壬基酚對(duì)家兔丙二醛及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的影響

1、壬基酚對(duì)家兔丙二醛及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的影響壬基酚對(duì)家兔丙二醛及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的影響摘要：本試驗(yàn)以被喂養(yǎng)壬基酚的不同月齡家兔作為試驗(yàn)材料，通過(guò)家兔不同器官中丙二醛及其谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量的測(cè)定，來(lái)分析壬基酚對(duì)于家兔的影響。結(jié)果表明：家兔血漿、肌肉、肝和腎中丙二醛和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量發(fā)生了不同程度的改變，壬基酚可影響機(jī)體的抗氧化防御系統(tǒng)。關(guān)鍵詞：壬基酚；家兔；丙二醛；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶Influence Of Nonylphenol On Malondialdehyde And Glutathione Peroxidase Of The Rabbit Abstract： This st

2、udy was mainly aimed to evaluate the effect of nonylphenol to the malondialdehyde (MDA) and glutathione peroxidase (GPX) of the Rabbit. One-，three - and fivemonth-old rabbits were randomly divided into control group which was administered by water without any chlorine and experiment group which was

3、administered by 0.5mg/L nonylphenol solution. There were six rabbits in every group. After 21 days, the rabbits were killed for the sampling of plasma, liver, muscle and kidney. The results showed that the concentration of MDA and the activity of GPX were changed, and therefore nonylphenol can alter

4、 lipid peroxidation and the antioxidant defense system.Key words：Nonylphenol; Rabbit; Malondialdehyde; Glutathione peroxidase目 錄前言11.材料與方法21.1 動(dòng)物材料21.2試驗(yàn)方法22結(jié)果與分析32.1壬基酚對(duì)不同月齡家兔MDA的影響結(jié)果52.2壬基酚對(duì)不同月齡家兔GPX的影響結(jié)果53討論53.1壬基酚對(duì)不同月齡家兔MDA的影響53.2壬基酚對(duì)不同月齡家兔GPX的影響6參考文獻(xiàn)7致謝10前言壬基酚（Nonylphenol，NP）是一種新近認(rèn)識(shí)的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，被廣

5、泛的應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中，例如清潔劑、油漆、殺蟲(chóng)劑的生產(chǎn)，還可作為工業(yè)生產(chǎn)中的抗氧化劑以及一些個(gè)人護(hù)理用品的乳化劑，少量壬基酚被應(yīng)用于食品包裝方面透明塑料膜的制造。壬基酚的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難降解，研究證實(shí)壬基酚在60的有氧環(huán)境中可以經(jīng)微生物降解，但在無(wú)氧情況下壬基酚仍難于降解1。由于壬基酚的脂溶性和難降解的特點(diǎn)，水生生物可作為其富集的貯存庫(kù)2。一方面通過(guò)水體的傳遞積累于生物體內(nèi)，另一方面通過(guò)食物鏈的傳遞而發(fā)生放大作用3。壬基酚在河水、水生附著生物和底棲生物之間的生物積累與放大倍數(shù)在18-1200倍之間。而底棲生物的相對(duì)最大積累率可達(dá)106倍，環(huán)境激素通過(guò)食物鏈的生物放大作用比通過(guò)水體的傳遞對(duì)魚(yú)類(lèi)等水

6、生生物的危害更大4。如大西洋鮭（Salmo salar）可以通過(guò)洄游將環(huán)境雌激素轉(zhuǎn)移到阿拉斯加淡水湖泊，從而使環(huán)境雌激素濃度高出其他湖泊2倍5-6。在生態(tài)系統(tǒng)中，這類(lèi)物質(zhì)通過(guò)生物濃縮、生物積累和生物放大等途徑增大濃度，實(shí)現(xiàn)對(duì)生物和人類(lèi)的更大危害。壬基酚可對(duì)生物體產(chǎn)生廣泛的不良作用。近幾年來(lái)通過(guò)體內(nèi)外試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，壬基酚對(duì)嚙齒類(lèi)動(dòng)物的多種器官、系統(tǒng)存在毒性作用，其中對(duì)于生殖系統(tǒng)的研究比較透徹。當(dāng)壬基酚劑量為250mg/（kg·d）時(shí)，經(jīng)口給予嚙齒類(lèi)動(dòng)物時(shí)可引起明顯的睪丸損害，壬基酚能降低雄性大鼠生殖系統(tǒng)附睪的重量，導(dǎo)致精子密度和睪酮水平降低與促黃體素、促卵泡素水平的增加，并且精巢中細(xì)胞

7、凋亡的數(shù)目隨著壬基酚濃度的增加而增加7。壬基酚可以通過(guò)模仿或是調(diào)節(jié)內(nèi)源性激素系統(tǒng)影響正常的腦功能。Obata等研究發(fā)現(xiàn)壬基酚可以通過(guò)雌激素受體的作用，誘導(dǎo)大鼠紋狀體內(nèi)羥自由基（·OH）的形成8。在體試驗(yàn)進(jìn)一步證明了壬基酚對(duì)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能有一定干擾作用。通過(guò)對(duì)卵巢切除大鼠皮下注射劑量為50 mg/（kg·d）的壬基酚發(fā)現(xiàn)，壬基酚能夠通過(guò)影響孕激素受體系統(tǒng)改變皮質(zhì)功能9，也能夠通過(guò)影響腺垂體水平，抑制卵巢切除大鼠促黃體素的分泌10。在免疫系統(tǒng)中，體內(nèi)和體外細(xì)胞試驗(yàn)都證明壬基酚能通過(guò)改變胸腺細(xì)胞Fas和FasL的表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)影響免疫功能11、12。壬基酚還可通過(guò)激

8、活caspase-3以及線粒體去極化誘導(dǎo)胸腺細(xì)胞的凋亡13。除了對(duì)生殖系統(tǒng)以及免疫系統(tǒng)的毒性研究以外，壬基酚還被發(fā)現(xiàn)可以作為細(xì)胞轉(zhuǎn)化的助劑，導(dǎo)致體內(nèi)癌癥的發(fā)生14，誘導(dǎo)成熟大鼠急性肝毒性作用15。丙二醛（Malondialdehyde，MDA）是脂質(zhì)過(guò)氧化的最終分解產(chǎn)物之一,其含量變化可在分子水平上指示生物體的氧化損傷程度16 。因此通過(guò)檢測(cè)機(jī)體內(nèi)MDA含量變化，可以直接反映出機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，而且能間接的反映出機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊損傷的程度17。生物體抗氧化酶防御系統(tǒng)主要包括超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、過(guò)氧化氫酶（Catalase，CAT）、谷胱

9、甘肽過(guò)氧化物酶（Glutathione Peroxidase, GPX）等，其主要功能是清除活性氧自由基18-21。谷胱甘肽過(guò)氧化氫酶（GPX）是生物機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶之一，它可以消除機(jī)體內(nèi)的過(guò)氧化氫及脂質(zhì)過(guò)氧化物，阻斷活性氧自由基對(duì)機(jī)體的進(jìn)一步損傷，是生物體內(nèi)重要的活性氧自由基清除劑 22。在機(jī)體清除自由基的過(guò)程中，抗氧化酶起著重要的作用。GPX能催化H2O2 和脂質(zhì)過(guò)氧化物還原，防止脂質(zhì)過(guò)氧化物對(duì)機(jī)體生物膜和組織的損傷，并防止脂質(zhì)過(guò)氧化物進(jìn)一步水解為有害物質(zhì)MDA。因此MDA和GPX的含量變化可在分子水平上指示生物體的氧化損傷程度23，24 。毒理學(xué)研究表明生物體GSH 和MDA 含量變

10、化對(duì)化學(xué)物質(zhì)反應(yīng)靈敏，且測(cè)定簡(jiǎn)便、不易受分析條件影響，常作為化學(xué)物質(zhì)生態(tài)毒性的評(píng)價(jià)指標(biāo)25，26。王志成27等人發(fā)現(xiàn)氟中毒會(huì)使體內(nèi)起抗氧化作用的SOD、GPX等酶的生物活性受抑制，使自由基在體內(nèi)大量蓄積而致脂質(zhì)過(guò)氧化作用增強(qiáng)。眾多試驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)氟可對(duì)動(dòng)物多種組織產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化損傷28-34。目前有關(guān)壬基酚的研究主要集中在對(duì)于內(nèi)分泌、生殖和發(fā)育、促癌作用、免疫影響等方面，而關(guān)于壬基酚對(duì)動(dòng)物機(jī)體理化的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。因此本試驗(yàn)以家兔為試材，檢測(cè)喂養(yǎng)了壬基酚的家兔體內(nèi)MDA及GPX含量的變化，為進(jìn)一步深入研究壬基酚對(duì)動(dòng)物機(jī)體影響的研究提供參考依據(jù)。1材料與方法1.1 動(dòng)物材料 試驗(yàn)所用健康成年家兔均

11、購(gòu)于大慶春蕾飼養(yǎng)場(chǎng)，用長(zhǎng)春希望兔飼料喂養(yǎng)。1.2 試驗(yàn)方法動(dòng)物材料的處理健康家兔36只，1月齡、3月齡和5月齡各12只。飼養(yǎng)室預(yù)飼養(yǎng)一周后隨機(jī)分成對(duì)照組和處理組，每組6只。對(duì)照組喂養(yǎng)除氯自來(lái)水，處理組喂養(yǎng)0.5mg/L壬基酚溶液，喂養(yǎng)21天。動(dòng)物采樣和樣品制備速眠新麻醉家兔：家兔肌肉注射速眠新，注射后5-10分鐘麻醉。如果第一次給藥量不足，可再加大給藥劑量，使其麻醉。心臟取血：將兔仰臥固定在手術(shù)臺(tái)上，將心臟部位被毛剪去，用碘酒酒精消毒皮膚，選擇心搏最明顯處穿刺，針頭刺入心臟后即有血液涌入注射器中。取得所需血量后，迅速將針頭拔出，將血液轉(zhuǎn)入肝素處理的離心管中。組織采樣：注射過(guò)量麻醉劑處死家兔，再

12、解剖取出肝、肌肉和腎。血液樣品制備：將取出的血液3000r/min離心10min，取血漿，裝入離心管中液氮速凍后置于-70冰箱保存，以待用于生化指標(biāo)的測(cè)定。組織塊樣品制備及處理：將取出的組織塊剪碎混勻后裝入離心管中，經(jīng)液氮速凍后置于-70冰箱保存，以待用于生化指標(biāo)的測(cè)定。測(cè)定前，取出組織塊，稱(chēng)取肌肉、肝、腎分別為1g、0.5g、1g，將其置于研缽中研磨后用于冷的0.9%生理鹽水稀釋勻漿，制成的組織勻漿濃度分別為10%、20%、20%。將組織勻漿3000r/min離心10min取上清，用于生化指標(biāo)的測(cè)定。丙二醛含量的測(cè)定參照測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)提供的方法，制備標(biāo)準(zhǔn)管，標(biāo)準(zhǔn)空白管及測(cè)定管。將其混勻之后，9

13、5水浴40min，取出后用流水冷卻，然后4000轉(zhuǎn)/分，離心10min，取上清，532nm處，1cm光徑比色杯，蒸餾水調(diào)零，測(cè)各管OD值。1.2.4谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的測(cè)定參照測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)提供的方法將對(duì)照管與測(cè)定管進(jìn)行酶促反應(yīng)。混勻后，37水浴，預(yù)溫5min，分別加入37預(yù)溫的試劑一100L。然后37水浴準(zhǔn)確反應(yīng)5min后分別再加入試劑二2000L，對(duì)照管再加200L的試劑盒樣品。混勻后，4000轉(zhuǎn)/分，離心10min，取上清1ml做顯色反應(yīng)。之后進(jìn)行混勻，室溫靜置15min后，412nm處，1cm光徑比色杯，蒸餾水調(diào)零，測(cè)各管OD值。計(jì)算公式（1）MDA含量活力的計(jì)算：組織MDA含量（nmo

14、l/ mgprot）=（測(cè)定管OD值-標(biāo)準(zhǔn)空白管OD值）/（標(biāo)準(zhǔn)管OD值-標(biāo)準(zhǔn)空白管OD值）×標(biāo)準(zhǔn)品濃度（10nmol/mL）÷蛋白含量（mgprot/ml）血漿MDA含量（nmol/ mgprot）=（測(cè)定管OD值-標(biāo)準(zhǔn)空白管OD值）/（標(biāo)準(zhǔn)管OD值-標(biāo)準(zhǔn)空白管OD值）×標(biāo)準(zhǔn)品濃度（10nmol/mL）×樣品測(cè)試前稀釋倍數(shù)（2）GPX活力的計(jì)算：組織GPX酶活力=（非酶管OD值-酶管OD值）/（標(biāo)準(zhǔn)管OD值-空白管OD值）×標(biāo)準(zhǔn)管濃度（20umol/L）×稀釋倍數(shù)（5*）÷反應(yīng)時(shí)間÷（取樣量×樣本蛋白含

15、量）血漿GPX活力=（非酶管OD值-酶管OD值）/（標(biāo)準(zhǔn)管OD值-空白管OD值）×標(biāo)準(zhǔn)管濃度（20umol/L）×稀釋倍數(shù)（5*）×樣本測(cè)試前稀釋倍數(shù)1.2.6 數(shù)據(jù)處理所得數(shù)據(jù)用SAS V8.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行處理分析，壬基酚處理對(duì)各組的影響使用一般線性模型的雙因素方差分析，而多重比較使用鄧肯氏法（Duncans）。2結(jié)果與分析2.1壬基酚對(duì)不同月齡家兔MDA的影響結(jié)果如表1-4所示，雙因素方差分析表明，壬基酚的處理對(duì)血漿、肌肉、肝和腎中MDA含量的變化沒(méi)有顯著作用（P血漿=0.121，P肌肉=0.544，P肝=0.541，P腎=0.274），但是月齡卻有顯著作

16、用（P血漿=0.001，P肌肉=0.009，P肝=0.000，P腎=0.000）。三月齡家兔的血漿MDA含量明顯高于一月齡和五月齡。肌肉中MDA隨年齡增長(zhǎng)含量升高。一月齡家兔的肝中MDA含量明顯高于三月齡和五月齡。腎中MDA則隨月齡增長(zhǎng)含量升高。表1壬基酚對(duì)家兔血漿中MDA含量的影響（單位：nmol/ ml）一月齡三月齡五月齡平均值對(duì)照組67.21±35.92145.42±14.8695.17±27.59102.60a試驗(yàn)組103.41±31.77170.62±37.19125.11±21.46133.05a注：同一行列肩標(biāo)小寫(xiě)字母不

17、同者表示差異顯著（P0.05），相同或無(wú)表示差異不顯著（P0.05）以下各表同上表2壬基酚對(duì)家兔肌肉中MDA含量的影響（單位：nmol/ ml）一月齡三月齡五月齡平均值對(duì)照組85.02±24.60106.54±4.06159.32±52.37116.96a試驗(yàn)組84.49±30.22133.22±25.20168.89±16.64128.87a表3壬基酚對(duì)家兔肝中MDA含量的影響（單位：nmol/ ml）一月齡三月齡五月齡平均值對(duì)照組32.26±9.3412.69±1.1211.10±1.6418.68a

18、試驗(yàn)組24.43±1.2414.32±1.3413.87±3.4017.54a表4壬基酚對(duì)家兔腎中MDA含量的影響（單位：nmol/ ml）一月齡三月齡五月齡平均值對(duì)照組3.30±0.324.75±0.539.27±0.595.77a試驗(yàn)組3.650±0.364.91±0.2310.09±1.136.22a2.2壬基酚對(duì)不同月齡家兔GPX的影響結(jié)果如表5-8所示，雙因素方差分析結(jié)果表明，壬基酚的處理對(duì)血漿、肌肉和腎中GPX含量的變化沒(méi)有顯著作用（P血漿=0.554，P肌肉=0.776， P腎=0.942）

19、，對(duì)肝中GPX含量的變化有顯著作用（P肝=0.002），但是月齡卻有顯著作用（P血漿=0.006，P肌肉=0.000，P肝=0.000，P腎=0.000）。五月齡家兔的血漿GPX含量明顯高于一月齡和三月齡。三月齡家兔的肌肉中GPX含量明顯高于一月齡和五月齡。五月齡家兔的肝中GPX含量明顯高于一月齡和三月齡。腎中GPX的含量隨月齡的增長(zhǎng)而降低。表5壬基酚對(duì)家兔血漿中GPX含量的影響一月齡三月齡五月齡平均值對(duì)照組11.50±3.9715.63±1.0921.88±2.9516.34a試驗(yàn)組15.71±3.2216.72±2.4419.63±

20、;2.2517.35a表6壬基酚對(duì)家兔肌肉中GPX含量的影響一月齡三月齡五月齡平均值對(duì)照組1285.75±234.552630.04±192.371879.16±250.661931.6a試驗(yàn)組1468.41±169.932429.44±123.522001.03±169.041966.3a表7壬基酚對(duì)家兔肝中GPX含量的影響一月齡三月齡五月齡平均值對(duì)照組228.37±28.96230.76±13.68398.86±25.53286.00a試驗(yàn)組206.39±11.27226.80±9

21、.76317.71±14.34250.30b表8壬基酚對(duì)家兔腎中GPX含量的影響一月齡三月齡五月齡平均值對(duì)照組127.95±2.52104.77±6.8692.753±5.01108.49a試驗(yàn)組132.18±5.35106.48±12.0587.909±4.31108.86a3討論3.1壬基酚對(duì)不同月齡家兔MDA的影響正常情況下，機(jī)體活性氧自由基由細(xì)胞新陳代謝不斷產(chǎn)生，不斷清除，兩者處于平衡狀態(tài)。當(dāng)活性氧自由基的產(chǎn)生超過(guò)機(jī)體防御體系的清除能力或機(jī)體的防御體系受損而不能發(fā)揮正常功能時(shí)，自由基會(huì)對(duì)細(xì)胞形成氧化損傷?；钚匝踝杂苫?/p>

22、對(duì)機(jī)體造成的重大損害之一是其代謝產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化。機(jī)體內(nèi)存在著大量的不飽和脂肪酸，極易受到過(guò)氧化作用的損傷。脂質(zhì)過(guò)氧化的損傷途徑為:氧自由基+細(xì)胞膜脂質(zhì)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)過(guò)氧化脂質(zhì)丙二醛+細(xì)胞成分脂褐質(zhì)。MDA 是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)鏈?zhǔn)浇K止階段產(chǎn)生的小分子產(chǎn)物，是目前公認(rèn)能反映氧自由基產(chǎn)生及引發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的間接指標(biāo)，其含量可以間接反映自由基的產(chǎn)生情況和機(jī)體組織細(xì)胞的脂質(zhì)過(guò)氧化程度35。而且，脂類(lèi)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA能與膜上的蛋白質(zhì)氨基酸殘基或核酸反應(yīng)生成Shiff堿，增大膜的透性，促進(jìn)膜的滲漏，降低膜的穩(wěn)定性，從而使各種細(xì)胞器膜的結(jié)構(gòu)與功能發(fā)生紊亂，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致細(xì)胞死亡36，因此可反映其對(duì)組織損傷的嚴(yán)

23、重程度，也是目前反映機(jī)體氧化損傷最具代表性的指標(biāo)。肝臟在機(jī)體內(nèi)具有特殊的解剖位置、組織結(jié)構(gòu)與生理生化特征，是最易作為外來(lái)化學(xué)物的毒作用靶器官。肝臟是一個(gè)被血液充盈的器官，與血液循環(huán)系統(tǒng)密切相連，由于肝臟存在門(mén)靜脈與肝動(dòng)脈兩套入肝血管，分別接受來(lái)自胃腸道靜脈血液與體循環(huán)的動(dòng)脈血液，化學(xué)物質(zhì)無(wú)論從何種途徑進(jìn)入機(jī)體，最終均可通過(guò)血液循環(huán)迅速達(dá)到肝臟，尤其從消化道吸收的化學(xué)毒物，在進(jìn)入血循環(huán)前毒物首先與肝臟接觸。因此，當(dāng)機(jī)體接觸外源性毒物時(shí)，肝臟比其他器官更常發(fā)生毒性反應(yīng)。因而長(zhǎng)期的壬基酚的處理刺激，血細(xì)胞產(chǎn)生的活性氧將升高，大量活性氧的積累可能進(jìn)而導(dǎo)致了細(xì)胞的氧化損傷，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用，并因此形成

24、脂質(zhì)過(guò)氧化物37。因此肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化作用增強(qiáng)，抗氧化能力下降，造成了肝臟氧化與抗氧化防御機(jī)制之間的失衡，使機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，從而誘發(fā)肝臟的氧化損傷，因此家兔肝臟中MDA的含量應(yīng)該有顯著降低。然而，本試驗(yàn)肝臟中MDA的含量對(duì)照與處理后的試驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有明顯差異，且處理后家兔MDA含量有所降低，表明壬基酚對(duì)其沒(méi)有產(chǎn)生顯著作用。大量動(dòng)物試驗(yàn)研究提示，大鼠血漿內(nèi)的SOD隨年齡明顯降低，而MDA顯著升高38 。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同月齡家兔血漿肌肉和腎中MDA含量總趨勢(shì)隨年齡增加，這一檢測(cè)結(jié)果與其它文獻(xiàn)報(bào)道的MDA隨年齡而增加相一致，從而表明壬基酚并沒(méi)有對(duì)其產(chǎn)生嚴(yán)重的影響。但是也可能由于本試驗(yàn)中壬基酚處理的

25、時(shí)間過(guò)短，或者濃度不夠大，對(duì)機(jī)體生理系統(tǒng)基本無(wú)影響，沒(méi)有造成生物體的氧化損傷程度。對(duì)于個(gè)別年齡段的MDA含量有較大差別，顯著增高，可能由于此年齡段家兔生長(zhǎng)太快所致。3.2壬基酚對(duì)不同月齡家兔GPX的影響GPX 是生物體內(nèi)廣泛存在的一種重要的清除H2O2 和許多有機(jī)氫過(guò)氧化物的酶。它能催化H2O2 和脂質(zhì)過(guò)氧化物還原，防止脂質(zhì)過(guò)氧化物對(duì)機(jī)體生物膜和組織的損傷，并防止脂質(zhì)過(guò)氧化物進(jìn)一步水解為有害物質(zhì)MDA。大量動(dòng)物試驗(yàn)研究提示，大鼠血漿和肝內(nèi)的GPX隨年齡明顯降低。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同月齡家兔血漿、肌肉和肝中GPX含量總趨勢(shì)隨月齡增加，腎中的GPX含量則隨年齡而降低，這一檢測(cè)結(jié)果與其它文獻(xiàn)報(bào)道的血漿

26、和肝內(nèi)GPX隨年齡而降低不一致，可能由于本試驗(yàn)家兔年齡偏小，快速生長(zhǎng)刺激了機(jī)體內(nèi)GPX的產(chǎn)生，影響GPX含量。然而，血漿、肌肉和腎對(duì)照與試驗(yàn)組沒(méi)有明顯差異，表明壬基酚對(duì)其沒(méi)有產(chǎn)生嚴(yán)重的影響。壬基酚對(duì)其沒(méi)有影響可能由于壬基酚處理的時(shí)間過(guò)短，或者濃度不夠大，沒(méi)有造成生物體的氧化損傷程度。GPX是體內(nèi)重要抗氧化酶，SOD歧化O2形成的H2O2、H2O2R、ROOH分別與還原型谷胱甘肽在谷胱甘肽過(guò)氧化物酶作用下形成H2O、RH和毒性較小的ROH，起到清除自由基的作用39。處理組家兔GPX活性較對(duì)照組有不同程度的降低。正常情況下，肝臟代謝過(guò)程中產(chǎn)生一定量的自由基，但可被抗氧化自由基物質(zhì)所清除，二者之間處

27、于平衡狀態(tài)，不造成肝臟組織的損害。談冶雄等40測(cè)定慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化、肝癌等肝組織中的GPX活性，結(jié)果均顯著低于肝功正常者,表明損傷過(guò)程中GPX活性受抑制。血漿谷胱甘肽依賴(lài)酶的活性在氧化劑增高時(shí)出現(xiàn)，并且從損傷的肝細(xì)胞中釋放到血清，因此GPX 是肝細(xì)胞損傷的超級(jí)標(biāo)志41。當(dāng)肝臟有毒物質(zhì)增高時(shí)，能影響肝臟的正常生理功能，從而使血液和體液中硒的濃度下降，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活性降低。這與本試驗(yàn)結(jié)果相似，反映了家兔肝臟GPX清除活性氧自由基的能力降低，增加了脂質(zhì)過(guò)氧化程度，對(duì)肝細(xì)胞具有破壞作用。表明，壬基酚降低組織細(xì)胞抗氧化能力，造成自由基損傷。綜上所見(jiàn)，本研究通過(guò)測(cè)定壬基酚對(duì)不同月齡兔子血漿、

28、肝臟、腎臟和肌肉中MDA和GPX含量的影響，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期飼喂壬基酚后引起兔子血漿、肝臟、腎臟和肌肉中MDA含量的升高，而在GPX的含量發(fā)生了不同程度的改變，說(shuō)明壬基酚能增強(qiáng)機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不顯著的傷害，表明壬基酚可以影響兔子機(jī)體的氧化與抗氧化系統(tǒng)。參考文獻(xiàn)1 范奇元，丁訓(xùn)城，蔣學(xué)之等，消化道攝入壬基酚在大鼠體內(nèi)的分布與清除J環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)，2002，19（2）：2282302 楊再福，趙曉祥環(huán)境雌激素對(duì)水生動(dòng)物的影響研究進(jìn)展J生態(tài)環(huán)境200514（1）：1081123 Zou E Current status of environmental endocrine disrupti

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