羅紅霉素含量測定技術(shù)分析

1、羅紅霉素含量測定技術(shù)分析 【摘要】荷移反應(yīng)是指由富電子和缺電子物質(zhì)形成電荷轉(zhuǎn)移絡(luò)合物的反應(yīng)，基于某些物質(zhì)生成的荷移絡(luò)合物具有特定的顏色、最大吸收波長等特性，可測定物質(zhì)的含量。利用荷移光譜法可測定藥物、尼古丁、有機(jī)溶劑中微量水含量等，由于此法簡便、快速，試劑穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，因此在藥物分析上有廣泛的應(yīng)用前景。 【關(guān)鍵詞】羅紅霉素 7 7 8 8四氰基對二次甲基苯醌 荷移反應(yīng) 分光光度法 【中圖分類號】r927.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】a 【文章編號】2095-6851（2014）2-0348-01 荷移反應(yīng)是指由富電子和缺電子物質(zhì)形成電荷轉(zhuǎn)移絡(luò)合物的反應(yīng)，基于某些物質(zhì)生成的荷移絡(luò)合物具有特定的顏色、最大

2、吸收波長等特性，可測定物質(zhì)的含量。利用荷移光譜法可測定藥物、尼古丁、有機(jī)溶劑中微量水含量等，由于此法簡便、快速，試劑穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，因此在藥物分析上有廣泛的應(yīng)用前景。羅紅霉素為大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，主要作用于革蘭陽性菌、厭氧菌、衣原體等。目前測定羅紅霉素的方法有效價(jià)法、伏安法、sp法、hplc法等， 但未見文獻(xiàn)報(bào)道以7，7，8，8四氰基對二次甲基苯醌（tcnq）為荷移試劑測定羅紅霉素。本文應(yīng)用分光光度法研究了tcnq與羅紅霉素的荷移反應(yīng)，確定了利用該反應(yīng)測定羅紅霉素含量的分析方法，并成功地用于藥物中羅紅霉素含量的測定，與藥典法對照，測定結(jié)果準(zhǔn)確。 1 實(shí)驗(yàn)部分 1.1 主要試劑與儀器：tcnq（s

3、igma公司產(chǎn)品）丙酮溶液： 5.010-3mol/l；標(biāo)準(zhǔn)羅紅霉素（羅紅霉素對照品，購自 中國 藥物生物制品檢定所）：1.010-4mol/l丙酮溶液；甲醇、無水乙醇、丙酮、氯仿等有機(jī)試劑均為分析純。羅紅霉素片（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批號05011251；江蘇亞邦愛普森藥業(yè)有限公司，批號0411129）。實(shí)驗(yàn)用水均為二次蒸餾水。uv2401pc型紫外可見分光光度計(jì)（日本島津）；hhs？21ni型恒溫水?。ū本┚感l(wèi) 科學(xué) 儀器廠）。 1.2 實(shí)驗(yàn)方法：準(zhǔn)確移取一定量羅紅霉素（1.010-4mol/l丙酮溶液）于10ml比色管中，加入5.010-3mol/l tcnq丙酮溶液2.00ml。用

4、丙酮稀釋至刻度，搖勻后于30反應(yīng)20min，冷卻至室溫，用對應(yīng)試劑空白為參比，用1cm比色皿分別在743和842nm處測吸光度。 2 結(jié)果與討論 2.1 羅紅霉素吸收光譜：按1.2實(shí)驗(yàn)方法配制溶液，以相應(yīng)的試劑空白為參比，繪制吸收光譜。試驗(yàn)表明，羅紅霉素與tcnq形成的絡(luò)合物分別在波長743、844nm處有兩個(gè)吸收峰，試劑在此波長范圍內(nèi)吸收較小，羅紅霉素在此波長范圍內(nèi)無吸收（fig.1）。 2.2 反應(yīng)溫度的影響：分別在1060恒溫一定時(shí)間后測量荷移絡(luò)合物的吸光度，研究溫度對荷移反應(yīng)的影響。試驗(yàn)表明，反應(yīng)的最佳溫度為30。 2.3 反應(yīng)時(shí)間的影響：控制反應(yīng)溫度為30，分別選擇反應(yīng)時(shí)間為1050

5、min，測定溶液吸光度，研究反應(yīng)時(shí)間對生成絡(luò)合物的影響。試驗(yàn)表明，最佳時(shí)間為20min。絡(luò)合物在室溫下放置，120min內(nèi)溶液的吸光度穩(wěn)定。 2.4 試劑用量的影響：改變試劑用量，研究試劑用量對反應(yīng)的影響。實(shí)驗(yàn)表明，隨著試劑用量的增加，荷移絡(luò)合物的吸光度增大，當(dāng)試劑用量達(dá)到一定時(shí)，溶液的吸光度基本保持不變，說明荷移反應(yīng)趨于完全。適宜試劑用量為2.00ml。 2.5 溶劑的影響：分別用甲醇、無水乙醇、丙酮、氯仿等作溶劑，研究溶劑對反應(yīng)的影響。實(shí)驗(yàn)表明，以丙酮作溶劑為好，其荷移絡(luò)合物吸光度最大且穩(wěn)定。 2.6 方法的重現(xiàn)性：移取6份羅紅霉素進(jìn)行測定，測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.0%，說明方法重現(xiàn)性

6、較好。 2.7 絡(luò)合物組成的測定：應(yīng)用等摩爾連續(xù)變化法和平衡移動(dòng)法測得羅紅霉素與tcnq反應(yīng)生成的荷移絡(luò)合物的組成比均為12（fig.2，fig.3）。 2.8 反應(yīng)機(jī)理：tcnq是缺電子試劑，羅紅霉素是一種富電子物質(zhì)，其氮原子上的孤對電子能夠與7，7，8，8四氰基對二次甲基苯醌形成n型荷移絡(luò)合物，根據(jù)測得絡(luò)合物組成比為12，推測其形成機(jī)理見fig.4。 c （roxithromycin）+（tcnq）=1.010-3mol/l fig.2 the determination of the comples formation by the continous variation method

7、of equivalent mole c （roxithromycin）=1.010-4mol/l； c （tcnq）=1.010-3mol/l fig.3 the determination of the comples formation by the equilibrium movement methodfig.4 2.9 標(biāo)準(zhǔn)曲線：按實(shí)驗(yàn)確定的最佳條件配制溶液并進(jìn)行反應(yīng)，在各自的最大吸收波長下測定荷移絡(luò)合物的吸光度，將測得的數(shù)據(jù)作統(tǒng)計(jì)處理，繪制工作曲線，得到回歸方程及線性范圍，結(jié)果見tab.1。 3 樣品的測定 3.1 樣品的準(zhǔn)備：取不同廠家生產(chǎn)的羅紅霉素各10片（標(biāo)示量均為每片150mg），精確稱量后研磨混勻，然后準(zhǔn)確稱取總量的十分之一，用丙酮溶解，過濾，棄去不溶物。濾液于100ml容量瓶中定容備用。 3.2 樣品的測定：取適量上述制備好的樣品試液于10ml比色管中，按實(shí)驗(yàn)方法在max處