SPE技術在畜禽產(chǎn)品殘留的分析應用

報告人：單吉浩2023/2/281SPE技術在畜禽產(chǎn)品殘留分析中的應用

食品與農(nóng)產(chǎn)品：殘留分析要求

高選擇性—降低或消除基質(zhì)干擾高靈敏度—痕量物質(zhì)可靠的結果：定量準確度和化合物確認—重現(xiàn)性，穩(wěn)定性和動態(tài)范圍—樣品基質(zhì)中低濃度目標物質(zhì)的準確定量—按照法規(guī)要求進行確認方法穩(wěn)定性—復雜樣品基質(zhì)，減少樣品凈化操作2023/2/282殘留分析:樣品前處理的重要性

是影響實驗成敗的決定性步驟

—占樣品分析時間的比例最大(70-80%)–樣品預處理所用時間遠多于色譜分離的時間

—占分析消耗總成本的比重最大

–消耗大量的溶劑及其它化學品

—對分析結果的重現(xiàn)性及準確性影響最大的環(huán)節(jié)—影響實驗結果好壞的最重要因素(回收率,%RSD）2023/2/283樣品前處理的通用方法

高速離心取上清液過濾、超濾選擇性沉淀衍生反應液-液萃取

固相提取(SolidPhaseExtract,SPE)2023/2/284為什么要用SPE?

2023/2/285樣品濃縮–提高靈敏度

樣品凈化–提高靈敏度–延長系統(tǒng)不間斷開機時間–延長色譜柱壽命

比液－液萃取更快,節(jié)省溶劑可自動化批量處理重現(xiàn)性好不斷革新的SPE技術

1977–率先推出業(yè)界第一個硅膠基質(zhì)固相提取技術的商品化產(chǎn)品：Sep-Pak

1996–推出第一個水－浸潤性聚合物基質(zhì)SPE吸附劑(Oasis?HLB)–快速通用性反相SPE方法學1997–用于Oasis?HLB的先進的新型方法學，可以獲得更干凈的本底(2D優(yōu)化方法學)1999–推出混合機理吸附劑(Oasis?MCX和MAX)，從而可以對堿性和酸性化合物進行高選擇性和高靈敏度的提取–Oasis?96孔提取板設計獲得R&D100大獎2023/2/286不斷革新的SPE技術2023/2/2872002–Waters最新革新SPE技術首次使得洗脫體積低至25μL

無需揮發(fā)與重現(xiàn)配制，洗脫后直接進樣即可是小體積樣品的理想提取工具靈敏度可以提高25x

2004–推出用于保留強堿(如季銨鹽)和強酸(如磺酸鹽)的WCX和WAX吸附劑SPE小柱的種類

根據(jù)吸附劑的劃分

–正相

Silica/Alumina(A,B,N)/Florisil/NH2/CN–反相

C18/tC18/C8/tC2/Porapak/RDX/NH2/CN–離子交換

SCX、MCX、PCX、WCX、MAX2023/2/288傳統(tǒng)(C18)SPE吸附劑的問題對極性化合物—保留不足

–藥物（農(nóng)藥）及代謝產(chǎn)物難以同時提取對堿性化合物回收不足—強硅羥基相互作用

–堿性樣品回收率低小柱跑干—不吸附

–操作過程需仔細控制回收率低，重現(xiàn)性差是其主問題。2023/2/289理想的樣品處理方法除去干擾物在很寬的極性范圍內(nèi)，對酸性、堿性及中性化合物均有可重現(xiàn)的高回收率很容易實現(xiàn)自動化，對大量樣品進行高通量處理容易使用并且耐受性好快速并且最終的成本低2023/2/2810PEP(Polymerenhancedpolymer)：極性提高了的共聚物

具有反相SPE的最佳性質(zhì)pH：0-14，810m2/g親水性單體：親水”—使填料具有水可浸潤性質(zhì)—允許溶劑跑干而不會損失回收率和重現(xiàn)性“親脂”—提供對分析物的反相保留能力2023/2/2811C18與PEP小柱相比：

—溶劑跑干對回收率的影響

(普魯卡因胺、醋氨酚、雷尼替丁、心得安、多慮平)2023/2/2812C18與PEP小柱相比：

—溶劑跑干對回收率的影響2023/2/2813PEP可取代C18

的優(yōu)勢–吸附容量更大

是C18的3到10倍，常用規(guī)格1mL/30mg（C18：100mg）–操作更簡便

小柱干涸不影響回收率–方法更通用

適合性質(zhì)各異的各種物質(zhì)的提取2023/2/2814PEP可取代C18

的優(yōu)勢–開發(fā)方法更容易

聚合物基質(zhì)，無硅醇基影響–對極性物質(zhì)的提取回收率更高

藥物(農(nóng)藥)及代謝產(chǎn)物同時提高2023/2/2815樣品前處理：

適于HPLC分析的通用SPE方法—此通用方法適于多種樣品基質(zhì)的絕大多數(shù)被測物。

—當分析堿性化合物時，不要使用高有機含量的水溶液進行清洗，因為PEP吸附劑中不含硅醇基。

—首先使用通用方法提取。若需進一步降低干擾，可使用優(yōu)化方法2023/2/2816樣品前處理：

適于HPLC分析的通用SPE方法2023/2/2817pH與化合物反相保留2023/2/2818血清中的四環(huán)素2023/2/2819血清中四環(huán)素的提取結果比較

SPE化合物%回收率%RSDPEP二甲胺四環(huán)素94.81.4

四環(huán)素1040.55C18

二甲胺四環(huán)素52.82.82

四環(huán)素68.42.446次實驗結果：加標水平：2.5μg/mL

2023/2/2820四環(huán)素類殘留分析

（日本政府食品安全公告）2003年８月宣布有關來自中國的蝦中的四環(huán)素類藥物監(jiān)測（TetracyclineintheshrimpfromChina）–如果為養(yǎng)殖蝦，政府要求必須監(jiān)測四環(huán)素類藥物殘留(mandatory)–如果為非養(yǎng)殖蝦，政府推薦監(jiān)測殘留(voluntary)–需HPLC、熒光檢測器法規(guī)更新：蔬菜和蜂蜜加工的食品必須監(jiān)測殘留–法規(guī)以前不要求檢測農(nóng)藥殘留，但因在加工食品和蜂蜜中發(fā)現(xiàn)了許多農(nóng)藥，故現(xiàn)在要求檢測2023/2/2821食用肉中的四環(huán)素

2023/2/2822牛奶中的四環(huán)素

2023/2/2823四環(huán)素—食品分析的結果

化合物牛肉豬肉牛奶牛奶

0.5μg/g0.5μg/g25μg/L50μg/L4

土霉素96.2(5.7)103(5.0)70.7(3.5)67.7(5.8)四環(huán)素91.4(5.5)99.8(6.1)73.7(7.3)68.5(5.1)金霉素80.6(6.8)83.4(6.1)76.7(2.9)67.3(1.8）結果以%回收率表示,括號內(nèi)數(shù)字為%RSD

2023/2/2824反相－離子交換雙重機理吸附劑

MCX：陽離子交換—反相吸附劑

—用于堿性物質(zhì)提取MAX：陰離子交換—反相吸附劑

—用于酸性物質(zhì)提取WCX：弱陽離子交換—反相吸附劑

—用于強堿性物質(zhì)(如季銨鹽類)提取WAX：弱陰離子交換—反相吸附劑

—用于強酸性物質(zhì)提取

2023/2/2825適合于堿性藥物提取的MCX小柱

2023/2/2826雙機理吸附劑：堿性化合物的保留

2023/2/2827混合機理:陽離子交換與反相的保留

2023/2/2828MCXSPE通用方法

2023/2/2829常見獸藥殘留的SPE推薦方法名稱規(guī)格 克侖特羅MCX/SCX/PCX 沙丁胺醇MCX/SCX/PCX 磺胺C18/PEP/AluminaB 氯霉素C18/PEP/Silica 氟喹諾酮PEP/C18硝基咪唑類藥物PEP/C18 己烯雌酚PEP/C18 四環(huán)素PEP/C18 萊克多巴胺AluminaA/MCX

2023/2/2830SPE在殘留分析方面的成功實例

硝基咪唑類藥物：

JAOACInternational,2003,86(3),505-509

四環(huán)素:

JchromatographyA,2003,987,227-233

動物組織中鹽酸克倫特羅的SPE與GC/MS分析液相色譜通訊，37，13-142023/2/2831SPE在殘留分析方面的成功實例萊克多巴胺：

Analyticachim,2003,483(1-2)P137-145

氯霉素：動物源食品中氯霉素的液相色譜-質(zhì)譜測定,分析測試學報，2002，21增刊，185-186

磺胺：動物組織中磺胺類藥物殘留量檢測方法---HPLC法2023/2/2832磺胺藥物樣品前處理—SPE法HLB

雞組織中磺胺類藥物殘留量檢驗方法－高效液相色譜紫外檢測法–廣州出入境檢驗檢疫局食品檢驗處

B(堿性氧化鋁小柱)

羊肉組織中七種磺胺殘留的測定–《Waters液相色譜通訊》35期，2002年動物源食品中磺胺類藥物殘留的檢測方法－高效液相色譜法–農(nóng)業(yè)部３８號文

C18

高效液相色譜法測定肉類奶粉中四種磺胺藥物殘留量的方法研究–《Waters液相色譜通訊》15期，1990年動物源食品中磺胺二甲嘧啶殘留檢測方法－高效液相色譜法–農(nóng)業(yè)部３８號文；2023/2/2833典型成功開發(fā)：

動物組織中磺胺藥物的殘留檢測方法—HPLC法—NY5029-2001農(nóng)業(yè)部“無公害畜產(chǎn)品例行監(jiān)測”專用方法艾杰爾科技——磺胺專用柱2023/2/2834動物源食品中磺胺類藥物殘留檢測方法

－高效液相色譜法

簡介

農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心2023/2/2835主要內(nèi)容一、適用范圍二、原理三、試劑和材料四、儀器設備五、檢驗步驟

2023/2/28361、適用范圍

本方法用于測定動物可食性組織中磺胺間甲氧嘧啶（SMM）、磺胺二甲基嘧啶（SM2）、磺胺甲噁唑（SMZ）、磺胺二甲氧嘧啶（SDM）、磺胺喹噁啉（SQ）單個或混合物的殘留量。2023/2/28372．原理

組織經(jīng)乙腈提取后，其上清液加入正己烷進行液液分配，取下層溶液加入正丙醇減壓干燥，殘留物用乙腈溶解，過Sep-Pak堿性氧化鋁柱,洗脫，干燥后定容，用高效液相色譜儀進行檢測。

2023/2/28383、試劑和材料

除特別注明外，所用試劑均為分析純；水為超純水。3.1磺胺類藥物標準品（SMM、SDM、SM2、SMZ和SQ），（Sigma公司，含量不少于98.9%）3.2甲醇色譜純3.3乙腈色譜純3.4正已烷3.5正丙醇3.6無水硫酸鈉2023/2/28393、試劑和材料3.7堿性氧化鋁SPE柱（6毫升，500毫克）3.8磺胺類藥物標準儲備液（1mg/mL）分別精密稱取上述磺胺類藥物標準品各50mg，甲醇溶解并轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶，定容，搖勻。置-20℃以下冰箱中保存,有效期3個月。3.9磺胺類藥物標準工作液取磺胺類藥物標準儲備液用流動相稀釋成濃度為0.05,0.1,0.2,0.5,1.0，2.0μg/mL的標準工作液。置2℃-8℃冰箱中保存，有效期1周。2023/2/28404、儀器設備

4.1高效液相色譜儀（配紫外檢測器）4.2離心機4.13固相萃取裝置（配考克閥）4.4分析天平精度0.0001g4.5天平精度0.01g4.6旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀4.7振蕩器4.8勻漿機4.9渦動混合器4.10分液漏斗50mL4.11梨形瓶100mL4.12離心管50mL4.13微孔濾膜0.45μm2023/2/28415檢驗步驟

5.1試料的制備5.1.1取絞碎后的供試樣品,作為供試試料。5.1.2取絞碎后的空白樣品,作為空白試料（陰性對照）。5.1.3取絞碎后的空白樣品5g,添加5μg/mL的工作液0.1mL，作為空白添加試料（陽性對照）。2023/2/28425檢驗步驟5.2提取和純化5.2.1

組織樣品5.00g——5g無水硫酸鈉+25mL乙腈——均質(zhì)——振蕩10min——以3000r/min的速度離心5min——重復兩次——并兩次的上清液——加入正己烷30mL——振蕩10min——離心5min——取下層液體于100mL梨形瓶中。2023/2/28435檢驗步驟5.2.1（續(xù)）加正丙醇5mL，50℃下減壓干燥至干，殘留物用95%乙腈3ml溶解，過氧化鋁B柱。用5mL乙腈-水（95+5）過柱，不收集，再用10mL乙腈-水（70+30）洗脫。洗脫液中加入5mL正丙醇，50℃下減壓干燥至干，殘留物用2.0mL流動相溶解，溶液用濾膜過濾，作為試樣溶液，供高效液相色譜分析。2023/2/28445檢驗步驟5.3色譜條件5.3.1色譜柱：C18柱，250×4.6mm（i.d.），粒徑5μm，或相當者；5.3.2流動相：乙腈-甲醇-水-乙酸(2+2+9+0.2)；5.3.3流速：1mL／min；5.3.4檢測波長：270nm；5.3.5進樣量：20μL。2023/2/28455檢驗步驟5.5測定法5.5.1取試樣溶液和0.05μg/mL的對照溶液，作單點校準，以峰面積計算。對照溶液及試樣溶液中磺胺類藥物的響應值均應在儀器檢測的線性范圍之內(nèi)，試樣溶液測定過程中應參插注入對照溶液，以便準確定量。5.5.2試劑空白試驗除不加試料外，采用完全相同的測定步驟進行平行操作。5.5.3結果計算和表述按下式計算供試組織中磺胺類藥物的殘留量：

Xi=(CSVA)/(ASm)2023/2/28465檢驗步驟5.6結果判定5.6.1線性范圍在0.02μg/mL～1.0μg/mL范圍考察線性，計算回歸方程，其相關系數(shù)≥0.995。5.6.2準確度本方法在100μg/kg添加濃度水平上的回收率范圍為50%～110%。5.6.3允許相對偏差允許相對偏差≤26%。2023/2/2847SPE在鹽酸克侖特羅（瘦肉精）

殘留檢測中的應用

樣品前處理：SPE法–參見：中華人民共和國農(nóng)業(yè)部行業(yè)標準：飼料中鹽酸克侖特羅的測定參見：中華人民共和國國家標準：動物組織中鹽酸克侖特羅的測定2023/2/2848SPE在鹽酸克侖特羅（瘦肉精）

殘留檢測中的應用中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準NY/T468—2005

動物組織中鹽酸克倫特羅的測定－氣相色譜-質(zhì)譜法NY/XQ421-2003“動物尿液中鹽酸克倫特羅（瘦肉精）殘留的檢測氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）方法”

——起草單位：農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心2023/2/2849動物組織中鹽酸克倫特羅的測定－氣相色譜-質(zhì)譜法

——原理對樣品在堿化的條件下用乙酸乙酯提取，合并提取液后，利用鹽酸克倫特羅易溶于酸性溶液的特點，用稀鹽酸反萃取，萃取的樣液pH調(diào)至5.2后用SCX固相萃取小柱凈化，分離的藥物殘留經(jīng)過雙三甲基硅烷三氟乙酰胺（BSTFA）衍生后用帶有質(zhì)量選擇檢測器的氣相色譜儀測定。2023/2/2850動物組織中鹽酸克倫特羅的測定－氣相色譜-質(zhì)譜法

提取

(5±0.05)g動物肝組織——加入15mL乙酸乙酯——加入3mL10.0%碳酸鈉溶液——均質(zhì)——離心2min——上層有機溶劑——在殘渣中再次提取后——并合——加入5mL0.10mol/L的鹽酸——離心2min——重復萃取——合并下層溶液——2.5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.2。

2023/2/2851動物組織中鹽酸克倫特羅的測定－氣相色譜-質(zhì)譜法凈化

SCX小柱——5mL甲醇——5mL水——5mL30mmol/L鹽酸活化——萃取液上樣——5mL水——5mL甲醇——淋洗柱子——抽干SCX小柱——5mL4%氨化甲醇溶液——洗脫。衍生化在50℃水浴——氮氣吹干——100L甲苯——100LBSTFA——80℃衍生lh——冷卻——加入0.3mL甲苯——氣相色譜-質(zhì)譜分析。2023/2/2852動物組織中鹽酸克倫特羅的測定－氣相色譜-質(zhì)譜法GC/MS測定參數(shù)設定色譜柱：HP-5MS5%苯基甲基聚硅氧烷，30m×0.25mm（內(nèi)徑），0.25m（膜厚）；進樣口：220℃；進樣方式：不分流；進樣體積：1L；柱溫：70℃（保持0.6min）,以25℃/min升溫至200℃（保持6min），以25℃/min升溫至280℃（保持5min）；載氣：氦氣，流速：0.9mL/min（恒流）；GC/MS傳輸線溫度：280℃；溶劑延遲：8min；EM電壓：高于調(diào)諧電壓200V；離子源(EI)溫度：200℃；四極桿溫度：160℃；選擇離子監(jiān)測:(m/z)86，212，262，2772023/2/2853動物尿液中鹽酸克倫特羅的測定－氣相色譜-質(zhì)譜法凈化

依次用甲醇5mL、水5mL和30mmol/L鹽酸5mL潤洗固相萃取小柱，將上述備用液過柱，依次用水5mL、甲醇5mL淋洗，真空抽干，用4%氨化甲醇5mL洗脫SCX小柱，收集洗脫液于具塞玻璃試管中，50℃下氮氣吹干。在樣液過柱和洗脫過程中流速控制在1mL/min左右。2023/2/2854殘留分析SPE前處理應用

小結

——以常規(guī)方法為起點——如需要，根據(jù)樣品性質(zhì)與基質(zhì)進行方法優(yōu)化——對于堿性或酸性組分采用雙機理吸附劑

2023/2/2855SPE小柱的典型應用實例

磺胺：Sep-PakAl2O3(B),12cc/2g,WAT054260–動物源食品中磺胺類藥物殘留物檢測方法——HPLC金霉素：Sep-PakC18或者tC18–金霉素殘留的HPLC測定伊維菌素：Sep-PakC18或者tC18–伊維菌素殘留的HPLC測定法2023/2/2856SPE小柱的典型應用實例

恩諾沙星，環(huán)丙沙星：Sep-PaktC18(含碳量≥16%)–動物性食品中恩諾沙星和環(huán)丙沙星殘留物檢測方法——HPLC噁喹酸，氟甲喹：Sep-PaktC18(含碳量≥16%)–動物性食品中噁喹酸和氟甲喹殘留物檢測方法——HPLC2023/2/28572023/2/2858國家科技攻關計劃課題畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全關鍵控制技術系列標準研究

(課題編號：2002BA906A75)

農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心

2023/2/2859國家科技攻關計劃子課題三種獸藥使用規(guī)范驗證和四種獸藥殘留檢測方法研究

(子課題編號：2002BA906A37-01)

農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心2005年11月10日

2023/2/286020種獸藥殘留檢測方法的技術要點22.1豬組織中已烯雌酚、已烷雌酚、已二烯雌酚殘留檢測方法研究（氣相色譜-質(zhì)譜法）

在堿化的條件下用乙酸乙酯提取豬組織樣品中己烯雌酚、已二烯雌酚和已烷雌酚殘留，然后通過碳酸鈉溶液和硅膠柱對洗脫物質(zhì)進行凈化處理。凈化后的樣品平均分兩份進行吹干后衍生，BSTFA衍生后進行氣相色譜－質(zhì)譜分析。檢測限:0.25g/kg-0.5g/kg；回收率:60.9%～85.6%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%22.1豬組織中已烯雌酚、已烷雌酚、已二烯雌酚殘留檢測方法研究（氣相色譜-質(zhì)譜法）

2023/2/2861已二烯雌酚標準溶液經(jīng)衍生化后選擇離子模式下的總離子流圖豬肝添加樣品總離子流圖(已二烯雌酚添加濃度為4μg/kg)2023/2/28622.2豬組織中雌二醇殘留檢測方法研究（液相色譜-質(zhì)譜法）

試樣勻漿后,加入氘代雌二醇內(nèi)標,經(jīng)正己烷脫脂,經(jīng)HLB柱、硅膠柱、氨基柱凈化后，于液質(zhì)聯(lián)用儀上進行測定。同位素內(nèi)標定量。檢測限:1g/kg；回收率:97.1%～106.1%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%2.2豬組織中雌二醇殘留檢測方法研究（液相色譜-質(zhì)譜法）2023/2/2863豬肝添加雌二醇色譜圖(從上至下添加濃度依次為0μg/kg,5μg/kg,2μg/kg,1μg/kg)

2023/2/28642.3豬尿液中丙酸睪酮殘留檢測方法（液相色譜-質(zhì)譜法）豬尿樣品經(jīng)固相萃取小柱凈化后，供液相色譜-質(zhì)譜儀測定。丙酸睪酮檢測限:1.0g/kg

丙酸睪酮回收率:62.2%～73.5%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%丙酸睪酮標準溶液質(zhì)譜圖

空白豬尿中添加50μg/L的丙酸睪酮標準溶液后的SIR色譜圖

2023/2/28652.5豬組織及豬尿中克倫特羅、沙丁胺醇殘留檢測方法（氣相色譜-質(zhì)譜法）

試樣用高氯酸溶液勻漿、超聲加熱提取，用異丙醇+乙酸乙酯(40+60)萃取，有機相濃縮，經(jīng)弱陽離子交換柱進行分離，用乙醇+濃氨水(98+2)溶液洗脫，洗脫液濃縮，經(jīng)N,O雙三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)衍生后于氣質(zhì)聯(lián)用儀上進行測定。外標法定量。檢測限:1g/kg；回收率:60.37%～93.86%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%2.5豬組織及豬尿中克倫特羅、沙丁胺醇殘留檢測方法（氣相色譜-質(zhì)譜法）

2023/2/2866豬肝加標樣色譜圖(2g/kg)2023/2/28672.6豬組織及豬尿中萊克多巴胺殘留檢測方法（氣相色譜-質(zhì)譜法）

樣品經(jīng)過高氯酸水解提取，用乙酸乙酯和異丙醇（4：6）再次提取后過SCX陽離子小柱凈化，用合適的溶劑選擇洗脫后,氮氣吹干，供高效液相色譜定量（質(zhì)譜檢測器）測定。外標法定量。檢測限:1g/kg；回收率:66.47%～86.21%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%

2.6豬組織及豬尿中萊克多巴胺殘留檢測方法（氣相色譜-質(zhì)譜法）2023/2/2868300g/L標準溶液質(zhì)譜圖

肉添加10g/kg質(zhì)譜圖2023/2/28692.7豬組織中氯霉素殘留檢測方法（液相色譜-質(zhì)譜法）

樣品經(jīng)過乙腈-水（1+1）溶液、乙酸乙酯重復提取，用正己烷除去樣品中的脂肪等雜質(zhì)，C18固相萃取柱進一步凈化，N2氣吹干后供高效液相色譜定量（質(zhì)譜檢測器）測定。外標法定量。檢測限:0.1g/kg；回收率:67.4%～87.0%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%1g/L標準溶液圖肉添加1g/kg圖2.7豬組織中氯霉素殘留檢測方法（液相色譜-質(zhì)譜法）

2023/2/28702023/2/28712.8豬組織中粘桿菌素殘留檢測方法（液相色譜法）待測動物組織中殘留的粘桿菌素經(jīng)三氯乙酸-甲醇溶液提取，C18固相萃取柱凈化后，與熒光衍生化試劑反應，用高效液相色譜（熒光檢測器）進行檢測，外標法定量。檢測限:75g/kg；定量限:150g/kg,回收率:80.1%～108.5%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%a：空白樣品圖b：添加0.05μg/g粘桿菌素樣品圖2023/2/28722.9豬組織中磺胺類藥物殘留檢測方法（液相色譜法）

組織樣品經(jīng)乙腈提取后，在上清液中加入正己烷進行液液分配，取下層溶液加入正丙醇減壓干燥，殘留物用乙酸乙酯溶解，過氨基鍵合小柱,以乙酸乙醇溶液洗脫，氮氣吹干后用流動相溶解，定容后用高效液相色譜儀進行檢測。檢測限:3～5g/kg；回收率:65.1%～92.1%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%2.9豬組織中磺胺類藥物殘留檢測方法（液相色譜法）2023/2/2873磺胺類藥物標準品色譜圖豬肝添加磺胺類藥物色譜圖2023/2/28742.10豬組織中乙酰甲喹殘留檢測方法（液相色譜法）動物組織勻漿用雙蒸水、三氯乙酸提取，經(jīng)C18固相小柱凈化，80%甲醇洗脫，收集洗脫液，作為試樣溶液供高效液相色譜（配紫外檢測器）分析，外標法定量檢測限:50g/kg回收率:60.1%～83.1%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%空白豬肉組織試樣色譜圖

豬肉試樣中添加乙酰甲喹色譜圖2023/2/28752.11動物組織（豬、雞）中硝基咪唑類藥物多殘留檢測方法（液相色譜-質(zhì)譜法）待測動物組織中殘留的硝基咪唑類藥物用乙酸乙酯提取，液/液萃取分離,固相萃取柱凈化后，通過高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用的大氣壓化學電離正離子檢測（APCI+）方式,進行選擇離子(SIR)檢測，外標法定量，實現(xiàn)了三種硝基咪唑類化合物的多殘留確證。。檢測限:0.5-1.0g/kg；回收率:55.31%～88.66%

批內(nèi)變異系數(shù)≤15%，批間變異系數(shù)≤20%豬肝加標樣選擇離子檢測色譜圖.(a)洛硝噠唑(M/Z=201,2.0μg/kg);(b)甲硝唑（M/Z=172,1.0μg/kg）;(c)地美硝唑（M/Z=142,1.0μg/kg）

2023/2/28762.12動物（羊、豬）組織中伊維菌素類藥物多殘留檢測方法（液相色譜法）