作用增強(qiáng)，促使其形成穩(wěn)定的雙電層，此現(xiàn)象為鹽溶作用。與濃度和離子強(qiáng)度有關(guān)(yugun)，高價(jià)酸鹽作用單價(jià)酸鹽共三十頁四、常用的提取(tq)方法提取(tq)方法用酸、堿、鹽水溶液提取用表面活性劑提取用有機(jī)溶劑提取離子型非離子型在適當(dāng)?shù)膒H和低離子強(qiáng)度條件下，與脂蛋白形成微泡，使膜滲透性改變或使之溶解固液提取液液提取相似相溶原理溶解度差異分配系數(shù)與溶劑的用量

8、雙水相萃取法超臨界流體萃取法共三十頁Xn = X0 KmKm + Vn(1) 分配系數(shù)(xsh)，殘留物質(zhì)(2) 溶劑(rngj) ，殘留量(3) 提取次數(shù) ，殘留量 殘留量計(jì)算公式提取次數(shù) 生產(chǎn)設(shè)備負(fù)擔(dān) 能耗 周期 勞動(dòng)生產(chǎn)率 產(chǎn)品失活生產(chǎn)上一般提取23次，溶劑為25倍材料共三十頁4、生物活性物質(zhì)的濃縮(nn su)與干燥鹽析濃縮：添加(tin ji)中性鹽使Pr沉淀，(NH4)2SO4有機(jī)溶劑沉淀濃縮：易于回收、不必除鹽、低溫葡聚糖凝膠濃縮：葡聚糖凝膠吸收膨脹聚乙二醇濃縮：透析、吸水、效率高超濾濃縮：根據(jù)分子量不同而截留真空減壓濃縮與薄膜濃縮：溫度低、 速度快一、濃縮共三十頁共三十頁二、干

9、燥(gnzo) 干燥：使物質(zhì)(wzh)從固體或半固體狀經(jīng)出去存在的水分或其他溶劑，從而獲得干燥物品的過程。干燥的目的： 提高藥物或藥劑的穩(wěn)定性，以利于保存和運(yùn)輸 達(dá)到規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)； 便于進(jìn)一步處理。干燥方法：減壓干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等。共三十頁共三十頁 膜分離技術(shù)(jsh)分離范圍分離動(dòng)力一般過濾1m壓力差微孔過濾0.01 1 m壓力差透析5100分子擴(kuò)散超級(jí)過濾5100壓力差反滲透5壓力差電滲析5電能應(yīng)用：海水脫鹽淡化； 醫(yī)藥工業(yè)的純化水、注射用水 生物大分子物質(zhì)的濃縮與純化 人工腎透析；過濾(gul)除菌（溶液、空氣）共三十頁VC大分子小分子 它是將樣品化合物通過一定孔徑的凝膠固定(gdn

10、g)相用于流經(jīng)體積的差異，使不同分子量的組成得以分離的層析。凝膠層析(cn x)共三十頁親和層析LSLS配基樣品1)配基固定化 選擇(xunz)合適的配基與不溶性的支撐載體偶聯(lián)，或共價(jià)結(jié)合成具有特異性親和性分離介質(zhì)。LL共三十頁2)吸附樣品 親和層析介質(zhì)選擇性吸附酶或其它生物活性物質(zhì)雜質(zhì)與層析間沒有親和作用(zuyng)，故不能被吸附而被洗滌去除。3)樣品洗脫 選擇適宜(shy)的條件使被吸附的親和介質(zhì)上的酶或其它生物活性物質(zhì)洗脫。 S S雜質(zhì)LL SL SL共三十頁共三十頁內(nèi)容摘要第九章 生化藥品概述。第九章 生化藥品概述。同一種生物體或組織可產(chǎn)生結(jié)構(gòu)完全不同的物質(zhì)及結(jié)構(gòu)相似物質(zhì)。約從 38 000棵樹中方可分離提純得。到 99純度的紫杉醇約 25kg。（2）合適的組織器官 ： （胃蛋白酶，胃）。c、凍結(jié)方法：收集細(xì)胞+保護(hù)劑+低溫。注意事項(xiàng)：酶類 輔酶丟失和其他