液質(zhì)聯(lián)用缺點(diǎn)及解決辦法,藥物分析

LC-MS法在體內(nèi)

藥物分析研究中的常見問題姓名：黃小燕班級：D2J6班1測定對象的局限性2多種待測物的同時(shí)測定3基質(zhì)效應(yīng)4專屬性結(jié)果的可靠性5殘留效應(yīng)雖然LC-MS技術(shù)在體內(nèi)藥物分析中的適用范圍極廣,但是仍有一些類型的化合物不適合直接采用LC-MS進(jìn)行測定,或者在特定的條件下直接采用LC-MS分析不能達(dá)到靈敏度等要求。通常這樣的情況還需要采用衍生化法或者其他更進(jìn)一步的處理而使得檢測復(fù)雜化。一、測定對象的局限性1、小分子非極性化合物目前利用大氣壓化學(xué)離子化(APCI)、大氣壓光電離化(APPI)等基于氣相的離子化技術(shù)分析非極性化合物能夠獲得較為理想的質(zhì)譜響應(yīng)，但是對于某些極性極弱的小分子化合物，由于缺乏可解離的基團(tuán)，無論采用何種離子化模式均難滿足測定的需求，其中比較有代表性的是一些小分子醛、酮類化合物。2、小分子極性化合物

該類化合物中一些極性基團(tuán)雖然能夠有效地促進(jìn)待測物解離,但是往往缺乏適當(dāng)?shù)氖杷Y(jié)構(gòu)以幫助其更好地霧化，同時(shí)也缺乏在常用的反相色譜柱上的適當(dāng)色譜保留。如氨基酸類、含有羧基的小分子化合物以及嘌呤嘧啶拮抗物。氨基酸類以及一些基于生理氨基酸結(jié)構(gòu)改造的藥物如如司坦類。結(jié)構(gòu)中同時(shí)具有易質(zhì)子化的基團(tuán)(氨基)和易去質(zhì)子化的基團(tuán)(羧基)，因此在離子化過程中易發(fā)生反荷離子效應(yīng)進(jìn)而導(dǎo)致該類化合物的質(zhì)譜響應(yīng)極弱，甚至沒有質(zhì)譜響應(yīng)。含有羧基的小分子化合物大多數(shù)羧基化合物在負(fù)離子條件下都能獲得較高的質(zhì)譜響應(yīng)，但是對于一些結(jié)構(gòu)較小并且極性較大的羧酸化合物，無論是質(zhì)譜響應(yīng)還是色譜保留行為均不理想，同時(shí)由于其較強(qiáng)的親水性，也不利于樣品的處理。嘌呤、嘧啶拮抗物通過干擾DNA的合成抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中必經(jīng)的代謝路徑，臨床上通常用于白血病的治療。但是其極性很強(qiáng)，且缺乏合適的離子化官能團(tuán)而難以直接用液質(zhì)聯(lián)用進(jìn)行檢測。3、痕量物質(zhì)的分析

對于大多數(shù)易離子化的化合物甚至是一些非極性的化合物，采用LC-MS法分析都能夠獲得相當(dāng)高的靈敏度，但是對于一些定量下限需要達(dá)到pg級甚至更高靈敏度的分析項(xiàng)目，如激素類藥物，或者一些痕量內(nèi)源性物質(zhì)，也難以直接檢測，故還需要考慮增強(qiáng)其檢測限。4、蛋白質(zhì)以及多肽目前常用的手段之一就是將待測蛋白質(zhì)酶解為肽段后進(jìn)行LC-MS分析。然而該法在實(shí)際操作中極其困難,其中一個(gè)主要的問題就是蛋白經(jīng)酶解后生成的肽段親水性太強(qiáng)，不利于樣品的處理和色譜保留。對于復(fù)方制劑，當(dāng)存在兩種或多種藥物的劑量相差懸殊的情況時(shí)，通常會導(dǎo)致各個(gè)待測物在生物體液中的濃度相差巨大，因而符合它們各自藥代動力學(xué)研究的藥物濃度的線性范圍也相差甚遠(yuǎn)。此時(shí)需要對各個(gè)待測物的質(zhì)譜響應(yīng)、線性范圍和靈敏度三者進(jìn)行綜合考慮。二、多種物質(zhì)的同時(shí)測定雖然也有研究者嘗試采用曲線回歸法校正濃度與響應(yīng)之間的非線性關(guān)系,但是該法的耐用性仍然是個(gè)未知數(shù)。若不進(jìn)行濃縮處理甚至為了保證良好的線性而稀釋待測成分,血藥濃度低的成分的質(zhì)譜響應(yīng)就會降低，可能不能滿足藥動學(xué)研究所需要達(dá)到的靈敏度。采用一些新型的質(zhì)譜儀器可以獲得更寬線性范圍(6個(gè)數(shù)量級)和更高的靈敏度,但是對儀器要求較高且也并不一定能夠滿足分析要求。

基質(zhì)效應(yīng)是指色譜分離時(shí)共洗脫的物質(zhì)改變了待測成分的離子化效率，所引起的信號的抑制或提高。