2016-2022年中國網(wǎng)絡(luò)借貸產(chǎn)業(yè)競爭現(xiàn)狀調(diào)研及十三五投資規(guī)劃研究報告

1、細胞培養(yǎng)實驗寫報告內(nèi)容 1目的2 原理3材料與方法（操作步驟）4實驗結(jié)果5結(jié)論或結(jié)果分析 實驗一 雞胚原代成纖維細胞的制備與培養(yǎng) 實驗二 濾泡性口炎病毒（VSV）的增殖（純培養(yǎng)）實驗三 Hep-2細胞的傳代培養(yǎng)實驗四 VSV TCID50滴定實驗五 干擾素活性（效價）的測定 實驗六 VSV中和試驗（稀釋血清固定病毒法）實驗二 雞胚原代成纖維細胞的制備與培養(yǎng)一、目的1、掌握雞胚原代成纖維細胞的制備及培養(yǎng)的基本步驟；2、掌握活細胞的顯微鏡下觀察；3熟悉病毒在細胞內(nèi)增殖的基本判斷方法。二、原理離體動物組織通過溫和的手段（機械和酶消化）形成單個細胞后，在適宜的外界環(huán)境中，包括溫度、酸堿度和氣相環(huán)境，并

2、給予充足合適的營養(yǎng)條件，能生存、生長形成單層細胞，這種原代培養(yǎng)的細胞具有原來體內(nèi)所具備的基本特性，比如肌肉細胞的收縮功能；上皮細胞的分泌功能等。通常把這種從體內(nèi)取出組織細胞開始培養(yǎng)到第一次進行傳代之前的這一段時期稱為原(初)代培養(yǎng)。原代細胞最接近體內(nèi)細胞的特性，因而對外界環(huán)境的變化也最敏感，因此比較適合病毒的增殖，藥物的作用機制等的研究。 三、材料（按2人/組的量發(fā)放）名 稱數(shù) 量備 注911日齡雞胚1只無菌器械1套無菌無毒平皿2只5或10ml吸管4支1或5ml吸管1支青霉素瓶（帶塞）2只Hank s 液250ml1640 RMPI或DMEM500ml雙抗5ml胰蛋白酶1ml小牛血清5ml5.

3、6% NaHCO33ml碘酒和酒精棉球若干細胞培養(yǎng)瓶2只四、操作步驟1、在DMEM和Hanks 液中分別無菌操作以1的量加入雙抗，吸出1015mlHanks 液至無菌平皿中備用； 2、碘酒和酒精棉球分別拭擦雞胚氣室外卵殼；3、取出兩只無菌平皿，并標(biāo)記和，待用。4、大鑷子輕敲卵殼頂部然后小心去掉氣室外卵殼； 5、消毒鑷子后小心撕破卵膜，兩人互相配合取出雞胚置于盛有Hanks 液的平皿中，小心去頭、內(nèi)臟、爪和粘液及血球，洗滌后置于盛有Hanks 液的平皿中，再充分洗滌；6、取出洗凈的組織塊置于大青霉素瓶中，在火焰附近用無菌眼科剪刀將其剪成約0.51mm3的小塊（約250次），此時體積約0.5ml；

4、用Hank s 液洗滌兩次。7、按照10倍量加入0.25胰蛋白酶，調(diào)節(jié)pH至約7.38.0（肉眼觀為肉紅色）蓋上瓶塞，寫好標(biāo)記；8、將上述細胞瓶置于37水浴中，開始計時，約1530min，其間緩慢搖勻以充分消化。消化停止的標(biāo)志是：輕輕晃動后細胞懸起，呈云霧狀，很快聚集成團，表明細胞活力好。9、消化結(jié)束后，取出，稍沉淀，緩慢吸出上清，用Hanks 液小心洗滌23次，可以盡量減少胰蛋白酶的殘留量，然后加入DMEM液約5ml，用小頭吸管充分吹打，使細胞充分分散。吸上清；重復(fù)操作34次，收集細胞上清。10、（1）上述細胞懸液自然沉降，待未消化徹底的組織塊沉入瓶底后，收集上清，并加入足量的小牛血清（終濃

5、度為10），將細胞密度調(diào)到約1106個/ml。（2）經(jīng)四層無菌紗布過濾后收集濾液，并加入足量的小牛血清（終濃度為10），將細胞密度調(diào)到約1106個/ml；11、將上述制備好的細胞懸液平均分配到2只細胞瓶中，5ml/瓶，塞好螺口塞，注意生長面朝下，在非生長面上做好標(biāo)記，包括細胞名稱，接種培養(yǎng)時間，組別及姓名等。12、細胞統(tǒng)一置于本室指定的CO2孵箱中培養(yǎng)。13、24h后觀察細胞生長情況，如果細胞長成單層，細胞界限清晰，大多數(shù)細胞為梭形并貼壁，布滿細胞瓶的生長面，說明細胞生長狀態(tài)良好。實驗三 濾泡性口炎病毒（VSV）的增殖（純培養(yǎng)）一、實驗?zāi)康恼莆詹《驹诩毎麅?nèi)增殖的基本判斷方法。二、實驗原理原代細

6、胞最接近體內(nèi)細胞的特性，因而對外界環(huán)境的變化也最敏感，因此比較適合病毒的增殖，藥物的作用機制等研究。 病毒在細胞內(nèi)增殖的檢測指標(biāo)有細胞變化、紅細胞吸附、細胞代謝改變、干擾現(xiàn)象、免疫熒光法檢測等。由病毒引起的細胞病變稱細胞病變效應(yīng)（cytopathic effect，CPE），常見的細胞形態(tài)學(xué)變化為細胞變圓、聚集、融合、裂解或脫落等。三、實驗材料（按2人/組的量發(fā)放）名 稱數(shù) 量備 注200TCID50 VSV0.1ml5ml和1ml吸管各1支維持液100ml含3小牛血清的RPMI-1640液或DMEM液四、操作步驟1、上述原代成纖維細胞培養(yǎng)24h后，一旦細胞完全貼壁生長良好后，則輕棄培養(yǎng)上清，

7、換上細胞維持液（含3小牛血清的RPMI-1640），接種200TCID50的VSV0.1ml，在細胞瓶上標(biāo)記換液時間，接種病毒量。正常對照也按照上述方法換上維持液。2、再繼續(xù)培養(yǎng)，每間隔1224h觀察，直至全部細胞出現(xiàn)明顯的病變，顯微鏡觀察細胞脫落，圓縮，則可停止培養(yǎng)。3、收集全班的病毒培養(yǎng)物于100ml無菌鹽水瓶中，寫好標(biāo)記，置于20冰箱充分冷凍后再置于4冰箱或室溫下解凍，該過程稱為凍融。反復(fù)凍融三次后，細胞膜破壞，釋放出胞內(nèi)病毒。低速離心，棄細胞碎片沉渣，收集上清即為病毒懸液。留樣測定病毒的TCID50。五、實驗結(jié)果1、雞胚原代成纖維細胞的顯微鏡下觀察。2、VSV攻擊雞胚原代成纖維細胞后，

8、細胞病變效應(yīng)（CPE）的觀察。3、病毒收獲的方法。實驗四 Hep-2細胞的傳代培養(yǎng)一、目的掌握細胞傳代培養(yǎng)的方法及其應(yīng)用。二、原理原代培養(yǎng)后由于細胞游出數(shù)量增加，細胞進行增殖，單層培養(yǎng)細胞相互匯合，整個瓶底逐漸被細胞覆蓋。這時需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶的過程稱之為傳代；進行一次分離再培養(yǎng)稱之為傳一代。細胞培養(yǎng)傳代根據(jù)不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打即可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。三、材料名 稱

9、數(shù) 量備 注傳代人喉癌上皮細胞（Hep-2）1瓶/2人VTP1ml/2人DMEM液100ml/2人PBS1瓶/8人血清5ml/2人5或10ml吸管2支1ml吸管1支細胞培養(yǎng)瓶1只/2人四、操作步驟1、將細胞生長面朝上輕輕倒掉上清，用PBS小心洗滌三次，注意吸管尖頭不要伸到細胞瓶中。2、用上述吸管吸取1ml VTP加入細胞瓶中，鋪滿整個細胞生長面即可；室溫或手握住消化，約35min。當(dāng)細胞胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，即可停止消化，盡可能棄盡消化液，繼續(xù)利用殘余的消化液消化，直至細胞大部分易在外力作用下從細胞瓶表面脫落下來為止。3、加入少量DMEM液細胞瓶中，用小頭吸管吹打瓶壁細胞以及脫落細胞充分使

10、細胞均勻，吹打時動作要輕柔不要用力過猛，盡可能不要出現(xiàn)泡沫。吸一滴細胞懸液于Ep管中。4、計數(shù)：用吸管吹打細胞懸液，取少許細胞懸液與等量0.04臺盼蘭混勻，在計數(shù)板上蓋玻片的一側(cè)加該細胞懸液，加樣量不要溢出蓋玻片，也不要過少或帶氣泡。計算細胞密度。用DMEM制備成1106/ml的細胞懸液，并按10的量加入小牛血清。5、將上述細胞懸液分裝5ml到新細胞瓶中，塞好塞子，送培養(yǎng)箱培養(yǎng)，24h后觀察。以備實驗五、六、七用。實驗五 VSV TCID50滴定（注：此實驗和實驗五、六同時進行）一、目的掌握病毒TCID50滴定的基本原理和計算方法以及應(yīng)用。二、原理多數(shù)病毒感染體外培養(yǎng)的細胞后，常引起細胞形態(tài)學(xué)

11、改變，如細胞團縮、裂解和細胞腫大等，這種改變稱為病毒致病變效應(yīng)（cytopathic effect，CPE），可以直接通過顯微鏡觀察，亦可通過染色得以識別和判斷。CPE的程度可間接反映病毒的毒力，因此利用這種特征可以用來測定病毒的毒力。即能在細胞培養(yǎng)板孔或試管內(nèi)引起半數(shù)細胞發(fā)生病變所需的病毒量定義為病毒的組織細胞感染指數(shù)（tissue culture infection dose，TCID50）。 測定時，首先在微量細胞板上培養(yǎng)敏感細胞，待細胞貼壁形成單層，棄上清。將待測病毒用維持液做10倍稀釋后加入細胞單層，逐日觀察，直至病毒產(chǎn)生的CPE不再進展為止。具體時間根據(jù)病毒的增殖特點而定，如腸道病

12、毒增殖迅速，一般48h即可；VSV增殖也較快，因此，48h72h也可以觀察、染色、計算。三、 材料與器材名 稱數(shù) 量備 注Hep-2細胞實驗五傳代所得，自備/組水泡性口炎病毒（VSV）自備/組維持液，PBS，VTP自備/組細胞板1塊/組tip頭4盒/組微量移液器自備四、 操作步驟1、制備細胞：方法同實驗五。一瓶細胞消化后加入8ml營養(yǎng)液即可制成所需細胞懸液。密度約為1106/ml。用微量移液器將細胞懸液加入40或96孔板微孔中，每孔100l，37，5%CO2孵育箱培養(yǎng)24h，形成單層，做病毒滴定用。2、50%組織細胞感染量（TCID50）測定（a）稀釋病毒液：取無菌小試管或青霉素瓶9支，各管分

13、別加3%小牛血清的維持液2.7ml，然后向第一管加VSV病毒液0.3ml，反復(fù)吹吸混合三次，從第一管內(nèi)吸液0.3ml加入第二管內(nèi)，反復(fù)混合三次，從第二管內(nèi)吸液0.3ml加入第三管內(nèi)，反復(fù)混合三次，依此類推將待測的病毒液做連續(xù)10倍稀釋，使病毒稀釋為10-1，10-2，10-310-9。（b）病毒接種：將長好單層細胞的培養(yǎng)板各孔細胞液全部傾棄，用微量移液器把各稀釋度的VSV病毒從低濃度開始依次加入各微孔中，每稀釋度平行加2孔，每孔100l。細胞對照孔不加病毒液，只加維持液。置37，5%CO2孵育箱中孵育。（c）結(jié)果觀察：于孵育后18、24、36、48、72h在倒置顯微鏡下觀察CPE，病毒可引起細

14、胞圓縮、堆聚及脫落現(xiàn)象?！?”表示細胞正常；“+”25%細胞產(chǎn)生病變、圓縮、破碎脫落；“2+”50%細胞產(chǎn)生病變；“3+”75%細胞產(chǎn)生病變；“4+”100%細胞產(chǎn)生病變。（實驗時，觀察24h48h即可染色計算）3、計算TCID50參見下表：表1 VSV在Hep-2細胞上的TCID50結(jié)果記錄病毒稀釋度病變孔數(shù)/接種孔數(shù)累積數(shù)（孔）病變細胞孔有病變無病變比例百分比（%）10-38/810010/1010010-42/8262/82510-50/80140/14010-60/80220/22010-70/80300/30010-80/80380/380按表中，10-3稀釋的病變高于50%；10-

15、4稀釋的病變低于50%；50%病變分布于10-3與10-4之間，計算公式如下： 高于50%病變率-50% 100-50距離比例= = =0.67 高于50%的病變率-低于50%的病變率 100-25 即1個TCID50=10-3.67,查0.67的反對數(shù)為4.68,即病毒做4.68103倍稀釋時取0.1ml接種細胞，即可使50%細胞產(chǎn)生病變.附錄:如何計算200個TCID50？4.38103200=23.4,將病毒作23.4倍稀釋時即得200個TCID50。五、 計算請計算提供的病毒的TCID50。六、寫實驗報告并計算給定的病毒的TCID50。附錄3一、關(guān)于50%終點法的計算（參見病毒學(xué)檢驗（

16、李洪源）人民衛(wèi)生出版社2007）1） Reed-Muench法計算CCID50舉例如下： VSV在Hep-2細胞上的TCID50結(jié)果記錄病毒稀釋度病變孔數(shù)/接種孔數(shù)累積數(shù)（孔）病變細胞孔有病變無病變比例百分比（%）10-34/4909/910010-43/4515/68310-52/4232/54010-60/4070/70由上表可知該病毒的CCID50介于10-4與10-5兩個稀釋度之間，二稀釋度之間的距離比例為： 高于50%感染百分數(shù)-50% 83-50距離比例= lg稀釋倍數(shù)= =-0.767 高于50%的感染百分數(shù)-低于50%的感染百分數(shù) 83-40低稀釋度的對數(shù)（高于50的感染百分數(shù)

17、）lg10-4=-4lgCCID50=高于50的感染百分數(shù)的低稀釋度的對數(shù)距離比例 （-4）（-0.767）4.767-4.8 因此該病毒的CCID50為10-4.8/0.1ml，也就是說，此病毒的10-4.8的濃度（即1：63000）按0.1ml接種一組細胞孔后，可使50%的細胞感染，即有50%病變的可能性。2）Karber法計算二、實驗結(jié)果的觀察（病毒學(xué)檢驗P55）1、觀察結(jié)果 于培養(yǎng)后的不同時間，如18h、24h、36h等，在倒置顯做鏡下觀察細胞病變情況。 a）細胞病變程度表示法 通觀整個“單層區(qū)”，權(quán)衡總的情況，以下列符號表示其病變程度： -表示無細胞病變+表示1%25%的細胞病變+2

18、6%50%的細胞有病變+51%75%的細胞有病變+76%100%的細胞有病變b）記錄結(jié)果 病毒引起細胞病變效應(yīng)的滴度以半數(shù)細胞培養(yǎng)感染量（cell culture infectious dose，CCID50）表示，即凡能使50%（半數(shù)）細胞出現(xiàn)病變的最高病毒稀釋度，即為50%感染單位，簡稱CCID50。有時也稱其為半數(shù)組織培養(yǎng)感染量（50% tissue culture infectious dose，TCID50）。細胞病變效應(yīng)出現(xiàn)的時間，不同病毒不完全一樣，以感染細胞的病變不再發(fā)展，而對照細胞仍然完好為準(zhǔn)。實驗六 干擾素活性（效價）的測定（注：此實驗所需的細胞為實驗四時傳代培養(yǎng)所得）一、

19、目的1、掌握微量細胞病變抑制法測定干擾素效價的基本步驟以及結(jié)果分析。2、熟悉常用生物制品生物學(xué)活性測定的實際意義。3、了解影響結(jié)果的常見因素。二、基本原理病毒或其他干擾素誘生劑作用于巨噬細胞、T細胞或成纖維細胞后，由細胞基因自身編碼產(chǎn)生的具有抗病毒、抗腫瘤和調(diào)節(jié)免疫功能的一類小分子糖肽，統(tǒng)稱為干擾素。干擾素發(fā)揮重要的酶的特性而抑制病毒DNA和蛋白質(zhì)的合成，從而抑制病毒在細胞內(nèi)的增殖。因此具有間接的廣譜抗病毒作用。為了進一步確定人工方法制備的干擾素的生物學(xué)活性，需進行體外抗病毒試驗測定，即干擾素效價的測定。干擾素效價一般定義為：凡1ml干擾素標(biāo)本的最高稀釋度仍能保護半數(shù)細胞（50）免受“攻擊病毒

20、”損害者，該稀釋度的倒數(shù)即為干擾素的效價，即單位/毫升。三、測定方法 測定干擾素效價的方法有多種，最常用的是“細胞病變抑制法”（Method of Cytopathic effect inhibition assay，簡稱CPE法）。此法的主要優(yōu)點是操作簡便，易于掌握，結(jié)果可靠，故已成為目前各實驗室的常規(guī)。亦可用“放射化學(xué)測定法”、“染料攝入測定法”。本次實驗也主要采用前法。下面就此法的發(fā)展做一簡要闡述。1、全量細胞病變抑制測定法優(yōu)點：操作簡單、易于掌握、結(jié)果可靠缺點：大量測定時，耗費細胞量太大，清洗工作量大，判斷結(jié)果不能完全排出主觀因素。2、常規(guī)微量細胞病變抑制測定法此法是在“全量法”基礎(chǔ)上

21、加以改良的一種方法，它的最大優(yōu)點是：需用細胞量少，適于大量干擾素標(biāo)本檢測。其主要缺點是：判斷結(jié)果不能完全排除主觀因素。具體操作形式有：先使細胞培養(yǎng)2448h形成單層后，再加入不同稀釋度的干擾素孵育24h，棄去，再加入100TCID50的攻擊病毒，繼續(xù)孵育直至病毒對照出現(xiàn)完全病變?yōu)橹?。主要特點是干擾素稀釋標(biāo)本和細胞同時加，優(yōu)點是細胞對攻擊病毒較敏感，且省時。兩種方法滴定的干擾素效價無明顯差別。3、微量快速檢測法（一步快速法)本法的特點是干擾素（不同稀釋倍數(shù)）、細胞（一定濃度）和病毒（一定量）三者同時加入。因為干擾素誘導(dǎo)細胞形成“抗病毒狀態(tài)”要先于病毒的復(fù)制與成熟，即VSV的復(fù)制周期為7小時，而干

22、擾素作用于靶細胞后約1小時即形成抗病毒狀態(tài)。但一步快速法的敏感性隨病毒攻擊劑量的提高而迅速下降。因此常規(guī)微量法比微量快速法穩(wěn)定。四、材料準(zhǔn)備1、待測標(biāo)本 為了除去非干擾素抑制物，待測標(biāo)本應(yīng)作（1）離心處理；（2）pH處理（此步學(xué)生不需做）?？煞盅b為2040l /份/2人。2、測定細胞 應(yīng)根據(jù)“種屬特異性”選擇測定細胞。本實驗室選用生長良好的一日齡或兩日齡人羊膜單層細胞傳代培養(yǎng)物(WISH)或人喉癌上皮細胞（Hep-2），本次實驗選取后者。3、攻擊病毒 選用具有“同步致病作用”的VSV(Vesicular Stomatitis Virus)作為“攻擊病毒”。使用前，應(yīng)先在原代雞胚成纖維細胞培養(yǎng)物

23、（約400萬細胞/毫升）中傳代增殖及滴定病毒的空斑形成單位（PFU）或在人羊膜單層細胞上滴定其TCID50。病毒的攻擊量一般可選100300個TCID50（一般不得小于10個TCID50，不得大于500個TCID50）。4、胰蛋白酶混合消化液VTP，其胰蛋白酶和Versene的最終濃度分別為0.05和0.02。用VTP比單用胰蛋白酶作消化液對細胞的損傷要小些。5、營養(yǎng)培養(yǎng)基 配方是（1）DMEM；（2）10%滅活小牛血清；（3）雙抗。最后用NaHCO3調(diào)pH至7.27.4。6、微量細胞培養(yǎng)板 無菌40孔進口板1塊/組。7、CO2培養(yǎng)裝置 采用CO2孵箱（CO2為5%，空氣為95%）。8、其他器

24、材：5ml吸管2只/組，1ml吸管1只/組，tip頭1盒/桌。 五、操作步驟1、稀釋待檢干擾素（在微量滴定板上直接進行）（1）配制10小牛血清的營養(yǎng)液5ml，除第一列外，在第一、二排的第210孔各加100l營養(yǎng)液；（2）將待檢干擾素進行400倍稀釋后，分別取100L于第一孔和第二孔，將第二孔，充分吹吸3次，吸出100l于第三孔，重復(fù)上述操作，直到第8孔，吹吸后棄去100l。因此依據(jù)倍倍稀釋原則對干擾素進行系列稀釋，各孔的稀釋倍數(shù)如下表所列。管號123456789（細胞對照孔）10（病毒對照）營養(yǎng)液（L）100100100100100100100100100干擾素（L）200上一孔的100上一孔

25、的100上一孔的100上一孔的100上一孔的100上一孔的100上一孔的100，棄去100干擾素稀釋倍數(shù)1：4001：8001：16001：32001：64001：128001：256001：51200細胞每孔均為100l第九孔為細胞對照孔，不加干擾素保護也不加病毒攻擊；第十孔為病毒對照，不加干擾素保護加病毒攻擊。第二排按照同樣方法進行，即每個稀釋度重復(fù)兩孔。每孔含量為100l。2、微量單層細胞培養(yǎng)（1）按常規(guī)方法將預(yù)先培養(yǎng)好的細胞單層用VTP消化下來;（2）用營養(yǎng)培養(yǎng)基將細胞制成40萬個細胞/毫升的懸液;（3）用加樣器向微量細胞培養(yǎng)板每孔中加入100L細胞懸液（加時不斷搖勻瓶中的細胞）;（4

26、）置CO2孵箱中培養(yǎng)1824h。3、病毒攻擊觀察到細胞單層良好時，將各孔內(nèi)含干擾的培養(yǎng)液倒掉，于每孔中加入100TCID50的攻擊病毒VSV 100l，該病毒用3維持液稀釋，細胞對照組加入等量的維持液。本組加入24小時引起75100病變的VSV 100l。置37孵育2440小時。4、觀察結(jié)果4.1 可直接倒置顯微鏡觀察。在規(guī)定的時間內(nèi)首先觀察“細胞對照組”和“病毒對照組”，若病毒對照組各孔中的細胞出現(xiàn)75100的明顯病變和死亡，而細胞對照組中的細胞仍完全生長良好，則表明對照系統(tǒng)完全合格，即可作全面觀察。否則棄去重做。每孔中出現(xiàn)的細胞病變（CPE）程度，用表示。一般病毒對照孔，出現(xiàn)+或+，干擾素

27、保護孔CPE不再進展，則可終止反應(yīng)，并染色。4.2 結(jié)晶紫染色：將上述反應(yīng)板取出，棄去孔內(nèi)液體于消毒液中，每孔加入1滴染色液，35min后，棄去，洗凈孔內(nèi)殘余液體，控干即可記錄結(jié)果。細胞著色的深淺可以直觀反應(yīng)CPE出現(xiàn)的程度，一般時板孔內(nèi)幾乎無可見的細胞貼壁層，無CPE時則板孔內(nèi)細胞貼壁層完整。六、結(jié)果判斷與計算分析1、效價單位：效價以單位/毫升表示一般判定法：凡1ml干擾素標(biāo)本的最高稀釋度仍能保護半數(shù)細胞（50）免受“攻擊病毒”損害者，該稀釋度的倒數(shù)即為干擾素的單位/毫升。如某干擾素稀釋到1：8000時仍能保護半數(shù)細胞（50）免受“攻擊病毒”的損害，即出現(xiàn)的稀釋度，則該干擾素的效價即為800

28、0單位/毫升。特殊計算法（通常按照Reed-Muench法計算） 計算保護百分比，見下表A項B項C項D項E項F項G項干擾素稀釋度病變細胞正常細胞平均數(shù)累積比例百分比（）管1管2管1管2病變正常病變（）正常（）正常/(正常病變)1：400（22102）1：800（2 3 102 ）1：1600 （2 4 102 ）1：3200 （25 102 ）1：6400 （2 6 10 2 ）1：12800 （2 7 102 ）1：25600 （2 8 102 ）1：51200 （2 9 102 ）0012234400122344443221004432210000122344443221000013581

29、216161285310016 /1612 /128 /95 /83 /81 /9001001008963381100A、B、C項為原始數(shù)據(jù)，4表示全部細胞病變；3表示75細胞病變；2表示50細胞病變；1表示25細胞病變。求出干擾素單位從上表中可大略看出，此批干擾素能保護半數(shù)（50）細胞不被“攻擊病毒”損害的最高稀釋度在1：32001：6400之間。因此，可通過下式求出其距離比。 高于50的百分比50 6350距離比 0.52 高于50的百分比低于50的百分比 6338即此批干擾素稀釋到25.52 102 （1:4588）時，能保護半數(shù)細胞免受“攻擊病毒”損害，其結(jié)果可記為5.52Log2+2單位/毫升（5.52Log22 u. ml1）。4、工作單位修正各實驗室所測得的干擾素單位，習(xí)慣上一般都稱為該實驗室“工作單位”。為了表明某種干擾素效價的高低，就必須用同型國際干擾素參考制劑加以修正。例如，當(dāng)我們要修正本實驗室所制備的獸用白細胞干擾素的效價時，就應(yīng)當(dāng)：（1）查明獸用白細胞干擾素參考制劑的標(biāo)準(zhǔn)單位(R1) （2）并在相同條件下測出獸用白